Тема: Определение белковых фракций методом электрофореза.

Цель самоподготовки: после изучения данной темы Вы должны

Иметь практический опыт:

· определять показатели белкового обмена

Знать:

· причины гипо- и гиперпротеинемий, диспротеинемии, парапротеинемии;

· значение протеинограмм в диагностике заболеваний;

· пройденные методики исследования белкового обмена: принцип метода, ход определения, расчет результатов;

· клинико-диагностическое значение и нормальные показатели белкового обмена.

Уметь:

· подсчитать протеинограмму по данным оптической плотности.

Литература для самоподготовки:

1. М.В. Ермолаев, Л.П. Ильичева, «Биологическая химия», М., Медицина, 1989г.

2. Л.М. Пустовалова, «Основы биохимии», Ростов-на-Дону, «Феникс», 2003г.

3. Лекции по разделу 5. Проведение лабораторных биохимических исследований по определению показателей белкового обмена.

4. Информационный блок по разделу 5. Проведение лабораторных биохимических исследований по определению показателей белкового обмена.

План изучения темы:

1. Продолжить подготовку к контрольной работе по теме «Обмен белков в норме и патологии».

2. Выписать в конце дневника показатели белкового обмена с указанием диапазона нормальных величин и размерности.

3. Составить сводную таблицу по методикам исследования белкового обмена.

4. Повторить контрольные вопросы к занятиям № 1-4.

5. Повторите методики исследования белкового обмена: метаболизм показателя, нормальные величины, методики определения, принцип методов, клинико-диагностическое значение их определения.

6. Выполните прилагаемые задания по данной теме.

Задания к занятию № 5

1. Составьте сводную таблицу по методикам исследования белкового обмена.

Название показателя	Методы определе-ния	Принцип метода	Условия колоримет-рирования	Нормаль-ные величины	Клинико-диагнос-тическое значение

Сводную таблицу лучше начать делать в отдельной ученической тетради на развернутом листе с тем, чтобы далее продолжить внесение показателей по другим видам обмена. В графе «Условия колориметрирования» укажите окраску, развивающуюся в процессе цветной реакции (цветной квадрат). В графе «Нормальные величины» - коэффициент пересчета в другие единицы измерения.

2. Вспомните факторы, влияющие на определение общего белка сыворотки крови биуретовым методом:

________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

3. Укажите патологические состояния, соответствующие гипер- и гипопротеинемии:

А. гиперпротеинемия	1. нефротический синдром
Б. гипопротеинемия	2. миеломная болезнь
	3. заболевания желудка и кишечника
	4. вирусный гепатит

4. Проведите анализ показателей содержания общего белка в сыворотке крови и укажите изменения по отношению к норме.

При обследовании пациентов получены следующие цифры содержания общего белка:

40 г/л –

94 г/л –

67 г/л –

102 г/л –

58 г/л –

5. Укажите значения нормальных величин в сыворотке крови для каждого показателя:

Показатель	Нормальные величины
общий белок
альбумин
мочевина
креатинин
индикан
мочевая кислота

6. Выберите реактивы, используемые для определения каждого показателя:

А. общий белок	1. пикриновая кислота
Б. альбумин	2. сульфат меди
В. мочевина	3. NaOH
Г. креатинин	4. ТXУ
Д. индикан	5. диацетилмонооксим
Е. Мочевая кислота	6. уреаза
	7. уриказа
	8. р-р Фолина
	9. H2SO4
	10. бромкрезоловый зеленый

7. Правильны ли нижеприведенные высказывания (после каждого предложения напишите «да», если согласны с высказыванием, или «нет», если высказывание неправильно):

Азотемия – это изменение компонентов остаточного азота в моче.

Большую часть остаточного азота составляет мочевина.

Относительная азотемия может наблюдаться при вливании большого количества жидкости.

Азотемия может подразделяться на продукционную и почечную.

Почечная азотемия наблюдается при нарушении выделительной функции почек при острой или хронической почечной недостаточности.

Продукционная азотемия может быть связана с усиленным распадом тканей, например, при краш-синдроме.

Какой вид азотемии не указан в тексте, его возможные причины?

________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

8. Изучите пробу клиренс эндогенного креатинина.

Какую функцию почек отражает проба? _____________________

________________________________________________________

Выпишите возможные варианты проведения пробы:

I вариант (с водной нагрузкой)	II вариант

Что такое клиренс? _______________________________________

________________________________________________________

Как подсчитывают КФ - ?

________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

КР - ?

________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Какие показатели нужно иметь для расчета пробы?

1. ________________________________________________________

2. ________________________________________________________

3. ________________________________________________________

Какие дополнительные показатели нужно иметь для более точной оценки клиренса?

________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

9. Объясните следующую запись:

Триптофан индол индикан

________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

10. Прочитайте алгоритм определения биохимического показателя в сыворотке крови. Какой это показатель и какой методикой он определяется?

1) Вносят в химическую пробирку рабочий раствор, смешивая р-р реагента и раствор H2SO4 в соотношении 1 : 1.

2) В опытную пробирку добавляют сыворотку крови, в стандарт – стандартный раствор данного вещества. Контролем служит контроль реактивов.

3) Выдерживают пробы 10 минут на кипящей водяной бане.

4) Охлаждают 2-3 минуты в струе холодной воды.

5) Колориметрируют.

6) Рассчитывают содержание вещества в пробе по концентрации стандартного раствора.

…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………

11. Задача № 1

Подсчитайте клубочковую фильтрацию и канальцевую реабсорбцию по следующим данным, сделайте вывод.

Суточный диурез – 1600 мл

Креатинин сыворотки – 0,084 ммоль/л

Креатинин мочи – 7,6 ммоль/л

__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

12. Задача № 2

После проведения пробы «клиренс эндогенного креатинина» были получены следующие данные:

клубочковая фильтрация – 72 мл/мин

канальцевая реабсорбция – 95 %

Оцените данные, полученные у пациента. Что можно сказать о выделительной функции почек?

______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Контрольные вопросы к занятию № 5

1. Схема исследования белкового обмена.

2. Определение общего белка сыворотки крови биуретовым методом: принцип метода, нормальные показатели, клинико-диагностическое значение.

3. Принципы построения калибровочных графиков.

4. Построение калибровочного графика для определения общего белка биуретовым методом.

5. Определение альбумина в сыворотке крови: принцип метода, нормальные показатели, клинико-диагностическое значение.

6. Определение мочевины в биологических жидкостях: основные методы, принцип методов, особенности проведения методик, нормальные показатели, метаболизм мочевины, клинико-диагностическое значение определения.

7. Определение креатинина по цветной реакции Яффе: принцип метода, нормальные показатели, метаболизм креатинина, клинико-диагностическое значение определения. Источники ошибок при проведении методики.

8. Клиренс эндогенного креатинина.

9. Построение калибровочного графика для определения креатинина.

Занятие № 6.