Лабораторная диагностика бруцеллеза и туляремии и роль медицинского лабораторного техника

Специальность 31.02.03. Лабораторная диагностика

Квалификация: Медицинский лабораторный техник

Студент: Осиюк Александр Вячеславович

Дипломный руководитель:

Позднякова Ирина Геннадьевна

Саратов

Содержание

Введение.................................................................................................................. 4

Глава 1. Характнристика бруцеллеза и туляремии как антропозоонозных инфекционных заболеваний. 8

1.1. Биология возбудителя бруцеллеза. 8

1.2. Биологические особенности возбудителя туляремии. 11

1.3. Эпидемиологические особенности бруцеллеза и туляремии. 15

1.4. Патогенез и клинические симптомы инфекций. 17

1.5. Меры профилактики и лечения зоонозов. 23

Глава 2. Лабораторная диагностика бруцеллеза. 29

2.1. Характеристика базы выполнения дипломной работы и ознакомление с нормативной документацией..........................................................................29

2.2. Методы выделения возбудителя заболевания и его растворимых антигенов 31

2.2.1. Бактериологический метод. 31

2.2.2. Биологический метод. 34

2.2.3. Методы дифференциации бруцелл. 35

2.3. Иммунологические и молекулярно-биологические тесты выявления бруцелл и их растворимых антигенов. 39

2.3.1. Реакция иммунофлюоресценции. 39

2.3.2. Реакция нейтрализации антител. 42

2.3.3. Иммуноферментный анализ. 44

2.3.4. Полимеразная цепная реакция. 46

2.4. Методы выявления специфических антител. 47

2.4.1. Пластинчатая реакция агглютинации (реакция Хеддлсона) 48

2.4.2.Реакция агглютинации в пробирках (реакция Райта)............................. 49

2.4.3. Антиглобулиновая проба (реакция Кумбса) 51

2.4.4. Реакция пассивной гемагглютинации. 54

2.4.5. Иммуноферментный анализ. 57

2.4.6. Непрямой иммунофлюоресцентный метод. 58

2.5. Тесты, выявляющие повышенную сенсибилизацию организма к бруцеллезному антигену. 60

2.5.1. Кожно-аллергическая проба Бюрне. 60

2.5.2. Реакция лизиса лейкоцитов. 61

ГЛАВА 3. Лабораторная диагностика туляремии. 63

3.1. Методы выделения возбудителя заболевания и его растворимых антигенов 63

3.1.1. Бактериоскопический метод. 63

3.1.2. Культуральный метод. 64

3.1.3. Биологические методы исследования. 65

3.1.4. Идентификация возбудителя туляремии. 66

3.2. Выявление антигенов возбудителя туляремии серологическими методами ................................................................................................................................ 69

3.2.1. Реакция иммунофлюоресценции. 70

3.2.2. Реакция пассивной гемагглютинации. 72

3.2.3. Реакция торможения гемагглютинации. 75

3.2.4. Реакция нейтрализации антител. 76

3.2.5. Реакция агглютинации. 78

3.2.6. Реакция нейтрализации антигена. 81

3.2.7. Иммуноферментный анализ на твердофазном носителе. 84

3.3. Молекулярно-биологические методы.. 86

3.4. Аллергические методы диагностики туляремии. 87

3.4.1. Внутрикожная проба с тулярином. 87

3.4.2. Накожная проба с тулярином. 88

3.4.3. Реакция лизиса лейкоцитов. 90

Заключение. 92

Список использованной литературы.. 94

Приложение. 97

Введение

Бруцеллез и туляремия - это антропозоонозные инфекционно-аллергические заболевания, вызываемые бактериями р.Brucellaи р. Francisella, характеризующиеся общей интоксикацией и поражением многих систем органов. Бруцеллез и туляремия представляют собой мировую проблему для здравоохранения, животноводства и экономики. Их значение для общественного здравоохранения объясняется прямой или косвенной передачей инфекции от зараженных животных человеку, что приводит к заболеванию, инвалидности и потери трудоспособности. Это социально значимые инфекции, приносящие значительный экономический ущерб и обусловливающие высокий уровень инвалидизации больных. [1]

