Упражнение №1. Определение зависимости оптической плотности
От концентрации раствора.
- Подключить фотометр в сеть и включить тумблер «СЕТЬ».
- При открытой дверке кюветного отделения прогреть прибор в течение 30 мин.
- Установить в кюветное отделение кювету с дистиллированной водой и исследуемым раствором, начиная с наименьшей концентрации. При работе с кюветами нельзя касаться пальцами рабочих поверхностей, на них не должны оставаться следы жидкости.
- Установить длину волны в 405 нм.
- Определить оптическую плотность раствора рибофлавина, последовательно увеличивая концентрации.
- Полученные данные занести в таблицу.
| С% | 0,75 | 1,5 | ||
| Д |
- По полученным данным построить график зависимости оптической плотности Д от концентрации С.
Упражнение №2. Определение зависимости оптической плотности растворов от длины световой волны.
- В 6-% -ном растворе рибофлавина для указанных в таблице длинах световых волн определить оптическую плотность раствора Д.
- В кюветное отделение поместить 3-%-ный раствор рибофлавина и определить оптическую плотность для тех же длин волн.
- Полученные данные занести в таблицу.
| l (нм) | |||||||
| 6 % | |||||||
| 3 % |
- По данным таблицы на одной координатной плоскости построить графики зависимости оптической плотности Д от длины световой волны l.
- Сделать выводы с учетом полученных результатов.
Контрольные вопросы
- Закон Бугера (с выводом). Натуральный показатель поглощения.
- Закон Бугера–Ламберта–Бера (с выводом). Натуральный молярный показатель поглощения и его физический смысл. Молярный показатель поглощения.
- Коэффициент пропускания и оптическая плотность растворов.
- Рассеяние света. Закон Рэлея.
- Фотобиологические процессы. Спектры фотобиологического действия.
- Оптическая схема фотоэлектроколориметра (спектрофотометра) и работа с ним.
- Применение спектрофотометрии в биологии и медицине.
Тестовые задания
- В дифференциальном уравнении, описывающем поглощение света:
, величина коэффициента пропорциональности k зависит от:
а) толщины поглощающего слоя;
б) интенсивности падающего света;
в) интенсивности света, прошедшего через вещество;
г) поглощающей среды и длины световой волны;
д) времени действия света на вещество.
2. В законе Бугера: 
является:
а) молярным показателем поглощения;
б) натуральным молярным показателем поглощения;
в) натуральным показателем поглощения;
г) монохроматическим показателем поглощения;
д) натуральным показателем рассеяния.
3. Укажите формулу, выражающую закон Бугера для поглощения света:
а) 
; б) 
; в) 
; г) 
; д) 
.
- Укажите формулу, выражающую закон Бугера – Ламберта – Бера:
а) ; б) ; в) 
;
г) 
; д) 
.
5. Укажите связь между молярным показателем поглощения ε и натуральным молярным показателем поглощения 
:
а) 
; б) 
; в) 
;
г) 
; д) 
.
6. Укажите формулу молярной концентрации:
а) 
; б) 
; в) 
; д) 
.
7. В законе Бугера – Ламберта – Бера 
величина 
есть:
а) молярный показатель поглощения;
б) натуральный показатель поглощения;
в) натуральный молярный показатель поглощения;
д) натуральный показатель рассеяния.
8. Укажите формулу коэффициента пропускания:
а) 
; б) 
; в) 
;
г) 
; д) 
.
9. Укажите формулу оптической плотности раствора:
а) 
; б) 
; в) 
;
г) 
; в) 
.
10. Спектр поглощения выражает зависимость:
а) 
б) 
в) 
г) 
11. К негативным фотобиологическим процессам относятся:
а) зрение;
б) фотопериодизм;
в) фототоксические и фотоаллергические;
г) образование витамина Д под действием УФ.
12. К позитивным фотобиологическим процессам относятся:
а) фототоксические;
б) образование витамина А;
в) фотоаллергические;
г) зрение, фотопериодизм, образование витамина Д.
13. Что является первой стадией любого фотобиологического процесса:
а) внутримолекулярные процессы размена энергии;
б) фотохимический акт;
в) межмолекулярный перенос энергии;
г) поглощение кванта света;
д) биохимические реакции с участием фотопродуктов.
14. Чем заканчивается фотобиологический процесс:
а) межмолекулярным переносом энергии;
б) биохимическими реакциями с участием фотопродуктов;
в) темновыми превращениями первичных фотохимических продуктов;
г) общефизиологическим ответом.
15. Спектром фотобиологического действия называется:
а) зависимость биологического эффекта от времени действия света;
б) зависимость оптической плотности раствора от интенсивности действующего
света;
в) зависимость коэффициента пропускания от концентрации раствора;
г) зависимость фотобиологического эффекта от длины волны действующего
света.
16. В результате процесса поглощения скорость изменения концентрации n фермента в растворе определяется формулой:
а) 
; б) 
;
в) 
; г) 
.
17. Укажите формулу дозы облучения:
а) 
; б) 
;
в) 
; г) 
.
18. Укажите формулу эффективного сечения поглощения молекулы фермента:
а) 
; б) 
;
в) 
; г) 
.
19. Укажите вид графика, выражающего зависимость: 
:
а б
в г
20. Укажите вид закона Рэлея для мелкодисперсной среды, а также при молекулярном рассеянии света:
а) 
; б) 
; в) 
; г) 
.
21. Укажите, как будет выглядеть закон Бугера с учетом процессов поглощения и рассеяния:
а) 
б) 
в) 
г) 
22. Монохроматический свет – это свет:
а) с переменной длиной волны;
б) с постоянной частотой и фазой;
в) с постоянной длиной волны;
г) с наложением волн различных частот.
23. Натуральный молярный показатель поглощения – суммарное эффективное сечение поглощения всех молекул растворенного вещества, содержащихся:
а) в 1 м3; б) в одном моле;
в) в 1 см3; г) в 1 дм3.
24. Натуральный молярный показатель поглощения определяется по формуле:
а) 
; б) 
;
в) 
; г) 
.
25. В оптической схеме спектрофотометра кювета расположена между:
а) диафрагмой и пластиной, делящей световой поток на две части;
б) монохроматором и пластиной, делящей световой поток на две части;
в) пластиной, делящей световой поток на две части и фотоэлементом;
г) конденсором и объективом.
26. Пластина в фотоэлектроколориметре делит световой поток так, что:
а) 90 % света направлено на фотодиод, 10 % – на фотоэлемент;
б) 50 % на фотодиод, 50 % – на фотоэлемент;
в) 10 % света направлено на фотодиод, 90 % – на фотоэлемент;
г) 30 % света направлено на фотодиод, 70 % – на фотоэлемент.
27. После включения спектрофотометра:
а) можно сразу приступать к работе с ним;
б) нужно прогреть прибор в течение 5 мин;
в) нужно прогреть прибор в течение 10 мин;
г) нужно прогреть прибор в течение 30 мин.
28. График, выражающий закон Бугера, имеет следующий вид:
 |
а б
в г
29. Оптическая плотность растворов Д имеет следующую единицу измерения:
а) м; б) 
; в) безразмерная величина; г) 
.
30. Уравнение для вывода закона Бугера имеет следующий вид:
а) 
; б) 
;
в) 
; г) 
.
Лабораторная работа №12