Тема: Определение билирубина и его фракций методом Иендрашика.

Цель самоподготовки: после изучения данной темы Вы должны

Иметь практический опыт:

· определять показатели белкового обмена

Знать:

· промежуточный обмен гемоглобина; образование билирубина, билирубинглюкоронидов в печени, пигментов кала и мочи;

· значение определения билирубина и его фракций в сыворотке крови, пигментов кала и мочи в дифференциальной диагностике желтух.

Уметь:

· определять билирубин и его фракции в сыворотке крови по методу Иендрашика;

· провести калибровку для определения билирубина и его фракций.

Литература для самоподготовки:

1. М.В. Ермолаев, Л.П. Ильичева, «Биологическая химия», М., Медицина, 1989г.

2. Л.М. Пустовалова, «Основы биохимии», Ростов-на-Дону, «Феникс», 2003г.

3. Лекции по разделу 5. Проведение лабораторных биохимических исследований по определению показателей белкового обмена.

4. Информационный блок по разделу 5. Проведение лабораторных биохимических исследований по определению показателей белкового обмена.

План изучения темы:

1. Повторите теоретический материал по теме занятия по конспекту лекции и учебнику.

2. Изучите обмен билирубина.

3. Внимательно прочитайте методику определения билирубина и его фракций по методу Иендрашика, отметьте особенности методики.

4. Повторите принципы построения калибровочных графиков.

5. Приготовьте миллиметровую бумагу для построения калибровочного графика на билирубин.

6. Выполните прилагаемые задания по теме занятия.

7. Ответьте на контрольные вопросы.

Задания к занятию № 6

1. Дополните схему катаболизма гема:

Гемоглобин

О2 СО2

Вердоглобин

Биливердин

Билирубин ……………..

альбумин

кровь

Печень

Билирубин ……………..

Кишечник

Уробилиноиды

кал моча печень

……… …..…… ….…….

2. Проведите сравнительный анализ свойств непрямого и прямого билирубина:

	Непрямой билирубин	Прямой билирубин
1. Место образования
2. Токсичность
3. Отношение к солнечному свету
4. Растворимость в воде
5. Растворимость в липидах
6. Через почечный фильтр (проходит или нет)
7. Отношение к реакции с диазореактивом
8. Связывается в печени с
9. Нормальные показатели

3. Перечислите функции, выполняемые гепатоцитом по отношению к билирубину:

· ________________________________________________________

· ________________________________________________________

· ________________________________________________________

4. Ознакомьтесь с методикой определения билирубина по методу Иендрашика и выпишите особенности данной методики

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

5. Внимательно прочитайте текст. Отметьте неточности или ошибки в изложении:

Время жизни эритроцитов составляет – 110-120 дней. Состарившиеся эритроциты распадаются, преимущественно в кровеносном русле. Освобождающийся из гемоглобина гем повторно не используется: он распадается с образованием железа и желчных пигментов. Железо и желчные пигменты выводятся из организма.

Образовавшийся билирубин хорошо растворим в воде, малотоксичен, называется непрямым билирубином, так как он взаимодействует с диазореактивом после обработки кофеином. Непрямой билирубин доставляется в печень при помощи белка гаптоглобина. В печени непрямой билирубин (связанный) отделяется от белка и поступает в гепатоцит. Гепатоцит по отношению к билирубину выполняет следующие функции:

1. функция захвата;

2. функция коньюгации: непрямой билирубин подвергается реакции коньюгации с глюкуроновой кислотой, образуется прямой или свободный билирубин (преимущественно моноглюкоронид билирубина).

3. Функция экскреции – по градиенту концентрации поступает в желчные капилляры.

Прямой билирубин плохо растворим в воде, не проходит через почечный фильтр, чувствителен к свету, токсичен и дает прямую реакцию с диазореактивом.

6. Где образуется непрямой билирубин?

______________________________________________________

7. В какой форме происходит транспорт билирубина по крови и почему?

____________________________________________________________________________________________________________

8. Где образуется прямой билирубин?

______________________________________________________

9. Как называются производные пигмента билирубина

в моче ________________________________________________

в кале _________________________________________________

Контрольные вопросы к занятию № 6

1. Дайте определение белков.

2. Биологическое значение белков.

3. Норма белка в питании, от чего она зависит, «физиологический минимум» белка.

4. Назовите виды азотистого баланса, приведите примеры.

5. Белковые резервы.

6. Переваривание белков в желудочно-кишечном тракте.

7. Гниение белков в кишечнике.

8. Пути использования аминокислот в организме.

9. Этапы биосинтеза белка.

10. Деградация аминокислот: дезаминирование, переаминирование, непрямое дезаминирование, декарбоксилирование.

11. Конечные продукты распада аминокислот. Пути обезвреживания аммиака.

12. Синтез мочевины.

13. Физиологическое значение белков крови.

14. Общий белок сыворотки крови. Нормальные показатели, клиникодиагностическое значение гипо- и гиперпротеинемий.

15. Понятие о диспротеинемии, парапротеинемии, дефектопротеинемии.

16. Белковые фракции. Отдельные представители и их клиническое значение.

17. Изменение белковых фракций при различных видах патологии:

· остром воспалении

· хроническом воспалении

· заболеваниях печени

· заболеваниях почек

· миеломной болезни

· иммунодефиците

18. Желчные пигменты. Обмен билирубина.

19. Определение билирубина и его фракций по методу Иендрашика: принцип метода, расчет, нормальные показатели.

Занятие № 7.

Тема: Коллоидные пробы печени.

