Методи визначення головневих грибів у комбінованих та борошнистих кормах

Головневі гриби уражують злакові рослини в період вегетації. На визначеній стадії розвитку міцелій головневих грибів розпада­ється на окремі клітини, спори, які утворюють щільну темнозабарвлену масу у видозмінених стеблах, зернах, іноді листках. Окремо компоненти комбінованих та борошнистих кормів можуть бути уражені спорами.

Метод використовується при сумнівній якості корму, при підозрі на отруєння сільськогосподарсь­ких тварин головнею, а також у випадку використання для виготовлення комбікорму зернової сировини з максимально допустимим умістом головні. Метод базується на підрахунку спор головневих грибів за допомогою рахункової камери Горяєва.

10 г подрібненого комбікорму поміщають у фарфорову ступку і висушують в сушильній шафі при 100 °С протягом 15 хв. Температура повинна бути встановлена заздалегідь.

Висушену наважку ретельно розтирають у цій же ступці, пе­ріодично додаючи (3–5 рази) по 3 мл сірчаного ефіру для рівномірного розподілення спор у наважці.

0,1 г комбікорму, розтертого з сірчаним ефіром, поміщають в пробірку, доливають 10 мл 0,5%-ного розчину їдкого калію, збовтують, підігрівають над полум'ям до закипання, охолоджують і ретельно перемішують вмістиме пробірки. Тонко відтягнутою пастерівською піпеткою відразу ж беруть невелику кількість рідини і переносять у камеру Горяєва або на предметне скло.

Огляд і підрахунок спор проводять за допомогою мікроскопа при гарному освітленні й збільшенні 200х300.

Рахують кількість спор по всій сітці камери, площа якої 9 мм².

Спори головні добре видимі під мікроскопом. Вони одноклітинні, кулеподібні, але можуть бути продовгуватими, еліпсоподібними або неправильної форми. Колір спор – жовтуватий, коричневий, оливковий. Оболонка гладка, щетиниста, сітчасто-потовщена. При підрахунку кількості спор проводять не менше шести визначень, після чого вираховують середнє арифметичне.

Вміст головні (X) у відсотках вираховують за формулою:

,

де а – середнє арифметичне знайденої кількості спор;

22 – кількість спор головневих грибів, встановлена дослідним шляхом для комбікорму, який містить 0,1% головні.

Різниця між результатами контрольних дослідів не повинна перевищувати 0,01%.

Методи визначення маточних ріжок у комбінованих та борошнистих кормах

Обладнання.

Зразок комбікорму, флакон з хлороформом і спиртом, флакон із гліцерином, піпетки на 5 і 10 мл, скляні бюкси, пробірки, збільшувальне скло, пастерівські піпетки, предметне скло, мікроскоп, вага, фарфорова ступка.

Маточні ріжки (клавіцепс Пурпуреа) – гриб, який досить часто уражує культурні й дикорослі злаки в період вегетації. На уражених маточними ріжками колосках, під час дозрівання, замість зернин утворюються буро-фіолетові ріжки (склероції), часто значно крупніші, ніж зернини (15 мм). При згодовуванні тваринам борошнистих і комбінованих кормів із домішками маточних ріжок, виникає отруєння – ерготизм. Для захворювання характерно ураження центральної нервової системи, шлунково-кишкового тракту, інколи інших органів та тканин.

Для визначення маточних ріжок необхідно 1 г подрібненого комбікорму дрібного помелу в 1 мм помістити в скляний бюкс або пробірку; долити 10 мл хлороформу (питома вага 1,48) і збовтати. Потім додати малими порціями 5 мл етилового спирту (ректифікату чи гідролізного) і відстоювати, постійно струшуючи. Темні частинки маточних ріжок спливають на поверхню.

Належність випливших часточок до маточних ріжок перевіряють під мікроскопом. Для цього пастерівською піпеткою виловлюють декілька частинок і переносять у краплину гліцерину на предметне скло. Препарат розглядають при збільшенні в 100–300 разів. При наявності маточних ріжок видно характерну повстяну будову, яка утворюється сплетінням міцеліальних ниток гриба.

Для досліджуваного зразка комбікорму проводять не менше трьох визначень, кожного разу підраховуючи кількість часточок. Потім вираховують середню арифметичну величину, за якою встановлюють вміст маточних ріжок у % (табл. 9).

Таблиця 9 – Вміст маточних ріжок у комбікормі(%)