Тема: Возбудители бактериальных зоонозных инфекций: чумы, туляремии, сибирской язвы, бруцеллеза, лептоспироза
ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ЗАНЯТИЯ:
1. Знать теоретический материал по теме занятия.
2. Научиться в готовых мазках распознавать возбудителей чумы, сибирской язвы, туляремии, бруцеллеза, лептоспироза.
3. Уметь ставить и учитывать результаты реакции Райта для серодиагностики бруцеллеза.
4. Изучить характер колоний антракоида на МПА в инвертированном микроскопе.
5. Изучить биопрепараты по теме занятия.
ВОПРОСЫ К ЗАНЯТИЮ:
1. Возбудитель сибирской язвы: таксономия, свойства, резистентность.
2. Факторы патогенности, механизмы их действия, патогенез и клинические формы сибирской язвы.
3. Лабораторная диагностика, профилактика и лечение сибирской язвы.
4. Возбудители чумы: таксономия, свойства, резистентность.
5. Факторы патогенности, механизмы их действия, патогенез и клинические формы чумы.
6. Лабораторная диагностика, особенности работы с материалом от больного, профилактика и лечение чумы.
7. Возбудители туляремии: таксономия, свойства, резистентность.
8. Факторы патогенности, механизмы их действия, патогенез и клинические формы туляремии.
9. Лабораторная диагностика, профилактика и лечение туляремии.
10. Возбудители бруцеллеза, таксономия, свойства, резистентность.
11. Факторы патогенности, механизмы их действия, патогенез бруцеллеза.
12. Лабораторная диагностика, профилактика и лечение бруцеллеза.
13. Лептоспиры: таксономия, свойства, резистентность.
14. Факторы патогенности, патогенез лептоспироза.
15. Лабораторная диагностика, профилактика и лечение лептоспироза.
16. Биопрепараты: единый бруцеллезный диагностикум, агглютинирующая бруцеллезная сыворотка, лечебная бруцеллезная вакцина, живая бруцеллезная вакцина, бруцеллин, туляремийный диагностикум, агглютинирующая туляремийная сыворотка, живая туляремийная вакцина, тулярин, живая сибиреязвенная вакцина, сибиреязвенный иммуноглобулин, противочумная вакцина.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Лекционный материал.
2. Учебник «Медицинская микробиология» под редакцией проф. Д.К. Новикова, проф. И.И. Генералова, 2003, стр. 219-223, 231-236, 245-248, 276-279.
3. «Практикум по медицинской микробиологии» С.А.Павлович, 1993, стр. 125-127, 132-138, 140-143, 164-166.
САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА:
1. Постановка и учет развернутой реакции агглютинации Райта.
| Ингредиенты | Разведения сыворотки больного | |||||
| 1:100 | 1:200 | 1:400 | 1:800 | 1:1600 | К | |
| Физ. раствор | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 |
| Сыворотка больного 1:50 |  1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | - |
| Диагностикум единый бруцеллезный | По 3 капли во все пробирки | |||||
| Результат | ||||||
| Заключение: |
2. Микроскопия демонстрационных препаратов:
ПРЕПАРАТ №1 ПРЕПАРАТ №2
Yersinia pestis в органах Bacillus anthracisв органах
окраска метиленовым синимокраска по Граму
ПРЕПАРАТ №3 ПРЕПАРАТ №4
Francisella tularensisв органах Вrucella abortus в чистой культуре
окраска по Граму окраска по Граму
ПРЕПАРАТ №5
Край колонии
Bacillus anthracoides
ЗАНЯТИЕ №10
Тема: Возбудители заболеваний, передаваемых половым путем: сифилиса, гонореи, хламидийных уретритов
ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ЗАНЯТИЯ:
1. Знать теоретический материал по теме занятия.
2. Научиться учитывать реакцию Вассермана и ИФА для серодиагностики сифилиса.
3. Ознакомиться с морфологией изучаемых возбудителей.
4. Научиться оценивать результаты ПЦР для диагностики хламидийной инфекции.
ВОПРОСЫ К ЗАНЯТИЮ:
1. Спирохеты: таксономия, свойства, резистентность.
2. Возбудители венерического сифилиса, факторы патогенности, патогенез, клинические формы (стадии развития) сифилиса.
3. Материал и методы диагностики сифилиса в зависимости от стадии заболевания. Профилактика и лечение сифилиса.
4. Гонококки: таксономия, свойства, резистентность,
5. Факторы патогенности и механизмы их действия. Этиологическая роль гонококков при уретритах и бленнорее. Патогенез гонореи, иммунитет.
6. Лабораторная диагностика острой и хронической гонореи. Профилактика и лечение гонореи.
7. Хламидии: таксономия, свойства, роль в урогенитальной патологии.
8. Лабораторная диагностика, профилактика и лечение хламидийных уретритов.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Лекционный материал.
