Объем и структура диссертации
Диссертация изложена на 348 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, шести глав собственных наблюдений, заключения, выводов, практических рекомендаций, списка литературы, трех приложений.
Текстовая часть работы иллюстрирована 156 рисунками и 25 таблицами. Список литературы содержит 480 источников. Из них 341 отечественных и 139 зарубежных авторов.
СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Для реализации, поставленной в работе цели, нами были проведены экспериментальные и клинические исследования.
Клиническая часть выполнена на базе ММУ «Стоматологическая поликлиника № 2» Промышленного района г.о. Самара (главный врач д.м.н., профессор Болонкин В.П.).
Микробиологические и иммунологические исследования - на кафедре общей и клинической микробиологии, иммунологии и аллергологии ГБОУ ВПО СамГМУ Минздравсоцразвития России (зав. кафедрой - д.м.н., профессор Жестков А.В.), а также отделе иммунологии Института экспериментальной медицины и биотехнологий (директор - д.м.н., профессор Волова Л.Т., зав. отделом - д.б.н., доцент Лимарева Л.В.). Патоморфологические исследования проведены на кафедре общей и клинической патологии: патологической анатомии, патологической физиологии ГБОУ ВПО СамГМУ Минздравсоцразвития России (зав. кафедрой – д.м.н., профессор Федорина Т.А.)
Разработкой программы «Иммунолог» занимался ведущий инженер ЗАО «Медицина и новые технологии» М.Ю. Доладов. Математический анализ моделей челюстей выполнен на кафедре автоматических систем энергетических установок Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Самарский государственный аэрокосмический университет имени академика С.П. Королева (национальный исследовательский университет)» А.В. Ревякиным. Обработка клинических и экспериментальных результатов проведена на кафедре радиотехники и медицинских диагностических систем ГБОУ ВПО СГАУ– биостатистик - к.б.н., доцент М.В. Комарова.
Экспериментальное исследование
Для проведения исследований использовали тест-культуры: Staphylococcus aureus P-209, Escherichia coli, Candida albicans. Посев бактерий осуществляли методом газона на 5% кровяной агар, грибов рода Candida – на среду Сабуро, затем на поверхность посева помещали испытуемые образцы. Исследовали антисептические препараты: р-р хлоргексидина биглюконата 0,06% (ЗАО «Центральная-Европейская Фармацефтическая компания» г.Москва, Р.84.329.7), мирамистин 0,01% р-р для местного применения (ЗАО «ИНФАМЕД» Московская обл. г.Видное, Р.№001926/01-2002, Св-во № 157563), р-р сангвиритрина 0,2% (ЗАО «Фармцентр ВИЛАР» г.Москва, Р.82.374.8), метрогил (5% изотонический р-р метронидазола для внутривенных вливаний) («Юник Фармасьютикал Лабораториз» Индия, г.Анкешвар, G/210A, Russia/PRO-99-6), гексорал 0,1% р-р для наружного применения («Gdecke» Германия, №01077, 04.05.84)
Чашки Петри с образцами инкубировали в термостате при 37°С в течение суток, после чего измеряли зоны задержки роста культуры микроорганизмов вокруг испытуемого материала. Для выявления анаэробной флоры использовали анаэростат.
Методика ультразвукового воздействия на антисептические препараты, костный имплантат, корни зубов. Пропитанные антисептическими препаратами до воздействия и после 2-х и 5-ти озвучивания низкочастотным ультразвуком (Пьезон-Мастер 400, 32кГц) диски высушивали и помещали на посевы тест-культур. Проведено 340 исследований.
С целью определения возможности насыщения антисептическими препаратами твердых тканей зубов готовили поперечные срезы корней удаленных зубов толщиной 1 – 1,5 мм. Срезы делили на равные по количеству и объему порции вначале по числу исследуемых препаратов. Затем каждую порцию на три равных образца. Срезы в первом образце оставляли на 2-3 (продолжительность ротовой ванночки), во втором озвучивали низкочастотным ультразвуком (Пьезон-Мастер 400, 32 кГц) на протяжении 2-х, а в третьем образце воздействие длилось 5. После этого все срезы согласно качеству воздействия помещались в физиологический раствор, в котором они хранились на протяжении эксперимента. Далее, согласно плану эксперимента, срезы помещали на посевы тест-культур. Проведено 540 исследований.
