Работа с иммерсионным объективом

План

10. Знакомство с иммерсионной системой микроскопа.

11. Приготовление микроскопического препарата бактерий (Вас. subtilis, Proteus vulgaris или Вас. mesentericus): а) метод раздавленной кап­ли с прижизненной окраской микробов; б) метод висячей капли.

12. Фиксация и окраска препаратов бактерий. Изучение препарата при помощи иммерсионного объектива.

Материалы и оборудование

1. Чистые и накопительные культуры бактерий Вас. subtilis, Вас. mesentericus.

2. Чистые и накопительные культуры бактерий Proteus vulgaris.

3. Метиленовый синий.

4. Карболовый фуксин.

5. Нейтральный красный.

6. Иммерсионное масло.

7. Раствор Люголя.

8. Микроскоп.

9. Предметные и покровные стекла.

10. Предметное стекло с вышлифованным углублением.

11. Препаровальные иглы и петли для пересева.

12. Стеклянные палочки.

13. Спиртовка или газовая горелка.

14. Штативы для предметных стекол с лотками.

15. Марлевые салфетки.

Основные сведения

Определенное представлении о форме, размерах и движении мик­робной клетки можно получить, изучая ее прижизненно. Для прижизнен­ного микроскопирования бактерий применяются методы раздавленной ка­пли и висячей капли, описанные ниже. Однако клетки большинства мик­робов бесцветны и прозрачны, что затрудняет их изучение. Кроме того, часто показатель преломления цитоплазмы очень близок к показателю преломления жидкости, в которой она находится, и тогда микроорганизм становится практически невидимым в световом микроскопе. Поэтому мик­роорганизмы можно слегка подкрасить нейтральной краской. Такая окра­ска называется прижизненной.

Красители, которые применяют для прижизненной окраски клеток бактерий, называют витальными. Они бывают основными и кислотными в

После высушивания препарат фиксируют. Для этого высушенный мазок несколько раз быстро проводят через пламя горелки. Фиксация ста­вит своей целью убить микроорганизмы, обеспечить лучшее прикрепление мазка к стеклу, сделать мазок более восприимчивым к краске.

После фиксации приступают к окраске. Фиксированный мазок на 1-2 мин. покрывают раствором метиленового синего или карболового фук­сина. Избыток краски тщательно смывают струёй воды до полного обес­цвечивания стекающих капель. После окраски препарат высушивают над пламенем горелки и рассматривают с иммерсионным объективом. Для это­го на фиксированный окрашенный и хорошо высушенный охлажденный мазок наносят каплю иммерсионного масла (покровным стеклом накры­вать не надо).

К отчету о работе прилагаются рисунки изучаемых бактерий, латин­ские названия их и краткое описание формы и движения клеток.

Контрольные вопросы

13. Перечислите способы приготовления микроскопических препара­тов.

14. Как можно приготовить препарат для наблюдения живых клеток бактерий под микроскопом?

15. С какой целью применяется фиксация при приготовлении препа­ратов бактериальных клеток?

16. Какие красители называются витальными, или прижизненными?

17. Какие красители называются кислотными, а какие основными?

Тема 2. МОРФОЛОГИЯ БАКТЕРИАЛЬНЫХ КЛЕТОК

Занятие 2.Основные формы бактерий. Шаровидные и