Методы микробиологической диагностики бешенства

А. Вирусоскопический

Материал:ткань аммонова рога, мозжечка, продолговатого мозга. Рис.7

Микроскопия мазков-отпечатков или мазков, приготовленных из эмульсии мозга и окрашенных по Манну (Туревичу), на наличие телец Негри (малинового цвета). При наличии флуоресцирующих антител применяют метод люминесцентной микроскопии.

Б. Биологический

Материал: мозговая ткань, слюна животных.

Внутримозговое заражение белых мышей. При наличии вируса бешенства мышь через 7-9 дней заболевают и гибнут. При микроскопии мазков из мозговой ткани обнаруживают внутриклеточные включения Негри.

Контрольные вопросы

Какие вирусы вызывают острые респираторные заболевания?

Какие вирусы относятся к группе ортомиксовирусов?

Дайте общую характеристику ортомиксовируоов?

Какую структуру имеет вирион гриппа?

Какие микробиологические методы применяются для диагностики вирусных респираторных инфекций?

В чем особенность серологических методов диагностики вирусных респираторных инфекций?

Как производится выделение вируса гриппа?

Как обнаруживается вирус гриппа в курином эмбрионе?

Как производится выделение и идентификация аденовирусов?

В чем сущность РТГА? Каковы особенности ее постановки и учета результатов при обнаружении противогриппозных антител?

В чем заключается сущность иммунофлуоресцентного метода диагностики гриппа?

Какова классификация пикорнавирусов?

Дайте общую характеристику группы энтеровирусов.

Какие микробиологические методы применяют для диагностики полиомиелита и других энтеровирусных заболеваний?

Каков патогенез полиомиелита?

Как выделяют вирус полиомиелита от больных?

Какие серологические методы диагностики могут быть использова­ны при полиомиелите?

Какие заболевания вызывают вирусы Коксаки и ЕСНО?

Какие способы применяются для обнаружения и выделения вирусов Коксаки?

Как обнаруживают и идентифицируют вирусы Коксаки А и В?

В чем сущность реакции преципитации в агаре?

С какой целью используется реакция препитации в агаре в вирусологии?

Как определяется гемагглютинирующий титр вируса гриппа?

Как определяется цитопатическое действие вируса полиомиелита?

Какие микробиологические методы применяются для диагностики бешенства?

Чем отличаются фиксированный и уличный вирусы бешенства?

Каковы основные свойства вируса клещевого энцефалита?

Какие микробиологические методы применяются для диагностики клещевого энцефалита?

Каковы пути заражения А-,В-,дельта-гепатитами?

Что такое вирусный В - гепатит? С- и Е-гепатиты?

Какие биохимические тесты применяются для диагностики вирусного гепатита?

Что такое интерферон?

Приложение к занятию 3

А. Возбудители острых респираторных заболеваний (ОРЗ).

Возбудителями ОРЗ (кроме бактерий) являются следующие вирусы:

РНК-содержащие

1.Ортомиксовирусы (вирусы гриппа А, В и С).

2.Парамиксовирусы парагриппозные вирусы, вирус эпидемического паротита, вирус ньюкаслской болезни, вирус кори, респираторно-синцитиальный вирус).

3.Пикорнавирусы (более 110 серотипов риновирусов, а также некоторые серотипы вирусов Коксаки (А и В) и ECHO).

4.Реовирусы (3-й серотип).

5.Коронавирусы.

ДНК-содержащие вирусы

6. Аденовирусы (41 серотип, из них 8 являются возбудителями ОРЗ).

По частоте - риновирусы - коронавирусы - респираторносинцитиальный вирус - парагриппозные вирусы - аденовирусы - вирусы гриппа. Однако основную роль играет вирус гриппа, вызывающий частые пандемии.

Вирусы гриппа обозначают по однородной кодированной системе. Указывают тип рибонуклеопротеида (род вируса) - А,В,С, географическое место выделения штамма; порадковый номер; год; в круглых скоб­ка - подтип гемагглютинина (Н1-Н13) и нейрамидазы (N I - N 10). Например, А(Сингапур). 1,57 (Н2 N2), А (Гонконг), 1,68 (НЗ N 2).

