Методы микробиологической диагностики эпидемического цереброспинального менингита.
Материал для исследования: ликвор, который берут в день госпитализации больного асептическилюмбальной пункцией 2-5 мл. Собирают в стерильную пробирку и сразу же сеют на питательные среды или же, не допуская охлаждения, отправляют в лабораторию.
1. Бактериоскопический метод: если ликвор имеет вид гноя, то мазок готовят без ее предварительной обработки; если ликвор мутный, то его центрифугируют и делают мазок из осадка. Окрашивают по Граму, метиленовым синим. Микроскопия: типичные грамотрицательные диплококки бобовидной формы, окруженных капсулой в виде плохо окрашенного ореола.
2. Экспресс-диагностика: обнаружение в ликворе специфического АГ с помощью латекс- агглютинации, ИФА.
3. Бактериологический метод:
-посев осадка центрифугированного ликвора на поверхность подогретой питательной среды в чашке. Инкубация при 37 гр. с повышенным содержанием СО2
- учет роста колоний: Макроскопия- мелкие круглые выпуклые прозрачные колонии, и микроскопия- полиморфные грамотрицательные диплококки. Колонии пересевают на скошенный сывороточный агар для получения ЧК.
- идентификация выделенной ЧК: посев па пестрый ряд, определение чувствительности к антибиотикам, определение серовара менингококка.
4. Серологический метод: РНГА с эритроцитами, нагруженными антителами. ИФА с теми же АГ
61.Специфическая профилактика менингококковой инфекции.
Специфическая профилактика(активная и пассивная) проводится в очаге инфекции. Для создания пассивного иммунитета детям дошкольного возраста вводят однократно иммуноглобулин в дозе 1,5-3,0 мл не позднее 7-ого дня после регистрации первого случая заболевания .Профилактический эффект иммуноглобулина сохраняется в течение нескольких месяцев после введении .Для активной иммунизации используют вакцины из очищенных капсульных полисахаридов менингококков серогрупп А и С.В России проводят вакцинацию групп риска менингококковой вакциной А или бивакциной А и С .Кроме того, возможно проведение химиопрофилактики с применением антибиотиков в замкнутых коллективах ,если имеет место хотя бы один случай менингококковой инфекции.
62.Характеристика гонококков.
СемействоNeisseriacae
Род Neisseria
Вид Neisseria gonorrhoeae.
Морфология:неподвижные грамотрицательные диплококки , имеют форму кофейных зерен, образуют капсулу.Под действием лекарственных средств могут менять форму: н-р ,под действием пенициллина переходят в L-форму. Хорошо окрашиваются анилиновыми красителями.
Культуральные свойства : аэробы, оптимум рH 7,2-7,4, t-t-7гр.Не вызывают гемолиза на средах, содержащих кровь На средах с добавлением молока и желатина не растут.На жидких пит. средах растут диффузно, образуя поверхностную пленку. На плотных средах при наличии в клеточной стенке протеина 2 образуют мутные бесцветные колонии, а при отсутствии этого белка- круглые прозрачные колонии в вилле капель росы с ровными краями.
Биохимичская активность крайне низкая. Разлагают только глюкозу с образованием кислоты .Протеолитическая активность отстствует, аммиака , индола и сероводорода не образуют.
Антигенная структура:Содержит соматический и капсульный антигены. ЛПС проявляют сильные иммуногенныесвойства.Также имеются пили и поверхностные белки наружной мембраны( протеины 1,2,3 классов,кот.проявляют сильные иммуногенные свойства ).
Факторы патогенности: капсула, пили,эндотоксин,протеазы,поверхностные белки наружной мембраны.
Гонококки очень неустойчивы в окружающей среде.
63.Бактериологический метод исследования гонореи.
Его проводят в случаях , когда в мазках при микроскопии гонококки не обнаруживаются.
