Работа 7. Обнаружение соединений аргентума, купрума, цинка и бария в биоматериале.
Качественное определение соединений купрума в исследуемом биоматериале
7.1. Реакция с гексацианоферратом (II) калия. От прибавления гексацианоферрата (II) калия К4 [Fе (СN)6] к соединениям меди образуется красно-бурый осадок Сu2[Fе(СN)2].
Реактивы и оборудование.
Исследуемый раствор, содержащий соединения купрума, 5 % раствор гексацианоферрата (II) калия, штатив с пробирками, пипетки, груши.
Ход работы.
К 0,5 мл водной фазы прибавляют 2 капли 5 %-го раствора гексацианоферрата (II) калия. При наличии ионов меди выпадает красно-бурый осадок. Предел обнаружения: 0,1 мкг меди в пробе.
В протокол записывают ход работы, полученные результаты.
Качественное определение соединений серебра в исследуемом биоматериале
7.2.Реакция с азотной кислотой.
От прибавления азотной кислоты к раствору, содержащему аммиакат серебра, образуется осадок:
[Ag(NH3)2]Cl + 2HNO3 → AgCl + AgCl + 2NH4NO3
Реактивы и оборудование.
Исследуемый раствор, содержащий аммиакат серебра, азотная кислота, индикаторная бумага, штатив с пробирками, пипетки, груши.
Ход работы.
К 0,1—0,5 мл раствора, содержащего аммиакат серебра, добавляют азотную кислоту до рН=1. Образование белого осадка указывает на наличие ионов серебра в растворе.
Предел обнаружения: 0,1 мкг серебра в 1 мл. Граница обнаружения: 1 мг серебра в 100 г биологического материала.
В протокол записывают ход работы, полученные результаты.
7.3. Реакция с иодидом калия
От прибавления насыщенного раствора иодида калия к раствору, содержащему аммиакат серебра, наблюдается появление мути или желтого осадка.
Реактивы и оборудование.
Исследуемый раствор, содержащий аммиакат серебра, насыщенный раствор иодида калия, штатив с пробирками, пипетки, груши.
Ход работы.
К 0,5 мл раствора, содержащего аммиакат серебра, прибавляют 0,5 мл насыщенного раствора иодида калия. Появление мути или желтого осадка AgI указывает на наличие серебра в исследуемом растворе.
В протокол записывают ход работы, полученные результаты.
Качественное определение соединений цинка в исследуемом биоматериале
Наличие ионов цинка в минерализате вначале определяют при помощи реакции с дитизоном. Если результат этой предварительной реакции отрицательный, то дальнейшее исследование минерализата на наличие ионов цинка не проводят. При положительном результате реакции с дитизоном проводят дальнейшее исследование минерализата на ионы цинка. С этой целью из минерализата ионы цинка выделяют в виде диэтилдитиокарбамата. Полученный диэтилдитиокарбамат цинка разлагают кислотой и в водной фазе определяют наличие ионов цинка при помощи соответствующих реакций.
7.4. Реакция с дитизоном
При взаимодействии ионов цинка с дитизоном образуется однозамещенный дитизонат этого металла
Дитизонат цинка хорошо экстрагируется хлороформом и некоторыми другими органическими растворителями. Раствор ди-тизоната цинка в хлороформе имеет пурпурно-красную окраску. Кроме ионов цинка с дитизоном окрашенные комплексы образуют и катионы некоторых других металлов, для маскировки которых прибавляют раствор тиосульфата натрия или тиомочевины.
Реактивы и оборудование.
Исследуемый раствор, содержащий соединения цинка, насыщенный раствор тиосульфата натрия, 5 %-й раствор гидроксида калия, ацетатный буферный раствор (рН=5), хлороформ, 0,01% раствор дитизона в хлороформе, индикаторная бумага, стакан, делительная воронка, пипетки, груши.
Ход работы.