Для определения глубины проникновения антисептического препарата в ткани зуба готовили гистологические препараты. Корни удаленных зубов на протяжении недели выдерживали в 96о спирте для фиксации. После фиксации промывали их большим количеством проточной воды. Для облегчения проникновения частиц коллоидного серебра в дентинные канальцы, корни удаленных зубов погружали в раствор концентрированной азотной кислоты до размягчения и вновь отмывали большим количеством проточной воды. Подготовленный материал делили на две части. Обе части погружали в антисептический препарат с растворенным в нем коллоидным серебром (протаргол). Затем на материал первой группы в течение 2' воздействовали низкочастотным ультразвуком с помощью аппарата Пьезон-Мастер 400. Материал второй группы не подвергался никакому воздействию (имитация ротовых ванночек). Обработанные корни зубов обеих частей фиксировали в 96о спирте. После этого материал подвергался уплотнению с помощью заливки в жидкий парафин и нарезался микротомом – срезы толщиной 3-5 микрон. Одну часть срезов оставляли неокрашенными (нативные), другую окрашивали раствором гематоксилина-эозина. Во избежание помутнения срезы обезвоживали в спиртах и просветляли в ксилоле. На предметное стекло со срезом помещали каплю бальзама и закрывали срез покровным стеклом. Препараты изучали светооптически с помощью светового микроскопа Nikon ALPHAPHOT-2 YS2-H (Japan), телеметрически при помощи цифровой видеокамеры CCD KOCOM KCC-31OPD, совместимой с персональным компьютером при увеличении x300 и x600. Анализ изображений проводили с помощью компьютерной программы «Video-Test» в операционной среде Wind’98, «Видеотест-Морфо 3.0» (г. Санкт Петербург, Иста-ВидеоТест). Изучено 50 гистологических препаратов.
Для установления вероятности использования костного имплантата, как депо антисептика, кусочки аллогенной лиофилизированной губчатой костной ткани 5х5мм («Лиопласт–С»® Р.№ФС 01032004/1567-05 от 29.04.2005г) погружали в антисептический раствор и воздействовали на них низкочастотным ультразвуком с помощью аппарата Пьезон-Мастер 400 в течение 2'. После чего образцы извлекали из препарата и высушивали. Готовые образцы помещали на посевы тест-культур, придерживаясь графика. Проведено 180 исследований
Методика ультразвукового воздействия на материал зубонадесневой шины. Образцы материала шины размером 5х4х2мм делили на три равных части, помещали в ультразвуковую ванночку (Ultrasonic Cleaner SW 1500), заливали раствором антисептика и озвучивали ультразвуком низкой частоты на протяжении 2-х, 5-ти и 10-ти соответственно. Затем вынимали их из антисептического раствора и помещали в физиологический раствор с целью приближения к условиям полости рта. Образцы помещали на поверхность посевов согласно графику. Проведено 360 исследований.
Для получения тромбоцитов с высоким содержанием фибрина (F.R.P.) использовалась безвибрационная центрифуга ЕВА 20 и специальные стерильные пробирки F.R.P. объемом 9мл без добавления каких-либо химических веществ (ООО ТЦ «МОНБЛАН», г. Москва).
На основе F.R.P. нами была разработана имплантационная (трансплантационная) смесь. (Патент РФ на изобретение № 2297250 от 20.04.2007 г.), (Патент РФ на изобретение № 2301684 от 27.06.2007г.). Разработанная нами имплантационная (трансплантационная) смесь создает оптимальные условия для репаративного остеогенеза и не вызывает иммуногенных реакций, приводящих к отторжению имплантата. Базируясь на полученных результатах, нами был разработан способ дентальной имплантации (Патент РФ на изобретение № 2269969 от 20.02.2006 г.).
Математическое моделирование методом конечно-элементного анализа пародонтита и различных вариантов шинирования зубов
Определение напряженно-деформированного состояния нижней челюсти проводили с использованием программного комплекса ANSYS (ANSYS, Inc), который в течение четверти века входит в группу мировых лидеров в этой области (NASTRAN, ADAMS, LS-DYNA) и широко используется для расчетов НДС различных, сложных конструкций. Математической основой, на которой построен вычислительный аппарат этого программного продукта, является метод конечных элементов (МКЭ) (Зинкевич О., 1975).
Постановка задачи. Были изготовлены твердотельные математические модели нижней челюсти при различном состоянии пародонта при интактных зубных рядах:
интактной нижней челюсти человека с сохранением особенностей ее анатомо-топографического строения;
нижней челюсти по п.1 при пародонтите, с атрофией костной ткани на 2/3 длины корней фронтальной группы зубов (от клыка до клыка) с патологической подвижностью III степени;
нижней челюсти по п.2 с традиционной жесткой стабилизацией фронтальной группы зубов коронковой шиной с использованием блока цельнолитых коронок – 1-й вариант;
нижней челюсти по п.2 с шинированием фронтальной группы зубов шиной автора по предлагаемому способу– 2-й вариант.
Напряженно-деформированное состояние нижней челюсти рассматривалось в режиме глотания, которое, заканчивается центральной окклюзией (тонус максимального сжатия челюстей) при значительном напряжении жевательной мускулатуры.
С целью получения более подробной картины результатов для различных составляющих исследуемых моделей (компактное и губчатое вещество, мягкие ткани, материал шинирующего устройства) выбраны диапазоны величин (нижний и верхний пределы) рассматриваемых перемещений и напряжений, соответствующие их механическим свойствам.