Определение осмотической резистентности эритроцитов

Степень устойчивости эритроцитов в гипотоническом растворе оценивается как их осмотическая резистентность (устойчивость). Различают минимальную и максимальную границы осмотической резистентности. Для здоровых лю­дей минимальная граница соответствует раствору, содержащему 0,42 — 0,48 % NaCl, полный же гемолиз (максимальная граница) происходит при концентрации 0,30—0,34 % NaCl.

Причины гемолиза. Гемолиз может быть вызван химическими агентами (хлороформ, эфир, сапонин и др.), разрушающими мембрану эритроцитов. В клинике нередко встречается гемолиз при отравлении уксусной кисло­той. Гемолизирующими свойствами обладают яды некоторых змей {биоло­гический гемолиз).

При сильном встряхивании ампулы с кровью также наблюдается разру­шение мембраны эритроцитов — механический гемолиз. Механический ге­молиз иногда возникает при длительной ходьбе из-за травмирования эрит­роцитов в капиллярах стоп.

Если эритроциты заморозить, а потом отогреть, то возникает термиче­ский гемолиз. Наконец, при переливании несовместимой крови и наличии аутоантител к эритроцитам развивается иммунный гемолиз. Последний яв­ляется причиной возникновения анемий и нередко сопровождается выде­лением гемоглобина и его производных с мочой (гемоглобинурия).

7. Лейкоциты: виды, количество, методики подсчета

Прибор дифференцированного подсчёта лейкоцитов

1. Какие рисунки соответствуют форменным элементам крови?

1.1. Базофил

1.2. Лимфоцит

1.3. Малый лимфоцит

1.4. Моноцит

1.5. Нейтрофил

1.6. Тромбоцит

1.7. Эозинофил

1.8. Эритроцит

2. Как называются показанные на рисунке квадраты камеры Горяева?

В последнее время получили распространение приборы, позволяющие одновременно анализировать до 18 параметров крови, в том числе и ко­личество лейкоцитов, процент гранулоцитов, лимфоцитов и моноцитов, а также их абсолютное количество в 1 мм³, количество тромбоцитов в 1 мм³, средний объем тромбоцита, ширину распределения тромбоцита по объему и тромбокрит (доля объема цельной крови, занимаемой тромбоцитами).

Дифференцированный подсчет перечисленных групп лейкоцитов основан на том, что специальный лизирующий реагент разрушает эритроциты и сжимает лейкоциты. Особенно сильно сжимается цитоплазма лимфоци­тов, в меньшей степени гранулоцитов и еще в меньшей — моноцитов, что отражается на их сопротивлении и регистрируется счетчиком.

Используют автоматизированные счетчики лейкоцитарной формулы. Су­ществует два типа автоматов:

1. системы компьютерного анализа клеточного изображения;

2. проточные системы, идентифицирующие различные формы лейкоцитов по размерам клетки и особенностям окрашивания.

Однако они не спо­собны полностью заменить визуального анализа мазка крови, ибо не су­ществует аппаратов, способных надежно идентифицировать все незре­лые или патологические клетки.

Современные методы определения концентрации гемоглобина основаны на способности этого протеина интенсивно окрашиваться. В качестве на­дежного способа измерения применяется цианметгемоглобиновый метод, в основе которого лежит переход всех известных соединений гемоглобина в устойчивое производное — циангемоглобин. Концентрация гемоглобин-цианида определяется на спектрофотометре при длине волны 540 нм и сравнивается с известным стандартом.

Определение различных органических ингредиентов плазмы производит­ся или фотометрическим, или иммуноферментным методом, с использова­нием меченых антител или антигенов. Концентрация отдельных ингреди­ентов определяется по интенсивности окраски и сравнивается с имею­щимся эталоном.

Состояние сосудисто-тромбоцитарного гемостаза оценивают по времени кровотечения при проколе пальца или мочки уха с регистрацией капли крови на фильтровальной бумаге. Для оценки сосудисто-тромбоцитарного гемостаза внедряют аппаратные методы. Чаще используют фильтрометр, в котором регистрируется скорость блокады микрофильтра агрегатами тром­боцитов при стандартизируемом пропускании через него исследуемой крови.

Исследование агрегации тромбоцитов осуществляют с помощью прибо­ров агрегометров. Принцип их работы основан на фотометрической реги­страции процесса агрегации по падению оптической плотности плазмы. Применяют различные типы агрегометров, соединенных для обработки полученных данных с компьютером, а для записи — с принтером. Сущест­вует стандартный набор агрегирующих агентов (АДФ, коллаген, адрена­лин, тромбин и другие), с помощью которых активируются тромбоциты и запускается процесс агрегации. В последние годы нашли применение аг-регометры, основанные на кондуктометрических принципах склеивания тромбоцитов между собой и пригодные для исследования цельной крови.

[V.G.1]переработать