2. Учебник «Медицинская микробиология» под редакцией проф. Д.К. Новикова, проф. И.И. Генералова, 2003, стр. 170-173, 266-272, 293-300.
3. «Практикум по медицинской микробиологии» С.А.Павлович, 1993, стр. 106-107, 160-164, 170-171.
САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА:
1. Постановка ИФА для серодиагностики первичного сифилиса: определение АТ класса IgМ к специфическому трепонемному антигену.
Реагенты
1) Иммуносорбент – планшет полистироловый с адсорбированным на внутренней поверхности лунок рекомбинантным трепонемным антигеном.
2) Исследуемые сыворотки.
3) Положительный контрольный образец сыворотки (К+), содержащий антитела к трепонемным АГ.
4) Отрицательный контрольный образец сыворотки (К–), не содержащий антитела к трепонемным АГ.
5) Конъюгат – антитела против IgМ человека, меченые пероксидазой хрена.
6) Субстратный буферный раствор, содержащий пероксид водорода.
7) Раствор хромогена тетраметилбензидина (ТМБ).
8) Стоп-реагент – раствор 2M серной кислоты.
Таблица. Результаты серологической диагностики первичного сифилиса методом ИФА.
| A | K1(+) | K2(+) | ||||||||||
| B | K1(-) | K2(-) | ||||||||||
| C | ||||||||||||
| D | ||||||||||||
| Заключение |
2. Демонстрация реакции Вассермана.
3. Микроскопия и зарисовка демонстрационных препаратов:
ПРЕПАРАТ №1 ПРЕПАРАТ №2
Treponema pallidum Chlamydia trachomatis
окраска по Романовскому-Гимзеокраска по Романовскому-Гимзе
ПРЕПАРАТ №3
Neisseria gonorrhoeae в гное_
окраска метиленовым синим
4. Оценка результатов ПЦР для диагностики хламидийной инфекции.
ЗАНЯТИЕ №11
Тема: Общая вирусология. Методы диагностики вирусных инфекций
ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ЗАНЯТИЯ:
1. Знать теоретический материал по теме занятия.
2. Освоить методы индикации вирусов в курином эмбрионе.
3. Уметь ставить и учитывать результаты РГА для индикации и титрования вируса.
4. Научиться осуществлять индикацию вирусов в культуре клеток по реакции гемадсорбции, цветной пробе, симпластообразованию.
ВОПРОСЫ К ЗАНЯТИЮ:
1. Современные принципы классификации и таксономии вирусов.
2. Структура, свойства и особенности вирусов. Понятие о вирионе, вироиде.
3. Химический состав вирусов, значение различных химических компонентов. Ферменты вирусов.
4. Репродукция вирусов. Особенности репродукции РНК- и ДНК-содержащих вирусов.
5. Методы культивирования, индикация и идентификация вирусов.
6. Методы лабораторной диагностики вирусных инфекций.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Лекционный материал.
2. Учебник «Медицинская микробиология» под редакцией проф. Д.К. Новикова, проф. И.И. Генералова, 2003, стр. 50-67.
3. «Практикум по медицинской микробиологии» С.А.Павлович, 1993, стр. 29-41.
САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА:
1. Заражение куриных эмбрионов на хорионаллантоисную оболочку, в аллантоисную и амниотическую полости.
2. Постановка реакции гемагглютинации для индикации и титрования вируса.
| Ингредиенты разведения | 1:10 | 1:20 | 1:40 | 1:80 | 1:160 | К |
| Физ.раствор | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 |
| Аллантоисная жидкость 1:5 |  0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | - |
| Взвесь эритроцитов | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 |
| Результат | ||||||
| Заключение |
3. Микроскопия демонстрационных препаратов:
ПРЕПАРАТ №1 ПРЕПАРАТ №2
Симпластообразование в культуре клетокРеакция гемадсорбции в культуре клеток
ЗАНЯТИЕ №12
Тема: Вирусные инфекции, вызываемые ортомиксовирусами, парамиксовирусами
ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ЗАНЯТИЯ:
1. Знать теоретический материал по теме занятия.
2. Ознакомиться с методами диагностики гриппа, парагриппа, паротита, кори, аденовирусной инфекции с использованием демонстрационных реакций и микропрепаратов.
3. Знать вирусные биопрепараты для диагностики, специфической профилактики и лечения вирусных инфекций по теме занятия.
4. Научиться ставить РТГА для идентификации вируса гриппа.
ВОПРОСЫ К ЗАНЯТИЮ:
1. Ортомиксовирусы. Классификация и характеристика семейства. Вирусы гриппа А, В, С. Структура вириона.
2. Антигенная структура, серотипы, антигенная изменчивость (дрейф и шифт). Особенности различных серотипов вируса гриппа (H1N1, H5N1) и др.
3. Патогенез гриппа. Иммунитет.
4. Лабораторная диагностика, лечение и профилактика гриппа.
