Определение калия в сыворотке крови

Цели занятия:

- Усвоить представление о диагностическом значении определения электролитов в плазме крови;

- Знать функции и распределение минеральных веществ в организме, регуляцию натрия и калия в организме, клинико-диагностическое значение определения калия в сыворотке крови;

- Уметь определять содержание калия в сыворотке крови.

Принцип метода:ионы К⁺ в присутствии ионов свинца меди и нитрита образуют нерастворимый в воде осадок, который растворяют в смеси риванола и уксусной кислоты.

Оптическая плотность полученного раствора, прямопропорциональна количеству нитрит-ионов. Содержание калия находят используя постоянный коэффициент, рассчитанный исходя из соотношения нитрит-ионов и К⁺ в образовавшемся соединении.

Реактивы: 1. 5% раствор ацетат натрия. 2. Смесь растворов 5% ацетат кальция и 5% ацетат свинца. 3. Нитрит натрия в смеси растворов ацетата меди и ацетата свинца. 4. 0,5% раствор риванола 5. Ледяная уксусная кислота. 6. Дистиллированная вода. 7.сыворотка крови.

Оборудование: 1. Пробирки центрифужные 2. Стеклянные палочки. 3. Центрифуга. 4. ФЭК. 5. Кюветы на 10 мм. 6. Колба на 25 мл. 7. пипетки на1 мл, 2 мл. 8. Дозатор на 0,1 мл.

Ход определения:

В центрифужную пробирку вносят 0,5 мл раствора ацетата натрия, 0,1 мл сыворотки и 0,5 мл раствора №3. Содержимое пробирок перемешивают стеклянной палочкой, потирая о внутренние стенки пробирки в течение 5 минут. Оставляют на 1 час, после чего центрифугируют 10 минут при 1500 об/мин. Надосадочную жидкость сливают, а к осадку добавляют 1 мл ацетата натрия, перемешивают стеклянной палочкой и центрифугируют 5 мин при 1500 об/мин. Аналогичное промывание осадка ацетатом натрия проводят до исчезновения голубизны осадка. Затем к осадку приливают 1 мл риванола и 2 мл ледяной уксусной кислоты. Смесь перемешивают и количественно переносят в колбу на 25 мл, и доводят до метки дистиллированной водой.

Колориметрируют при 540 нм в кювете на 10 мм против воды. Рассчитывают результат по формуле:

С, мг/% = Е _* 36

Нормальные величины:в сыворотке – 14 – 24 мг/%

в эритроцитах – 310 – 440 мг/%

Клинико-диагностическое значение определения калия в сыворотке крови.

Калий – основной внутриклеточный катион. 98% калия находится в клетках. В основном калий содержится в мышцах и печени.

Суточная потребность составляет – 2.5 – 5.0 г. В течение суток поступает с пищей до 6г. Физиологическое значение:

· Необходим для синтеза протеинов, АТФ, гликогена.

· Принимает участие в формировании потенциала покоя, действия.

· Активирует ряд ферментов.

· Участвует в регуляции сердца, нервной системы, скелетной и гладкой мускулатуры (повышает тонус и силу сокращений).

В регуляции обмена калия участвует альдостерон, усиливающий его выделение с мочой.

В норме содержание калия в плазме крови составляет 3,6 – 5,4 ммоль/л. Снижение ее до уровня 3,5 ммоль/л приводит к тяжелым нарушениям в организме человека: слабости мышц, появлению вялых параличей, прекращению перистальтики кишечника, вздутию живота.

Увеличение концентрации калия в плазме выше 5,6 ммоль/л сопровождается ощущением «ползания мурашек», «одеревенения конечностей», нарушением ритма сердца. Может наступить остановка деятельности сердца, паралич дыхательных мышц.

Гиперкалиемия наблюдается при:

· заболеваниях, сопровождающихся распадом клеточных элементов и чрезмерным высвобождением калия из клеток (обширный некроз, внутрисосудистый гемолиз, ожогах, опухолях, голодании, шоке);

· уменьшении выделения калия почками (почечная недостаточность, болезнь Аддисона);

Гипокалиемия наблюдается при:

· недостаточном поступлении этого элемента в организм (голодание, после хирургического вмешательства);

· усиленном выведении с мочой, вследствие нарушения эндокринной системы (синдром Конна, Иценко-Кушинга);

· усиленном выделении через кишечник при поражении ЖКТ (неукротимая рвота, понос).

Задание для самостоятельной работы:

· Законспектируйте методику;

· Подготовьте рабочее место для исследования;

· Проведите определение содержания калия в предложенной сыворотке;

· Оцените полученные результаты;

· Заполните бланки анализа;

· Сделайте выводы по работе и рисунки;

· Ответьте на дополнительные вопросы.

Ответьте на вопросы:

1. Дайте определение понятиям: водно-минеральный обмен, минеральный обмен, гомеостаз.

2. Перечислите основные функции воды в организме.

3. Локализация натрия, калия в организме, их биологическое значение для организма.

4. Патология обмена калия и натрия.

5. Перечислите методы определения калия и натрия в организме.

6. Преаналитический этап исследования водно-минерального обмена.

Практическая работа