Цель самоподготовки: после изучения данной темы Вы должны

Иметь практический опыт:

· определять показатели белкового обмена

Знать:

· обмен билирубина;

· этиопатогенез и лабораторную диагностику основных типов желтух;

· дифференциальную диагностику основных типов желтух.

Уметь:

· поставить тимоловую пробу;

· провести пробу Вельтмана.

Литература для самоподготовки:

1. М.В. Ермолаев, Л.П. Ильичева, «Биологическая химия», М., Медицина, 1989г.

2. Л.М. Пустовалова, «Основы биохимии», Ростов-на-Дону, «Феникс», 2003г.

3. Лекции по разделу 5. Проведение лабораторных биохимических исследований по определению показателей белкового обмена.

4. Информационный блок по разделу 5. Проведение лабораторных биохимических исследований по определению показателей белкового обмена.

План изучения темы:

1. Повторите теоретический материал по теме занятия по конспекту лекций и учебнику.

2. Изучите методику проведения тимоловой пробы и пробы Вельтмана.

3. Изучите клинико-диагностическое значение коллоидных проб печени.

4. Выполните прилагаемые задания по данной теме.

5. Ответьте на контрольные вопросы.

Задания к занятию № 7

1. Напишите определение желтухи. Всегда ли желтушная окраска связана с гипербилирубинемией?

______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

2. Проведите сравнительный анализ различных видов желтух:

	Вид желтухи	Синоним	Наиболее частая причина	Изменение билирубина
непрямого	прямого
1.	Надпеченочная
2.	Печеночная
3.	Подпеченочная

3. У новорожденного содержание общего билирубина в крови повышено за счет непрямого билирубина, кал интенсивно окрашен. В моче не обнаруживаются желчные пигменты:

· О какой желтухе в данном случае идет речь?

__________________________________________________________

· Какой механизм развития желтухи в данном случае?

__________________________________________________________

· Какое патогенетическое лечение может быть рекомендовано в данном случае?

__________________________________________________________

4. Продолжите начатые фразы:

· Общий билирубин – это …………………………………..................

· …………………………………………………………………………;

……………………………… в составе желчи секретируется в кишечник.

· …………………….. в норме в небольшом количестве содержится в моче, но качественными реакциями не обнаруживается;

· При механической желтухе происходит повышение общего билирубина за счет …………………………………………………..;

· Основным патогенетическим фактором в развитии гемолитической желтухи является …………………………………..

…………………………………………………………………………;

· Наиболее частой причиной развития печеночной желтухи является ……………………………………………………………….;

· Развитие желтушности кожных покровов появляется у больного при содержании общего билирубина более ………………………...

5. Почему при определении билирубина по методу Иендрашика в пробу с общим билирубином добавляют помимо диазосмеси кофеиновый реактив?

________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

6. Расставьте желчные пигменты в порядке их образования:

1) уробилиноиды;

2) прямой билирубин;

3) биливердин;

4) непрямой билирубин;

5) уробилин;

6) стеркобилин.

7. При гемолитической желтухе наблюдается гипербилирубинемия за счет ……………………………… билирубина.

8. При гемолитической желтухе наблюдается появление темной мочи. С чем связано изменение окраски мочи и почему оно происходит?

________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

9. Назовите стадии типичного течения вирусного гепатита:

· ________________________________________________________

· ________________________________________________________

· ________________________________________________________

· ________________________________________________________

10. В какой стадии болезни (вирусный гепатит) происходит повышение билирубина, за счет какой фракции; механизм гипербилирубинемии.

________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

11. Какова динамика изменения уробилина в моче в различные стадии вирусного гепатита?

________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

12. Как меняется активность аминотрансфераз в различные стадии вирусного гепатита?

________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

13. В моче у больного положительная реакция на желчные пигменты. С чем это связано?

________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

14. Почему при механической желтухе может быть отрицательная реакция на стеркобилин в кале? Будет ли обнаруживаться в этом случае уробилин в моче?

________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

15. Назовите основные биохимические синдромы, выделяемые при заболеваниях печени:

· ________________________________________________________

· ________________________________________________________

· ________________________________________________________

· ________________________________________________________

16. Какие биохимические показатели могут свидетельствовать о синдроме холестаза?

________________________________________________________________________________________________________________У больного при вирусном гепатите В произошло снижение содержания холестерина. Объясните, с чем может быть связано данное изменение. Оцените прогноз для данного больного.

________________________________________________________________________________________________________________

Контрольные вопросы к занятию № 7

1. Остаточный азот: определение понятия, компоненты остаточного азота, нормальные показатели, резидуальный азот.

2. Азотемия: определение понятия, виды азотемии.

3. Мочевина: роль в метаболизме, нормальные показатели, клинико-диагностическое значение.

4. Креатин и креатинин: роль в метаболизме, нормальные показатели, клинико-диагностическое значение.

5. Индикан: роль в метаболизме, клинико-диагностическое значение.

6. Мочевая кислота: роль в метаболизме, нормальные показатели, клинико-диагностическое значение.

7. Роль печени в белковом обмене.

8. Наследственные нарушения обмена отдельных аминокислот.

9. Аминоацидурии.

10. Нарушение обмена желчных пигментов. Желтухи: определение понятия, виды желтух.

11. Гемолитическая желтуха: этиология, патогенез, лабораторная диагностика.

12. Паренхиматозные желтухи:

§ виды паренхиматозных желтух

§ этиопатогенез и лабораторная диагностика вирусного гепатита

§ холестатическая желтуха

§ энзимопатическая желтуха

13. Механическая желтуха: этиология, патогенез, лабораторная диагностика.

14. Коллоидные пробы печени: цель проведения, сущность проб.

15. Особенности проведения методики определения билирубина и его фракций по методу Иендрашика.

Занятие № 8.