Для диагностики ОРЗ применяются следующие методы:

1.Вирусологические - заражение культур клеток и эмбрионов.

2.Иммунофлуоресцентный (метод ускоренной диагностики).

3.Серологические реакции - РТГА, РСК, ИМФ.

4.Использование РНК- зонда,

Б. Возбудителями острых кишечных заболеваний (ОКЗ), кроме бактерий, являются следующие вирусы:

1.Полиовирусы (три серотипа).

2.Вирусы ECHO - 34 серотипа.

3.Вирусы Коксаки А - 23 серотипа

4.Вирусы Коксаки В - 6 серотипов.

5.Энтеровирусы - серотипы 68-71.

6.Вирус гепатита А ( 72-й серотип).

7.Ротавирусы - 4 ееротипа.

8.Калицивирусы - вирус Норвольк и др.

9.Астровирусы.

10.Корокавирусы - 3-й серотип.

11.Аденовирусы - некоторые серотипы.

Основные признаки энтеровирусов, по которым они объединяются в один род

1. Вирусологические:

а)размер - 22-30 нм;

б)геном - однонитчатая нефрагментированная позитивная

в)устойчивость к эфиру;

г) повышение терморезистентности в присутствии ионов Mg++ и Ca++

д) устойчивость к желчи, кислотам, щелочам (в диапазоне рН 3,0 - 10,0);

е)способность размножаться в определенных культурах клеток;

ж)число капсомеров (60);

э) устойчивость во внешней среде.

2. Эпидемиологические:

а)выраженная сезонность заболеваний (лето, осень);

б)фекально-оральный путь распространения;

в)выделение вируса из - кишечника, носоглотки, ликвора, крови,

г)обнаружение в сточных водах;

д) преимущественное поражение детей до 12 лет;

е)широкое носительетво среди здоровых людей,

Для диагностики ОКЗ вирусной этиологии могут быть использованы следующие методы:

1.Иммуноэлектронной микроскопии.

2.Иммунологические реакции: коагтлютинации, преципитации в геле (различные варианты), РСК, иммунофлуоресцентный метод, иммуноферментный метод, радиоиммунный метод.

3.Биологические методы.

4.Использование РНК-зондов.

Рис.8 В. Схема строения вирионов вируса группа А.

1-спираль РНП; 2-белок РВ1; РВ2 и РА; 3-гемагглютинин; 4-липидный слой; 5-нейраминидаза; 6-мембранный белок; 7,8-мономер и триммер гемагглютинина; 9,10-мономер и тетрамер нейраминидазы.

Г. Особенности генома вируса гриппа А

Геном вируса гриппа представлен однонитчато фрагментированной негативной РНК с м.м. 5 мегадальтон. Всего фрагментов 8, генов 10. Фрагменты 7 и 8 несут по две рамки считывания.

Фрагмент Белок Молекулярная масса Функция
P3(PB2) 85 кДа Эндонуклеаза
P1(PB1) 96 кДа Транскриптаза
P2(PA) 87 кДа Репликаза
4 (1768 н.о.)* Гемагглютинин HA Мономер 75 кДа HAI-50 кДа HA2-25 кДа Взаимодействует с рецептором клетки
5 (1517 н.о.) Нуклеопротеид NP 60 кДа Структурная и регуляторная
6 (1413 н.о.) Нейраминидаза NA Мономер 50-60 кДа Тетрамер 200-250 кДа Обеспечивает диссеминацию вируса, отщепляя нейраминовую кислоту
7 (1027 н.о.) Матриксный белок: М1 М2   25 кДа 11 кДа Регуляторная роль в морфогенезе вириона
8 (890 н.о.) Неструктурные белки:N1 N2   23 кДа 11кДа Регуляторные белки

* - нуклеотидных остатков

Наши рекомендации