Иммунологические основы трансфузиологии. Функции крови
Антигенная система крови - совокупность ее антигенов, которая наследуется аллельными генами. Антигены делят на клеточные (эритроцитарные, лейкоцитарные, тромбоцитарные) и плазменные. Наибольшее значение имеют системы АВ0, резус, MNSs, Kell, HLA.
Группа крови - сочетание нормальных иммунологических и генетических признаков крови, которые наследственно детерминированы и являются биологическим свойством каждого индивидуума. На практике термин "группа крови" отражает сочетание эритроцитарных антигенов систем АВ0 и резус и соответствующих антител в сыворотке крови.
В основе определения групп крови лежит специфичная реакция "антиген-антитело". По известному антителу определяют неизвестный антиген и наоборот.
Система АВ0
Выделяют 4 группы крови. Принадлежность к группе крови определяется антигенами (!), так как набор антител может быть не нормальным.
Антитела: нормальные - появляются в раннем детском возрасте, являются неполными, относятся к IgG, агглютинируют при температуре близкой к комнатной (холодовые)
изоиммунные - появляются при иммунизации (переливание несовместимой крови, антигенный конфликт при нарушении плацентарного барьера при беременности, являются полными, относятся к IgМ, агглютинируют в коллоидной среде при температуре близкой к 37оС (тепловые).
Набор антигенов и антител
| Группа крови | антигены | антитела |
| I II III IV | А В АВ | α β β α |
Антигены и антитела имеют разновидности (по убыванию антигенной силы):
А1, А2, А3, α1, α2, α3
В1, В2, β1, β2
В силу этого возможна патология групп крови, например А1 β1 α2
В данном случае α2 - нормальный экстраагглютинин или изоиммунное антитело. Агглютинация в крови не происходит вследствие неблагоприятных условий (температура, титр реагентов) или вследствие разницы в структуре антигена и активного центра антитела.
Определение группы крови системы АВ0
Методики
1. при помощи стандартных сывороток
2. при помощи цоликлонов (моноклональные антитела, получаемые из культуры клеток мышиной миеломы, обладающие высокой силой и низкой специфичностью)
Определение набора антител при помощи стандартных эритроцитов не является методикой определения группы крови, так как группа крови определяется набором антигенов, а не антител.
Методы
1. Простой (при помощи стандартных сывороток, применяется в отделениях при переливании компонентов крови)
2. Перекрестный (одновременно при помощи стандартных сывороток, цоликлонов и стандартных эритроцитов. Дает развернутую характеристику группы крови. Применяется в лабораториях и на станциях переливания крови).
Для определения группы крови простым методом необходимо иметь: набор стандартных сывороток 2-х серий с титром не ниже 1:32, глазные пипетки по числу флаконов с сыворотками, маркированную тарелку, палочки для перемешивания, секундомер, теплое, освещенное помещение, инструкцию по определению группы крови.
Сыворотки двух серий наносятся на тарелку в соответствии с маркировкой, в них добавляется исследуемая кровь или эритроцитная масса в соотношении 10:1, размешивается отдельными палочками. Первые признаки агглютинации появляются через 30 сек. Оценка реакции агглютинации производится через 5 минут невооруженным глазом. В двух сериях результат должен быть одинаковым, если он разный, то определение группы крови необходимо повторить с другими сериями реактивов.
Учет результатов определения группы крови стандартными сыворотками.
| Анти АВ (I) | Анти В (II) | Анти А (III) | 0 (IV) контроль | |
| 0 I | - | - | - | - |
| А II | + | - | + | - |
| В III | + | + | - | - |
| АВ IV | + | + | + | - |
Стандартная сыворотка IV группы является контрольной и используется, если агглютинация произошла во всех каплях.
В контрольных каплях агглютинация не должна (!!!) происходить, если она есть, то определение группы крови необходимо повторить с другими сериями реактивов.
Для определения группы крови при помощи цоликлонов необходимо иметь флаконы с цоликлонами, маркированную тарелку, палочки для перемешивания, секундомер, теплое, освещенное помещение, инструкцию по определению группы крови. Реакция с цоликлонами быстрая и крупнолепестковая. Контролем служит изотонический раствор хлорида натрия.
Учет результатов определения группы крови цоликлонами.
| Анти А | Анти В | Изотонический раствор (контроль) | |
| 0 I | - | - | - |
| А II | + | - | - |
| В III | - | + | - |
| АВ IV | + | + | - |
Для определения антител системы АВ0 при помощи стандартных эритроцитов необходимо иметь флаконы со стандартными эритроцитами, маркированную тарелку, палочки для перемешивания, секундомер, теплое, освещенное помещение, инструкцию по определению группы крови. Первые признаки агглютинации появляются через 30 сек. Оценка реакции агглютинации производится через 5 минут невооруженным глазом. Контролем служат эритроциты первой группы.
Учет результатов определения группы крови стандартными эритроцитами.