Основной раствор глицина (плотность 1,072 г/л)

Растворить 0,1072 г глицина в 100 мл дистиллированной воды. Хранить этот основной раствор при 0 ° С.

Стандартный раствор глицина

Разбавить основной раствор (1 мл довести до объема 100 мл) дистиллированной водой. В 1 л этого стандартного раствора содержится 2 мг/л свободного аминного азота.

Аппаратура

· Спектрофотометр видимого света.

· Пипетки с автоматической системой отсоса или пипетки с автоматическим поршнем (20 мл, 10 мл, 5 мл, 2 мл, 1 мл).

· Водная баня с кипящей водой.

· Водяная баня при 20 °С (±0,1 °С).

· Пробирки 16х 160 мм.

· Стеклянные шарики диаметром 20-25 мм.

Процесс

1. Обработка пробы.

1.1. Разбавьте сусло (1 мл - 100 мл) дистиллированной водой.

1.2. Ввести по 2 мл разбавленной пробы в три пробирки диаметром 16x160 мм.

1.3. Провести определение, как в (4).

2. Слепой опыт.

Введите по 2 мл воды в три пробирки диаметром 16x160 мм, проведите определение, как в п. 4.

3. Стандарт.

Введите по 2 мл стандартного раствора глицина в три пробирки диаметром 16х х160 мм, проведите определение, как в п. 4.

4. 4. Определение.

Для всех проб, приготовленных по пп. 1,2 и 3.

4.1. Добавьте 1 мл цветного реактива и поместите стеклянный шарик на пробирку, чтобы предотвратить испарение.

4.2. Поместите пробирки в водяную баню с кипящей водой, выдержите их точно 16 мин.

4.3. Охладите их в водяной бане при 20 °С в течение 20 мин.

4.4. Добавьте 5 мл реактива для разведения и тщательно перемешайте.

4.5. В течение 30 мин замерьте абсорбционную способность при длине волны 570 нм путем сравнения ее с этим же параметром воды на спектрофотометре.

Выражение результатов

Расчет:

где:

FAN - количество свободного аминного азота в пробе, мг/л; Ар - средняя из абсорбционных способностей испытываемых растворов; Ав - средняя из абсорбционных способностей слепых проб;

А_P - средняя из абсорбционных способностей для поправки к темным сортам солода и пива;

А_B - количество свободного аминного азота (мг/л) в стандартном растворе глицина;

А_F - фактор разбавления пробы;

А_S - абсорбционная способность стандартного раствора глицина.

Точность

Коэффициент вариации воспроизводимости ошибки: (CVSr) = ±5%.

ПРИЛОЖЕНИЕ 7 Метод осаждения азота сернокислым магнием (МЕВАК) Приборы:

· термостат 35 °С (ванна затора);

· фильтр черной полосы, диаметр 11 см для сусла, фильтр белой полосы, диаметр 11 см, для пива;

· колба Кьельдаля, 500 мл;

· перегонная установ ка Кьельдаля.

Реактивы:

· раствор сернокислого магния (реакция на выпадание): растворить 350 г MgS0₄ ^x х 7Н₂0 и 0,5 мл концентрированной H₂SО₄ в 500 мл Н₂О; величина pH раствора -1,6;

· H₂SО₄,5N: дополнить 140 мл концентрированной H₂SО₄ с Н₂О до 1000 мл;

· растворы для определения азота по Кьельдалю.

Выполнение:

· профильтровать сусло, вывести из пива углекислоту и профильтровать;

· в 15 мл колбе Эрленмейера соединить 40 г магния, 0,5 мл 5N H₂SО₄ и 40,0 мл сусла или пива;

· поставить в термостат при 35 °С;

· оставить там на 1 час, при этом каждые 10 мин хорошо перемешивать, потом сразу профильтровать;

· промыть колбу Эрленмейера четыре раза, применяя по 10 мл теплого раствора сернокислого магния (около 40-50 °С), при этом всю пробу без потерь перенести на фильтр;

· фильтр промыть соответственно еще три раза с добавлением 10 мл раствора сернокислого магния, при этом каждый раз ждать, пока вся жидкость не пройдет через фильтр;

· фильтр с осадком положить в колбу Кьельдаля;

· как обычно провести подсоединение Кьельдаля;

· для определения холостого значения определить содержание азота, в трех фильтрах получить среднее значение.

Расчет:

N_MgSO4 - азот осаждаемый MgSО₄, мг/л;

Н - расход 0,1 н раствора H₂SО₄ для основного опыта, мл;

В - расход 0,1 н раствора H₂SО₄ для холостого опыта, мл.

ПРИЛОЖЕНИЕ 8 Конечная степень сбраживания Посуда

Сосуд - тонкостенная колба или реактивная склянка емкостью 0,5 л с ватной пробкой; мерный цилиндр емкостью 500 мл; фарфоровая ступка; воронка, пикнометр.

Ход определения

Сухим мерным цилиндром отмеривают 200 мл разбавленного сусла и отвешивают дрожжи в количестве 5% от отмеренного сусла. Дрожжи помещают в фарфоровую ступу. Приливают к ним небольшое количество разбавленного сусла из цилиндра и тщательно растирают пестиком.

Дрожжи с пестика и из ступки смывают остатком разбавленного сусла в сухую колбу. Склянку (колбу) закрывают ватной пробкой и ведут брожение при температуре не ниже 20 °С, но не выше 25 °С в течение 2-х суток при постоянном помешивании с помощью магнитной мешалки.

По истечении 2-х суток сусло сливают, отфильтровывают через складчатый фильтр. В фильтрате замеряют видимый экстракт (пикнометром) сахарометром. По пикнометру определяют относительную плотность и по ней по таблице устанавливают содержание экстракта