В 90-е годы прошлого столетия резко обострилась эпизоотическая и эпидемическая ситуация по бруцеллезу в странах СНГ и России в результате социально - экономических преобразований, в частности, интенсивного процесса приватизации в сельском хозяйстве. В немалой степени этому способствовали экономические трудности, ослабление санитарно-ветеринарного надзора за животными индивидуальных хозяйств, миграция населения, недостаточный ветеринарно-санитарный контроль за ввозом животных из стран неблагополучных по бруцеллезу. Тогда в РФ регистрировалось около 500 первичных заболеваний людей бруцеллезом. [1]

За последние же 10 лет в РФ показатель заболеваемости бруцеллезом снизился на 17,8%. [2] В 2016 г. на территории РФ зарегистрировано 334 первичных случая заражения людей бруцеллезом от КРС, из которых 22 – в ПФО. На территории Саратовской области было выявлено 4 случая инфицирования людей (0,16 на 100 тыс. населения).[18] Несмотря на общую положительную тенденцию по снижению количества случаев заболевания среди жителей РФ в последние годы, экономический ущерб государству, причиненный бруцеллезом в 2016 г., составил 109753,3 тыс. руб.

Кроме того, на фоне снижения количества впервые выявленного бруцеллеза у людей отмечается ухудшение эпизоотологической ситуации по бруцеллезу КРС на территории РФ, особенно в регионах с развитым животноводством, поэтому и эпидемиологическая обстановка по данному заболеванию на 2017 г. характеризуется как неустойчивая. С учетом этого фактора в 2017 г. в стране прогнозируемый уровень заболеваемости людей бруцеллезом может оказаться в диапазоне 340-370 случаев. [1]

Что касается туляремии, то из данных, опубликованных Росспотреб- надзором, известно, что за последние 10 лет в РФ произошло снижение заболеваемости туляремией на 38,5%.[1] Уровень инфицирования туляремии населения страны не превышает отметки 0,08-0,09 (на 100 тыс. населения), лишь в 2013 г. Отмечался резкий скачок заболеваемости в 10 раз.

Несмотря на положительные тенденции, в настоящее время активные природные очаги сохраняются в 56 регионах РФ. Случай инфицирования возбудителем туляремии ежегодно отмечаются в Республике Карелия, НАО, Омской и Рязанской областях. В Саратовской области в последние годы даже единичных случаев инфекции зарегистрировано не было. [2]

В связи с актуальностью темы, особенно важным, для выявления природных очагов туляремии, возникновения эпизоотий бруцеллеза среди животных, предотвращения возможности инфицирования населения возбудителями этих заболеваний и предупреждения развития осложнений в результате развития инфекций, прогнозирования эпидемических вспышек, является своевременное и грамотное проведение лабораторных исследований с использованием современных и адекватных диагностических методов.

Цель дипломной работы - рассмотреть методики лабораторной диагностики бруцеллеза и туляремии и определить роль лабораторного техника.

Для достижения цели в работе были поставлены следующие задачи:

1. проанализировать материал научно-практической, медицинской литературы по теме диплома;

2. Изучить морфологические и биологические характеристики возбудителей бруцеллеза и туляремии;

3. Рассмотреть и сравнить различные методы лабораторной диагностики бруцеллеза и туляремии по информативности и эффективности.

Для решения поставленных задач использовались следующие методы:

- литературный анализ научно - практической, методической литературы,

- сбор статистических данных,

- логический метод

Научная новизна:

Установлены новые данные по распространенности и структуре заболеваемости бруцеллезом и туляремии, как в стране, так и на территории Саратовской области.

Практическая значимость: полученные данные в ходе работы, могут быть использованы в профессиональной деятельности медицинского лабораторного техника для формирования профессиональных компетенций, а также при работе в бактериологической лаборатории. Дипломная работа может быть использована как источник информации для обучающихся в медицинских колледжах по специальности «Лабораторная диагностика».

Объект исследования – биологический материал.

Предмет исследования – выявление возбудителей бруцеллеза и туляремии в биологическом материале.