Определение хлоридов в сыворотке крови

Цели занятия

- Усвоить представление о диагностическом значении определения электролитов в плазме крови;

- Знать классификацию минеральных веществ организма, клинико-диагностическое значение определения хлоридов в сыворотке крови;

- Уметь определять содержание хлоридов в сыворотке крови.

Принцип метода: в присутствии ионов хлора в кислой среде тиоцианат образует тиоцианат-ионы, образующие окрашенный комплекс с железом (+3). Интенсивность окраски пропорциональна концентрации хлоид-ионов в пробе.

Реактивы. 1. Монореагент. 2. Стандартный раствор хлорид-ионов – 100 ммоль/л. 3. Сыворотка крови.

Оборудование. 1. ФЭК. 2. Кюветы на 5 мм. 3. Пипетки на 2,0 мл. 4. Дозатор 0,1 мл 5. Пробирки 3 шт.

Ход определения.

Реактивы.	Опыт, мл	Калибровка, мл	Контроль, мл
Сыворотка.	0,01	-	-
Монореагент.	2,0	2,0	2,0
Стандарт.	-	0,01	-

Реакционную смесь тщательно перемешивают и через 5 минут опытную и калибровочную пробу фотометрируют против контрольной в кюветах на 5 мм при длине волны 460 – 490 нм.

Расчет концентрации хлоридов проводят по формуле:

Хлорид (ммоль/л) = 100 _* Е_опыт/Е_{калибровки}

Нормальные величины (сыворотка крови): 97 – 108 ммоль/л

Клинико-диагностическое значение определения хлоридов в сыворотке крови.

Хлрид-ион – основной внеклеточный анион плазмы крови, компенсирующий влияние катионов. Присутствует в виде солей калия, натрия, кальция и магния. Вместе с перечисленными катионами анионы хлора являются наиболее важными осмотически активными ионами плазмы крови, лимфы, спиномозговой жидкости, клеточного содержимого.

Показатели нормысодержания хлорид-ионов в плазме крови составляют

95,0 – 110,0 ммоль/л.

Гиперхлоремияотмечается при:

· Нарушении водного баланса (обезвоживании, гипервентиляции);

· Заболеваниях почек (острая почечная недостаточность, нефропатия, воспалительные заболевания почек);

· Нарушении функции сердечно-сосудистой системы.

Гипохлоремияотмечается при:

· Пневмонии;

· Тяжелых инфекционных заболеваниях;

· Заболеваниях надпочечников (надпочечники продуцируют гормоны, которые контролируют баланс жидкости и электролитов в организме);

· Усиленном потреблении воды, задержке ее в организме вследствие нарушения выделительной функции почек;

· Повышенном выделении ионов хлора из организма (при избыточном потоотделении, поносе, длительной рвоте).

Задание для самостоятельной работы:

· Законспектируйте методику;

· Подготовьте рабочее место для исследования;

· Проведите определение содержания хлора в предложенной сыворотке;

· Оцените полученные результаты;

· Заполните бланки анализа;

· Сделайте выводы по работе и рисунки;

· Ответьте на дополнительные вопросы.

Ответьте на вопросы:

1. Распределения воды в организме.

2. Суточная потребность в воде, источники, пути выведения.

3. Роль минеральных веществ в организме.

4. Характеристика хлоридов: локализация, биологическая роль.

5. Патология обмена хлора.

6^*.Регуляция обмена натрия, калия, хлора.

Практическая работа

Определение кальция в сыворотке крови.

Цели занятия:

- Усвоить представление о диагностическом значении определения электролитов в плазме крови;

- Знать функции кальция в организме, регуляцию кальция в организме, клинико-диагностическое значение определения кальция в сыворотке крови;

- Уметь определение содержания кальция в сыворотке крови.

Принцип метода:ионы кальция в кислой среде образуют с индикаторным реактивом Арсеназо-III комплекс синего цвета. Степень изменения окраски пропорциональна содержанию кальция и определяется фотометрически.

Реактивы. 1. Рабочий реактив с Арсеназо-III 2. Калибровочный раствор кальция 2,5 ммоль/л. 3.Сыворотка крови

Оборудование. 1. Пробирки 2 шт. 2. Пипетки на 2 мл. 3. Дозатор на 0.02 мл. 4.ФЭК.

Ход определения.

Реактивы	Проба, мл	Стандарт, мл
Сыворотка	0.02	-
Рабочий раствор	2,0	2,0
Стандартный раствор	-	0,02

Перемешивают и оставляют стоять на 2 минуты при комнатной температуре, измеряют оптическую плотность пробы (Е₁) и стандарта (Е₂) против рабочего раствора, при длине волны 620 - 660 нм, в кювете на 5 мм.

Расчет проводят по формуле:

Кальций (ммоль/л)= 2.5 * Е_опыта/Е_{стандарта}

Нормальные величины(сыворотка крови) – 2.25 – 2.75 ммоль/л

Предупреждение:

Лабораторная посуда, применяемая при определении кальция, должна быть совершенно чистой. После обычного мытья посуду следует поместить на ночь в 2% раствор Комплексона 3 в аммиачной воде, потом тщательно промыть дистиллированной водой и высушить.