5. Парамиксовирусы. Классификация и характеристика семейства. Структура вириона.
6. Вирусы парагриппа, свойства, роль в патологии человека. Патогенез, иммунитет, лабораторная диагностика, профилактика, лечение.
7. Вирус эпидемического паротита, свойства, патогенез, иммунитет, лабораторная диагностика, профилактика, лечение паротита.
8. Пневмовирусы (РСВ): свойства, роль в патологии, лабораторная диагностика РСВ-инфекций.
9. Морбиливирусы: вирус кори, свойства, патогенез, лабораторная диагностика, профилактика, лечение кори.
10. Биопрепараты: живая гриппозная вакцина, диагностические противогриппозные сыворотки А(H3N2) и А(H2N2), гриппозные диагностикумы А(H3N2) и A(H2N2), иммуноглобулин против кори, живая вакцина КПК.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Лекционный материал.
2. Учебник «Медицинская микробиология» под редакцией проф. Д.К. Новикова, проф. И.И. Генералова, 2003, стр. 300-309.
3. «Практикум по медицинской микробиологии» С.А.Павлович, 1993, стр. 29-41.
САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА:
1. Постановка РТГА для идентификации вируса в аллантоисной жидкости.
| Ингредиенты разведения | 1:10 | 1:20 | 1:40 | 1:80 | 1:160 | 1:320 | К |
| Физ. раствор | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 |
| Противогриппозная сыворотка А(Н3N2) 1:5 |  0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | - |
| Противогриппозная сыворотка А(H2N2) 1:5 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | - |
| Аллантоисная жидкость 4ГАЕ | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 |
| Взвесь эритроцитов | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 |
| Термостат 37оС на 2 часа | |||||||
| Результат А(Н2N2) | |||||||
| Результат А(Н3N2) | |||||||
| Заключение: |
ЗАНЯТИЕ №13
Тема: Вирусные инфекции, вызываемые пикорнавирусами, аденовирусами, ротавирусами
ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ЗАНЯТИЯ:
1. Знать теоретический материал по теме занятия.
2. Ознакомиться с методами диагностики полиомиелита, Коксаки, ЕСНО, ротавирусов, аденовирусов с использованием демонстрационных реакций и микропрепаратов.
3. Изучить биопрепараты по теме занятия.
ВОПРОСЫ К ЗАНЯТИЮ:
1. Пикорнавирусы: классификация и общая характеристика семейства, роль в патологии человека.
2. Вирусы полиомиелита: свойства, патогенез, иммунитет.
3. Лабораторная диагностика, профилактика, лечение полиомиелита.
4. Вирусы Коксаки и ЕСНО, свойства, роль в патологии человека, лабораторная диагностика, профилактика, лечение.
5. Ротавирусы: структура и свойства, патогенез, иммунитет. Лабораторная диагностика ротавирусного гастроэнтерита.
6. Аденовирусы: классификация и характеристика семейства. Аденовирусы человека, структура вириона, патогенез, иммунитет, диагностика аденовирусных инфекций.
7. Биопрепараты: живая вакцина против полиомиелита, типоспецифические полиомиелитные сыворотки, моновалентные сыворотки Коксаки и Есно.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Лекционный материал.
2. Учебник «Медицинская микробиология» под редакцией проф. Д.К. Новикова, проф. И.И. Генералова, 2003, стр. 310-317, 318-319, 336-338.
3. «Практикум по медицинской микробиологии» С.А.Павлович, 1993, стр. 29-41.
САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА:
1. Постановка ИФА для определения антигенов ротавирусов.
Реагенты
1) Иммуносорбент – планшет полистироловый с адсорбированными на внутренней поверхности лунок антителами к ротавирусным антигенам.
2) Исследуемый материал (копрофильтрат).
3) Положительный контрольный образец (К+), содержащий ротавирусные антигены, инактивированный.
4) Отрицательный контрольный образец (К–), не содержащий специфические антигены.
5) Кроличьи поликлональные антитела к ротавирусным антигенам.
6) Конъюгат – антитела против глобулинов кролика, меченые пероксидазой хрена.
7) Субстратный буферный раствор, содержащий пероксид водорода.
8) Раствор хромогена тетраметилбензидина (ТМБ).
9) Стоп-реагент – раствор 2M серной кислоты.
Таблица. Результаты иммуноферментного анализа определения ротавирусных АГ в копрофильтрате.
| A | K1(+) | K2(+) | ||||||||||
| B | K1(-) | K2(-) | ||||||||||
| C | ||||||||||||
| D | ||||||||||||
| Заключение |
2. Индикация и идентификация вируса полиомиелита по цветной реакции и по нейтрализации цветной реакции (демонстрация).
3. Зарисовка препарата с внутриядерными включениями в культуре клеток
ПРЕПАРАТ №1
Внутриядерные включения
при аденовирусной инфекции
ЗАНЯТИЕ №14