Спиномозговая жидкость (смж, ликвор) как диагностический показатель состояния нервной ткани.

Общий объем спинномозговой жидкости (СМЖ) - ликвора – в норме у взрослого человека около 140 - 150 мл, который каждые 3-4 час. обновляется. Ликвор является ультрафильтратом плазмы, но за счет гематоэнцефалического барьера он отличается по составу от сыворотки крови. В СМЖ вода составляет 99%, сухой остаток - около 1%. Качественный состав спинномозговой жидкости почти одинаков с составом крови, но количественное соотношение составных частей совсем другое. Большая часть веществ СМЖ находится в меньших концентрациях, чем в крови (белок, аминокислоты, глюкоза, Са, К, фосфор и др.), но есть вещества, концентрация которых в спинномозговой жидкости выше, чем в крови (хлориды, магний и др.). В СМЖ содержится не более 5 клеток в 1 мкл (обычно лимфоцитов).

Исследование спинномозговой жидкости имеет большое значение для диагностики, прогноза и лечения ряда заболеваний ЦНС и мозговых оболочек. Состав ликвора значительно колеблется в зависимости от места прокола, сделанного для его получения (люмбальная, цистернальная, вентрикулярная). У новорожденных (недоношенных) детей из-за повышенной проницаемости мозгового барьера по отношению к билирубину ликвор имеет ксантохромную окраску. Привнутричерепном кровоизлиянииСМЖ содержит кровь и будет наблюдаться ксантохромия (результат деградации гемоглобина из распавшихся эритроцитов, проявляется спустя 2- 4 час от момента кровоизлияния). Концентрация глюкозы также может существенно изменяться. Гипогликорахия характерна для менингита, гипергликорахия наблюдается при энцефалитах, диабете и др. Установлено, что при менингитах, инсультах, опухолях мозга, травмах в СМЖ повышается активность АСТ, ЛДГ и других ферментов.

Таблица 1. Химический состав спинномозговой жидкости

Компоненты	Содержание
СМЖ	Плазма крови
Общий белок г/л	0.15-0.40	65-85
Проба Пенди	отрицат
Альбумины г/л	0, 15- 0.30	35 -50
Глобулины г/л	0,04 – 0,09
Альбумины/глобулины	4/1	1,2-1,4
Остаточный азот ммоль/л	8,57-14,28
Азот аминокислот ммоль/л	1,14-1,93	2,9-4,3
Азот мочевины ммоль/л	2,86-7,14	3,3-6,6
Глюкоза ммоль/л	2,50-4,16	3,6-5,5
Молочная кислота ммоль/л	1,67	1,1-1,2
Холестерин ммоль/л	2,62-5,20	3,9-6,5
ЛДГ ИЕ/л	5 - 28	125- 240
Лизоцим мг/л	< 1, 5	0, 4-1, 3
Na+ ммоль/л		132-150
K+ ммоль/л	3,5-4,0	3,8-5,4
Ca ммоль/л	1,5	2,25-2,80
CI- мкмоль/л	120-130
рН	7.4-7.5
Вид	Прозрачная

Работа № 1. Определение белка в спинномозговой жидкости

Принцип метода:Для определения белка в спинномозговой жидкости используются некоторые реакции осаждения - реакция Нонне-Апельта-Шумма, проба Пенди. Реакция основывается на осаждении глобулинов при полунасыщении (NH₄)₂SO₄ .

Порядок выполнения работы:

1. Реакция Ноне – Апельта - Шумма. К 20 каплям спинномозговой жидкости прибавляют равный объем сульфата аммония. В осадок выпадают глобулины.

2. Проба Пенди. На предметное стекло наносят несколько капель реактива Пенди (насыщенного раствора карболовой кислоты). Рядом помещают 1-2 капли ликвора. Палочкой мешают капли реактива и исследуемого раствора. При наличии белка возникает помутнение, интенсивность которого пропорциональна концентрации белка.

Клинико-диагностическое значение:Определение белка и белковых фракций является самым важным исследованием ликвора. Количество белка в ликворе (протеинорахия) при органических заболеваниях ЦНС и мозговых оболочек тем больше, чем острее процесс и чем сильнее затронуты мозговые оболочки. При остром гнойном менингите содержание белка может достигать 5-20 г/л.

Задания для самоконтроля подготовки к практическому занятию (тесты):

1. Подберите к каждому из указанных биогенных аминов аминокислоту-предшественник

А. глутамат 1. гистамин

Б. гистидин 2. ГАМК

В. триптофан 3. ацетилхолин

Г. Тирозин 4. серотонин

2. Для образования биогенных аминов необходимы ферменты:

а. аминотрансферазы б. оксидазы

в. декарбоксилазы г. дегидрогеназы

3. При функционировании холинэргических синапсов нейромедиатором служит

а. ДОФА б. ГАМК

в. серотонин д. ацетилхолин

4. При функционировании адренергических синапсов нейромедиатором служит

а. ацетилхолин б. ГАМК

в. серотонин д. дофамин

5. Медиатором, вызывающим процессы торможения в нейронах, является

а. ДОФА б. ГАМК

в. серотонин д. ацетилхолин

6. Инактивация ацетилхолина в синаптической щели происходит под действием фермента

а. холинацетилтрансферазы б. фосфолипазы А₂

в. декарбоксилазы д. ацетилхолинэстеразы

7. К нейропептидам, регулирующим болевые ощущения и нервно-психические реакции организма относятся

а. ДОФА б. ГАМК

в. серотонин д. эндорфины, энкефалины

8. Ингибитором ацетилхолинэстеразы является

а. морфин б. тубокурарин

в. резерпин д. тетродотоксин

9. Ингибитором Na,K-АТФазы (развития потенциала действия) является

а. морфин б. тубокурарин

в. резерпин д. тетродотоксин

10. Причиной развития болезни Паркинсона является нарушение обмена

а. ацетилхолина б. ГАМК

в. серотонина д. дофамина

Задания для контроля уровня сформированности компетенций в учебное время:

1. Какие субстраты обеспечивают энергетику мозга?
2. Какие функции нервной ткани будут нарушаться при белковом голодании?
3. Почему ЦНС чрезвычайно чувствительна к нарушению поступления кислорода?
4. Резкое снижение сахара в крови вызывает появление нарастающих симптомов гипогликемической комы. Почему ЦНС чувствительна к гипогликемии?
5. Как происходит обезвреживание аммиака в нервной ткани?
6. Какие вещества способны проникать через гематоэнцефалический барьер (ГЭБ)?
7. Объясните механизм действия прозерина, являющегося структурным аналогом ацетилхолина.
8. Какие вам известны ингибиторы ацетилхолинэстеразы, применяемые в качестве ядов, инсектицидов, БОВ?
9. С какими особенностями метаболизма метионина связано применение его в качестве лекарственного препарата в нейропатологии?
10. С какими особенностями метаболизма глутаминовой кислоты связано применение ее в качестве лекарственного препарата в нейропатологии?