Тема: Возбудители бактериальных зоонозных инфекций: чумы, туляремии, сибирской язвы, бруцеллеза, лептоспироза
ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ЗАНЯТИЯ:
1. Знать теоретический материал по теме занятия.
2. Научиться в готовых мазках распознавать возбудителей чумы, сибирской язвы, туляремии, бруцеллеза, лептоспироза.
3. Уметь ставить и учитывать результаты реакции Райта для серодиагностики бруцеллеза.
4. Уметь распознавать колонии антракоида на МПА.
5. Научиться решать ситуационные задачи по теме занятия.
ВОПРОСЫ К ЗАНЯТИЮ:
1. Возбудитель сибирской язвы: таксономия, свойства, резистентность.
2. Факторы патогенности, механизмы их действия, патогенез и клинические формы сибирской язвы.
3. Лабораторная диагностика, профилактика и лечение сибирской язвы.
4. Возбудители чумы: таксономия, свойства, резистентность.
5. Факторы патогенности, механизмы их действия, патогенез и клинические формы чумы.
6. Лабораторная диагностика, особенности работы с материалом от больного, профилактика и лечение чумы.
7. Возбудители туляремии: таксономия, свойства, резистентность.
8. Факторы патогенности, механизмы их действия, патогенез и клинические формы туляремии.
9. Лабораторная диагностика, профилактика и лечение туляремии.
10. Возбудители бруцеллеза, таксономия, свойства, резистентность.
11. Факторы патогенности, механизмы их действия, патогенез бруцеллеза.
12. Лабораторная диагностика, профилактика и лечение бруцеллеза.
13. Лептоспиры: таксономия, свойства, резистентность.
14. Факторы патогенности, патогенез лептоспироза.
15. Лабораторная диагностика, профилактика и лечение лептоспироза.
16. Биопрепараты: единый бруцеллезный диагностикум, агглютинирующая бруцеллезная сыворотка, лечебная бруцеллезная вакцина, живая бруцеллезная вакцина, бруцеллин, туляремийный диагностикум, агглютинирующая туляремийная сыворотка, живая туляремийная вакцина, тулярин, живая сибиреязвенная вакцина, сибиреязвенный иммуноглобулин, противочумная вакцина.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Лекционный материал.
2. Учебник «Медицинская микробиология» под редакцией проф. Д.К. Новикова, проф. И.И. Генералова, 2003, стр. 219-223, 231-236, 245-248, 276-279.
3. «Практикум по медицинской микробиологии» С.А.Павлович, 1993, стр. 125-127, 132-138, 140-143, 164-166.
САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА:
1. Постановка и учет развернутой реакции агглютинации Райта.
Ингредиенты | Разведения сыворотки больного | |||||
1:100 | 1:200 | 1:400 | 1:800 | 1:1600 | К | |
Физ. раствор | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 |
Сыворотка больного 1:50 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | - |
Диагностикум единый бруцеллезный | По 3 капли во все пробирки | |||||
Результат | ||||||
Заключение: |
2. Микроскопия демонстрационных препаратов:
ПРЕПАРАТ №1 ПРЕПАРАТ №2
Yersinia pestis в органах Bacillus anthracisв органах
окраска метиленовым синимокраска по Граму
ПРЕПАРАТ №3 ПРЕПАРАТ №4
Francisella tularensisв органах Вrucella abortus в чистой культуре
окраска по Граму окраска по Граму
ПРЕПАРАТ №5
Край колонии
Bacillus anthracis
ЗАНЯТИЕ №10
Тема: Возбудители заболеваний, передаваемых половым путем: сифилиса, гонореи, хламидийных уретритов.
ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ЗАНЯТИЯ:
1. Знать теоретический материал по теме занятия.
2. Научиться учитывать реакцию Вассермана и ИФА для серодиагностики сифилиса.
3. Ознакомиться с морфологией изучаемых возбудителей.
4. Научиться решать ситуационные задачи по теме занятия.
ВОПРОСЫ К ЗАНЯТИЮ:
1. Спирохеты: таксономия, свойства, резистентность.
2. Возбудители венерического сифилиса, факторы патогенности, патогенез, клинические формы (стадии развития) сифилиса.
3. Материал и методы диагностики сифилиса в зависимости от стадии заболевания. Профилактика и лечение сифилиса.
4. Гонококки: таксономия, свойства, резистентность,
5. Факторы патогенности и механизмы их действия. Этиологическая роль гонококков при уретритах и бленнорее. Патогенез гонореи, иммунитет.
6. Лабораторная диагностика острой и хронической гонореи. Профилактика и лечение гонореи.
7. Хламидии: таксономия, свойства, роль в урогенитальной патологии.
8. Лабораторная диагностика, профилактика и лечение хламидийных уретритов.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Лекционный материал.
2. Учебник «Медицинская микробиология» под редакцией проф. Д.К. Новикова, проф. И.И. Генералова, 2003, стр. 170-173, 266-272, 293-300.
3. «Практикум по медицинской микробиологии» С.А.Павлович, 1993, стр. 106-107, 160-164, 170-171.
САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА:
1. Постановка ИФА для серодиагностики первичного сифилиса: определение АТ класса IgМ к специфическому трепонемному антигену.
Реагенты
1) Иммуносорбент – планшет полистироловый с адсорбированным на внутренней поверхности лунок рекомбинантным трепонемным антигеном.
2) Исследуемые сыворотки.
3) Положительный контрольный образец сыворотки (К+), содержащий антитела к трепонемным АГ.
4) Отрицательный контрольный образец сыворотки (К–), не содержащий антитела к трепонемным АГ.
5) Конъюгат – антитела против IgМ человека, меченые пероксидазой хрена.
6) Субстратный буферный раствор, содержащий пероксид водорода.
7) Раствор хромогена тетраметилбензидина (ТМБ).
8) Стоп-реагент – раствор 2M серной кислоты.
Проведение анализа
1) Внесение исследуемых и контрольных образцов.
В лунки планшета, например, А-1 и А-2, В-1 и В-2, С-1 и С-2 и т.д 1 внести по 100 мкл разведенных исследуемых сывороток в дублях. Предварительное разведение сывороток – 1/100.
Внесение контрольных образцов:
100 мкл (К–) в лунки А-11 и A-12;
100 мкл (К+) в лунки В-11 и В-12.
2) Инкубация 30 мин при 37°С в термостате.
3) По окончании инкубации содержимое лунок тщательно аспирировать в сосуд с дезинфицирующим раствором. Промыть планшет 5 раз
4) Внести во все лунки по 100 мкл рабочего раствора конъюгата. Инкубировать в течение 30 мин при температуре 37°С.
5) По окончании второй инкубации удалить содержимое лунок и промыть планшет 5 раз.
6) Внести во все лунки по 100 мкл рабочего раствора хромогена тетраметилбензидина и инкубировать в темноте в течение 30 мин при температуре 18–25°С.
7) Внести во все лунки по 100 мкл стоп-реагента.
8) Измерить оптическую плотность на многоканальном фотометре при 450 нм с фоновой длиной волны 620–650 нм.