Материал: отделяемое из уретры,предстательной железы, канала шейки матки,идр.Посев производят непосредственно после взятия материала.За 2-3 сутки перед забором материала необходимо прекратить применение антибиотиков
Для культивирования гонококка используется МПА с добавлением асцитической жидкости- асцит-агар. Для подавления сопутствующей микрофлоры в среду добавляют антибиотики. Посевы культивируют при t37гр., 24часа.
Макроскопия: мелкие ,бесцветные , блестящие колонии в виде росы, с ровными краями.
Микроскопия: гр.- диплококки. Характерным признаком является раннийаутолиз центральной части колоний.
Затем выделяем ЧК , кот. идентифицируем по морфологическим, тинкториальным и биохимическим свойствам. У выделенной культуры роверяют чувствительность к антибиотику(пенициллину).
64. Экспресс- метод диагностики гонореи. Используется РИФ .Реакция основа на специфическом взаимодействии антигенов возбудителя гонореи с меченными антителами, содержащимися в противогонорейной люминесцирующей сыворотке.При этом образуются иммунные комплексы, кот. в люминесцентном микроскопе дают желто-зеленое свечение. Это говорит о положительном результате реакции.
65.Микроскопическая диагностика гонореи.Это основной метод исследования гонореи. Материал: отделяемое из уретры, предстательной железы, канала шейки матки и. т.д.Готовят два мазка на предметном стекле . Один окрашивают метиленовым синим , а другой о Граму.При микроскопии имеют вид бобовидных гр.отрицательных диплококков , расположенных внутри клеток(чаще нейтрофилов ) , а также внеклеточно.Окраска по Граму позволяет дифференцировать гонококки со стафилококками и др. бактериями.
Гонококковая вакцина.
Используется для диагностики скрытых форм гонореи при хроническом течении болезни. Проводят провокацию биологическим методом: однократное внутримышечное введение гоновакцины взрослым в количестве 500млн микробных тел, детям старше 3-х лет-100-200мн. микробных тел, детям до 3-х лет гоновакцину не вводят. Вакцина гонококковая инактивированная жидкая содержит взвесь инактивированной культуры гонококков в 0,9% растворе хлорида натрия.Концентрация микробных тел в 1 мл. соответствует 10 единицам стандартного образца мутности.
67.Факторы патогенности менингококков. Основной фактор патогенности-капсула , защищающая менингококки от фагоцитоза.Токсические проявления менингококковой инфекции обусловлены высокотоксичным эндотоксином.Тяжесть болезни зависит от количества эндотоксинов в крови больного(вызывают кровоизлияния во внутренних органах). Эти два фактора оказывают сенсибилизирующее действие и индуцируют феномен Шварцмана. К другим факторам патогенности относят пили, белки наружной мембраны , наличие гиалуронидазы и нейраминидазы. Пили являются факторами адгезии к слизистой оболочке носоглотки, тканям мозговой оболочки. Менингококки выделяют IgA- протеазы, расщепляющие молекулы IgA, что защищает бактерии от их действия.
68.Методы микробиологической диагностики менингококкового сепсиса. В качестве экспресс-метода диагностики приготавливают мазок толстой капли крови на менингококк , взятый из пальца или вены. На середину предметного стекла наносят каплю крови и распределяют палочкой так , чтобы диаметр мазка соответствовал величине копеечной монеты. Стекло оставляют в горизонтальном положении для подсушивания. Затем без фиксации его окрашивают 1% водным раствором метиленового синего в течение 2 мин и обнаруживают 5-20 менингококков, фагоцитированных лейкоцитами. Также можно провести бактеориологическое исследование крови. Оно проводится редко, так как препатат «толской капли» крови в 50-90% случаев дает положительный результат.
69.Менингококковые вакцины. Для специфической профилактики используют
менингококковую химическую вакцину( из полисахаридных антигенов серогрупп А и Б), которая эффективна при иммунизации людей в коллективах , где широко распространено носительство менингококков серогрупп А и Б.
Созданы вакцины группы В на основе белков наружной мембраны менингококков; эти вакцины иммуногенны, но только в отношении штаммов возбудителя, использованного в ее производстве.