Методы определения ацетона и ацетоуксусной кислоты

1) Проба Легаля на ацетон:

- 1 капля мочи + 1 капля 10%NaOH + 1 капля нитропруссида натрия . При положительной реакции наблюдается оранжево-красное окрашивание. При дополнительном добавлении 3-х капель СН3СООН наблюдается вишнёво-красное окрашивание .

2) Проба Герхарда на ацетоацетат :

- 5 капель мочи + 5% р-р FeCl3 и по каплям добавлять FePO4 , в случае наличия ацетоацетата наблюдается вишнёво-красное окрашивание .

Данные положительной реакции свидетельствуют о кетонурии , которая является следствием кетонеми .

Кетонемия наблюдается при голодании , при сахарном диабете и объясняется следующим образом :

и диабет и голодание сопровождается резким сокращением запасов гликогена . Многие ткани и органы находятся в состоянии энергетического голода ( так как при недостатке инсулина глюкоза не может поступать в клетки ) . В этой ситуации импульсы от орецепторов клеток , испытывающих энергетический голод , поступают в ЦНС и резко усиливают липолиз и мобилизацию жирных кислот из жировых депо в печень . В печени происходит интенсивное в-окисление и образование большого количества кетоновых тел . Очень большое количество кетоновых тел поступает в периферические ткани , которые не в состоянии их использовать в таком количестве , и кетоновые тела накапливаются в крови , а как только их концентрация в крови превысит почечный порог , они появляются в моче .

БИОСИНТЕЗ ТРИГЛИЦЕРИДОВ.

Синтез триглицеридов происходит из жирных кислот ( в основном стеариновой , пальмитиновой и олеиновой ) .

Путь биосинтеза триглицеридов в тканях протекает через образование глицерол-3-фосфата, как промежуточного соединения . В почках , энтероцитах , где активность глицеролипазы высока , глицерин фосфорилируется АТФ до глицерол-3-фосфата .

1) СН2 – ОН СН2 – OH

| |

CH – OH + АТФ глицеролкиназы CHOH + АДФ

| |

CH2 – OH CH2OPO3H2

Глицеролтрифосфат

В жировой ткани и мышцах вследствие очень низкой активности глицеролипазы образование глицерил-3-фосфата в основном связано с гликолизом . Известно . что в результате гликолиза образуется диоксиацетонфосфат , который в присутствии глицерофосфатдегидрогеназы способен превращаться в глицерол-3-фосфат . В печени же наблюдается два пути образования глицерол-3-фосфата .

В тех случаях , когда содержание глицерина в жировой ткани понижено (при голодании), образуется лишь незначительное количество глицерола-3-фосфата и освободившиеся в ходе липолиза жирные кислоты не могут быть использованы ввиду этого для ресинтеза триглицеридов , поэтому они покидают жировую ткань и количество резервного жира снижается .

После образования глицерола-3-фосфат процесс синтеза триглицеридов идёт так :

2) CH2OH R1 – COSKoA O

| ||

CHOH + глицерофосфаи CH2 – O – C – R1 + 2HSKoA

| R2 – COSKoA ацетилтрансфераза O

CH2OPO3H2 КоА - произвдные ||

Жирных кислот CH – O – C – R2

|

CH2 – O – PO3H2

Фосфатидная кислота

3) CH2 – O – CO – R1 CH2 – OCOR1

| фосфатидатфосфатаза |

CH – O – CO – R2 + HOH CH – O – COR2

| |

CH2 – O – PO3H2 CH2OH

1,2 – диглицерид

4) CH – O – COR1 CH2 – O – CO – R1

| |

CH – O – COR2 + R3 – CO – SKoA CH – O – CO – R2

| |

CH2OH CH2 – O – CO – R3

Триглицерид