Опыт 1. Осаждение белков при кипячении

· В 4 пронумерованные пробирки налейте по 10 капель 1 % раствора белка.

· Затем в пробирку № 2 добавьте 1 каплю 1 % раствора CH3COOH, в пробирку № 3 – 1 каплю 10 % раствора CH3COOH, в пробирку № 4 – 1 каплю 10 % раствора NaOH.

· Все 4 пробирки нагрейте до кипения и наблюдайте образование осадка белка. Почему осадок белка образуется не во всех пробирках? Какие факторы устойчивости белка удаляются в каждом отдельном случае?

Опыт 2. Осаждение белков концентрированными минеральными кислотами.

· В 3 сухие пробирки налейте по 5 капель концентрированных минеральных кислот – серной, соляной и азотной.

· Наклонив пробирку под углом 45*, осторожно, по стенке пробирки, так чтобы жидкости не смешивались, наслоите такой же объем 1 % раствора яичного белка во все пробирки. На границе 2-х слоев наблюдается белое кольцо. Почему?

· Осторожно встряхните пробирки. Что наблюдаете?

Опыт 3. Осаждение белков органическими кислотами.

· В 2 пробирки налейте по 5 капель 1 % раствора яичного белка.

· В пробирку № 1 добавьте 2 капли 10 % раствора сульфосалициловой кислоты, а в пробирку № 2 - 2 капли 10 % ТХУ. Что наблюдается? Почему?

Опыт 4. Осаждение белков солями тяжелых металлов.

· В 2 пробирки внесите по 5 капель 1 % раствора яичного белка.

· В пробирку № 1 добавьте 1 каплю 10 % раствора сульфата меди СuSO4, в пробирку № 2 – 1 каплю 5 % раствора ацетата свинца Pb(CH3COO)2. Что наблюдается? Почему?

Опыт 5. Определение изоэлектрической точки ИЭТ желатина.

Опыт 5.1.

· В три пробирки внесите по 0,2 г порошка желатина и добавьте по 1 мл буферных растворов с рН = 1,0; 4,7; 9,0.

· Осторожно встряхните и оставьте стоять на 1 час.

· Определите высоту геля в пробирках.

· Зарисуйте рузультаты и сделайте выводы о значении ИЭТ по минимуму набухания.

Опыт 5.2.

· В три пробирки налейте по 0,5 мл буферных растворов с рН = 3,7; 4,7; 5,7 и по 0,5 мл 0,5% раствора желатина. Что наблюдаете?

· Затем во все пробирки добавьте по 1 мл этилового спирта. Что наблюдаете? Почему?

Ответьте на вопросы:

1. Какие факторы устойчивости белка вы знаете?

2. Какие факторы устойчивости белка удаляется в каждом опыте данной работы?

3. Что такое изоэлектрическая точка? Объясните результаты опыта 5.

4. Как изменяется растворимость белков в изоэлектрической точке?

5. Сделайте общий вывод по работе, ответив на вопрос: под действием каких факторов происходит денатурация белка?

6. *Что такое кислый, основной и нейтральный белок? Приведите примеры аминокислот определяющих эти свойства белков.

7. *Напишите уравнение диссоциации ГЛИ, АСП, ЛИЗ, ФЕН.

8. *Белок куриного яйца содержит в своем составе в основном моноаминодикарбоновые аминокислоты. Какой заряд имеет молекула такого белка? Каковы реакция среды в растворе яичного белка? При каких условиях этот белок достигает изоэлектрической точки?

9. *Напишите уравнения химических реакций, которые протекают в пробирках № 2, № 3, № 4 в опыте «Осаждение белков при кипячении», на примере глутаминовой аминокислоты (Глу) или аспарагиновой аминокислоты (Асп).

10. *Приведите примеры использования явления денатурации в лабораторной практике.

Практическая работа

«Качественные реакции на составные части молока».

Цели практической работы:

· закрепить знания о свойствах белков и аминокислот;

· закрепить умение проводить необратимое осаждение белков.

Задания для самостоятельной работы:

1. Перепишите в тетрадь принцип и методику проведения практической работы.

2. Оборудуйте рабочее место для практической работы.

3. Выполните практическую работу.

4. Оформите результаты работы оформить в виде таблицы:

№ п/п	Ход работы. Рисунки.	Наблюдения	Выводы

5. Сделайте вывод по работе.

6. Ответьте на дополнительные вопросы.

Принцип:

В состав коровьего молока входят 3,3 % общего белка; 2,7 % казеиногена; 0,6 % альбуминов и глобулинов; 4,8 % лактозы; 3,7 % липидов; 0,7 % солей. Все эти составные части молока можно определить с помощью качественных реакций.

Реактивы: 1. Молоко. 2. Дистиллированная вода. 3. 3 % раствор уксусной кислоты CH3COOH. 4. 10 % раствор гидрооксида натрия NаОН. 5. 1 % раствор гидрооксида натрия NаОН. 6. Сухой сульфат аммония. 7. Насыщенный раствор сульфата аммония. 8. 0,2 % щавелевокислый аммоний. 9. 5 % раствор сульфата меди СuSO4. 10. 5 % раствор ацетата свинца Pb(CH3COO)2. 11. 10 % хлорид кальция. 12. Пепсин.

Оборудование: 1. Пробирки – 5 шт. 2. Глазные пипетки – 2 шт. 3. Пипетка на 1 мл. 4. Спиртовка. 5. Штатив под пробирки. 6. Стеклограф. 7. Химический стаканчик. 8. Воронка. 9. Фильтр. 10. Термостат.