Опыт №2: «ИССЛЕДОВАНИЕ ВЫСАЛИВАНИЯ БЕЛКОВ»
Высаливание - процесс осаждения белков солями щелочных и щелочноземельных металлов, который является обратимым и сохраняет нативные свойства белков. Растворы солей нейтрализуют заряд белковых частиц вызывают их дегидратацию, что ведет к осаждению белка. При прилипании воды происходит восстановление его исходных физико-химических и биологических свойств.
Метод основан не способности сульфата аммония нейтрализовать заряд молекул белков я вызывать их дегидратацию, что приводит к осаждению белка
Ход определения: В пробирку наливают 2-3 мл раствора яичного белка и добавляют кристаллический сульфат аммония по появления осадка Затем добавляют дистиллированной воды, хорошо перемешивают наблюдают постепенное исчезновение осадка белка. Делают вывод.
Опыт №3: «ИССЛЕДОВАНИЕ ДЕНАТУРАЦИИ БЕЛКОВ»
Вещества, нарушающие структурную организацию белковой молекулы, (т.е. четвертичную, третичную и вторичную структуры) приводят к изменению физико-химических и биологических свойств белка. Это явление ваз. денатурацией. Денатурация изменяет физико-химические свойства белка, в частности его растворимость. При этом белок становится более гидрофильным и легко осаждается. Денатурация чаще всего необратима.
Денатурирующие факторы делятся на химические, физические и биологические.4 Наиболее обширны группы химических факторов; кислоты, тяжелые металлы, алкалоиды, органические растворители, Физические факторы: температура, ионизирующая радиация, ультразвук и т.д.
Метод основан на способности минеральных кислот и органических растворителей вызывать разрушение пространственной структуры белка, что приводит к его осаждению.
Ход работы. В две пробирки наливают по 1-2 мл раствора белка. Прибавляют> по каплям в первую пробирку раствор концентрированной азотной кислоты, во вторую - раствор ацетона. В пробирках образуются осадки белков.
Делают вывод.
Лабораторная работа по теме «ВИТАМИНЫ»
Опыт №1: «КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВИТАМИНА «С» В КАПУСТЕ».
Витамин С, или аскорбиновая кислота, относится к водорастворимым витаминам. Аскорбиновая кислота легко окисляется как в щелочной так и в кислой среде. Продукт ее окисления дегидроаскорбиновая кислота, которая восстанавливаясь (присоединяя два атома водорода), превращается в аскорбиновую кислоту. Благодаря этому свойству аскорбиновая кислота участвует в окислительно-восстановительных реакциях в организме, играя роль переносчика.
Ход работы: Навеску капусты 10 г тщательно растирают в ступке, небольшими порциями добавляя стеклянный песок (работать необходимо встеклянных очках). Затем прибавляют несколько мл соляной кислоты. Полученный гомогенат переносят е цилиндр, ступку и пестик смывает кислотой, полученный осадок также сливают в цилиндр. Объем жидкости доводят до метки 100 мл соляной кислотой. Едут пока выпадет осадок и отбирают 10 мл над осадочной жидкости в коническую колбу (делают 2 пробы). Затем титруют реактивом Тильманса (раствором 2,6-дихлорфенолиидо-фенола) до появления розового окрашивания, не исчезающего в течение 30 сек.
Количество витамина С рассчитывают по формуле (мг/%)
А*0,088*10 *100
У* С
· где, а - количество реактива Тильманса (мл), пошедшее на титрование фильтрата, 0,088 - количество аскорбиновой кислоты (мг) эквивалентное
· 1мл реактива Тильманса; 100 - общий объем солянокислого экстракта; у - объем фильтарата (мл), взятый для фильтрования реактивом Тильманса;
· 10 - пересчет на 100 г растительного материала; С — навеска растительной массы.
Лабораторная работа по теме «ФЕРМЕНТЫ»
Опыт №1. ВЛИЯНИЕ ТЕМПЕРАТУРЫ НА АКТИВНОСТЬ
А -АМИЛАЗЫ СЛЮНЫ
Под влиянием фермента амилазы слюны крахмал гидролизустся сначала до декстринов, затем до дисахарида — мальтозы и под действием фермента мальтозы — до глюкозы.
Крахмал образует — с иодом синее окрашивание, декстрины — разную окраску в зависимости от их сложности; амилодекстрины - фиолетовую, эритродекстрины - краснобурую, ахродекстрины - желто-бурую. Отсутствие окраски указывает на образование мальтозы или глюкозы.
ХОД РАБОТЫ, В три пробирки наливают по 5 мл 1 % раствора крахмала
В пробирку № 1 добавляет 2-3 мл предварительно прокипяченной слюны
В пробирку № 2 и №3добавляют 2-3 мл разбавленной, но непрокипяченной слюны. Перемешивают содержимое пробирок и ставят пробирки № I и № 2 в водяную баню при температуре 38-40 °С Пробирку №3 ставят в сосуд со льдом. Через 15 минут во все пробирки добавляют по 2-3 капли раствора йода в йодистом калии
Наблюдают изменение окраски и делают вывод