Определение уровня глюкозы в крови (сыворотке, плазме)

1. Перед введением пробы в датчик промойте анализатор (нажмите кнопку «Промывка»).

2. После остановки насоса нажмите кнопку "СБРОС". Индикаторы должны показывать в пределах 0,00... 0,05. В противном случае проведите установку нуля и калибровку прибора.

3. Введите в анализатор пипеточным дозатором (сменив наконечник!) кровь или сыворотку. При установившемся значении показаний индикаторов (около 10 сек.) на табло высветится содержание глюкозы в ммоль /л.

4. Нажмите кнопку "Промывка", а после остановки насоса нажмите кнопку "Сброс". Анализатор готов для введения новой пробы.

5. Для набора новой пробы дозатором замените его насадку новой.

6. Через 10 определений - проверьте прибор по стандартному раствору глюкозы (провести калибровку). По мере старения мембраны может не устанавливаться 10 ммоль/л по калибровочному раствору глюкозы. В этом случае можно увеличить чувствительность прибора, переключив тумблер на задней панели прибора max – min.

Ответьте на вопросы:

1. В каких случаях необходимо исследование концентрации глюкозы в крови и моче?

2. Чем опасна для организма человека длительная гиперглигемия.

3. Какие гормоны и как влияют на процессы гликолиза, глюкогеогенеза и гликогенеза?

4. Чем отличаются процессы глюконеогенеза, гликолиза, гликогенеза?

5. *Какие ферменты участвуют в процессах гликогенеза, гликолиза, глюконеогенеза? Напишите схематичные уравнения реакций, укажите эти ферменты.

6. *Напишите уравнения реакции образования глюкозо-6-фосфата и ПВК из глюкозы.

Практическая работа

«Определение количества глюкозы и кетоновых тел в моче

с помощью индикаторных полосок».

Цели практической работы:

· закрепить знания о превращениях глюкозы в организме;

· научиться исследовать уровень глюкозы и кетоновых тел в моче с помощью индикаторной бумаги.

Задания для самостоятельной работы:

1. Перепишите в тетрадь принцип и методику проведения практической работы.

2. Оборудуйте рабочее место для практической работы.

3. Выполните практическую работу.

4. Сделайте необходимые расчеты.

5. Заполните бланк анализа. Оцените полученные результаты.

6. Сделайте вывод по работе и рисунки.

7. Ответьте на дополнительные вопросы.

Принцип.

При окислении глюкозы с помощью фермента глюкооксидазы образуется перекись водорода. Она разлагается другим ферментом - пероксидазой и окисляет краситель орто-толуидин, который изменяет свой цвет, что говорит о наличии глюкозы в моче. Этот метод определения глюкозы в моче - полу качественный - дает возможность определить сахар ориентировочно.

Реактивы: 1. Моча. 2. Диагностические тест-полоски.

Оборудование: 1.Пробирка.

Ход определения:

· Индикаторную бумагу смочите исследуемой мочой и сравните со стандартной цветной шкалой.

· Индикаторная бумага пропитана реактивной смесью, содержащей ферменты глюкозооксидазу и пероксидазу и много других веществ, среди них 0-толуидин – краситель.

Оценка результатов.

При увлажнении мочой светло-желтой полосы:

1. Если цвет полосы не изменяется - глюкоза отсутствует.

2. Если цвет становится от светло-зеленого - до темно-зеленого - глюкозы содержится 0,1-2%.

3.Интенсивность не меняется - глюкозы больше 2%.

Этот метод прост, быстро выполним, и может быть использован при массовых исследованиях. Комплект содержит 100 полосок индикаторной бумаги, цветную шкалу. Индикаторная бумага имеет поперечную полосу светло-желтого цвета, пропитанную раствором фермента.