В стакан вносят 0,5 мл минерализата, к которому прибавляют 0,25 мл насыщенного раствора тиосульфата натрия, а затем по каплям прибавляют 5 %-й раствор гидроксида калия до рН = 4,5—5,0 (по универсальному индикатору). К этой смеси прибавляют 1 мл ацетатного буферного раствора (рН = 5), жидкость хорошо перемешивают и количественно переносят в делительную воронку, в которую прибавляют 1 мл хлороформа, 2 капли 0,01 %-го раствора дитизона в хлороформе, а затем содержимое делительной воронки хорошо взбалтывают. При наличии ионов цинка в минерализате зеленая окраска хлороформного слоя исчезает, а появляется розовая или пурпурно-красная окраска этого слоя (в зависимости от количества ионов цинка). Предел обнаружения: 0,25 мкг в 1 мл. Граница обнаружения: 5 мкг цинка в 100 г биологического материала.
В протокол записывают ход работы, полученные результаты.
7.5. Реакция с гексацианоферратом (II) калия.
От прибавления гидроксида калия и гексоцианоферрата калия к раствору, содержащему соединения цинка, выделяется белый осадок:
3Zn2+ + 2K4[Fe(CN)6] → K2Zn3[Fe(CN)6]2 + 6K+
При добавлении избытка реактива может образоваться более растворимый осадок [Zn2 [Fе (СN)6].
Реактивы и оборудование.
Исследуемый раствор, содержащий соединения цинка, 5 %-й раствор гидроксида калия, 5 % раствор гексацианоферрата (II)калия, штатив с пробирками, пипетки, груши, индикаторная бумага.
Ход работы.
К 1 мл водной фазы добавляют 5 %-й раствор гидроксида калия до рН=5 (по универсальному индикатору) и 3—4 капли 5 %-го раствора гексацианоферрата (II)калия. Предел обнаружения: 3 мкг цинка в 1 мл.
В протокол записывают ход работы, полученные результаты.
7.6. Реакция с сульфидом натрия.
От прибавления 5 %-го раствора гидроксида калия и сульфида натрия к раствору, содержащему соединения цинка, наблюдается появление белого осадка.
Реактивы и оборудование.
Исследуемый раствор, содержащий соединения цинка, 5 %-й раствор гидроксида калия, 5% раствор сульфида натрия, штатив с пробирками, пипетки, груши, индикаторная бумага.
Ход работы.
К 1 мл водной фазы прибавляют 5 %-й раствор гидроксида калия до рН = 5 и 3—4 капли 5 %-го свежеприготовленного раствора сульфида натрия. Образование белого осадка ZnS указывает на наличие ионов цинка в водной фазе. Предел обнаружения: 1,5 мкг цинка в 1 мл.
В протокол записывают ход работы, полученные результаты.
Качественное определение соединений бария в исследуемом биоматериале.
Реакция с хроматом калия.
При взаимодействии ионов бария с хроматами образуется, светло-желтый осадок хромата бария, растворимый в минеральных кислотах и нерастворимый в уксусной кислоте. Осадок хромата бария образуется и при взаимодействии ионов бария с дихроматами:
2Ba2+ + K2Cr2O7 +H2O → 2BaCrO4 +2K+ +2H+
В связи с растворимостью осадка хромата бария в минеральных кислотах прибавляют ацетат натрия:
CH3COONa + H+―CH3COOH + Na+
Образовавшаяся при этой реакции уксусная кислота не растворяет осадка хромата бария. Ионы стронция не мешают этой реакции, так как осадок хромата стронция растворяется в минеральных и уксусной кислотах.
Реактивы и оборудование.
Исследуемый раствор, содержащий соединения бария, бихромат калия, азотная кислота, ацетат натрия, штатив с пробирками, пипетки, груши.
Ход работы.
К 2 мл исследуемого раствора, содержащего соединения бария прибавляют 1 мл 5% раствора бихромата калия, вследствие чего образуется светло-желтый осадок хромата бария. Содержимое пробирки делят поровну. В первую пробирку вносят 1 мл минеральной кислоты (азотной), во вторую – 1 мл ацетата натрия. Результаты соответствующих реакций заносят в протокол и делают выводы о растворимости хромата бария в минеральных и органических кислотах
В протокол записывают ход работы, полученные результаты.