Методики подсчета эритроцитов

Продолжительность жизни эритроцитов

В кровотоке эритроциты живут от 60 до 120 сут. Продолжительность жизни эритроцитов у мужчин на 10—20 дней больше, чем у женщин.

При старении эритроцита меняются свойства мембраны, а также значи­тельно нарушается обмен катионов с плазмой. В старьгх эритроцитах на­блюдается «сбой» функции антиоксидантной ферментной системы, кото­рая представлена супероксидисмутазой, глутатионпероксидазой и каталазой, что приводит к усилению перекисного окисления липидов и накопле­нию кислых радикалов. При этом мембрана теряет сиаловую кислоту, бла­годаря чему снижается отрицательный заряд эритроцита. При старении эритроцита меняется антигенный состав мембраны, так как демаскируют­ся антигенные детерминанты, благодаря чему старые эритроциты распо­знаются клетками иммунной системы как «чужое». Все эти сдвиги приво­дят к разрушению эритроцита.

До 20 % эритроцитов разрушается в резуль­тате внутрисосудистого гемолиза.

Продукты разрушения эритроцитов принимают непосредственное учас­тие в эритропоэзе. Чем больше погибает эритроцитов, тем больше их об­разуется, благодаря чему количество эритроцитов у здорового человека остается постоянным.

2. Эритроциты: строение, количество, методики подсчета, функции.

Строение

Эритроциты в крови здорового человека преимущественно (до 70 %) имеют форму двояковогнутого диска. Поверхность диска в 1,7 раза боль­ше, чем поверхность тела такого же объема, но сферической формы.

Фор­ма двояковогнутого диска, увеличивая поверхность эритроцита, обеспечи­вает транспорт большего количества различных веществ.

Но главное преи­мущество заключается в том, что форма двояковогнутого диска обеспечи­вает прохождение эритроцита через капилляры. При этом в узкой части эритроцита возникает выпячивание в виде тонкого соска, который и вхо­дит в капилляр и, постепенно суживаясь в широкой части, преодолевает его. Кроме того, эритроцит может перекручиваться в средней узкой части в виде восьмерки, его содержимое из более широкого конца перетекает к центру, благодаря чему он свободно входит в капилляр.

Значитель­ная вариабельность формы эритроцита свидетельствует о нарушении эритропоэза и называется пойкилоцитозом.

Размеры эритроцита

Размеры эритроцита весьма изменчивы, но в большинстве случаев их диаметр равен 7—7,7 мкм, толщина 2 мкм, объем 76—100 мкм, площадь поверхности 140—150 мкм².

В зависимости от диаметра выделяют следующие эритроциты:

• 6-9 мкм – нормоциты

• менее 6 мкм - микроцитами

• более 9 мкм – макроцитами

• более 12 мкм – мегалоциты.

Кривая Прайс-Джонса

Распределение эритроцитов по диаметру называется кривой Прайс-Джонса.

У здоровых людей кривая Прайс-Джонса носит характер нормального распределения.

Увеличение числа малых эрит­роцитов называется микроцитозом, увеличение числа больших эритроцитов – макроцитозом, значительная вариабельность размеров – анизоцитозом.

1 – микроцитоз, 2- макроцитоз, 3 –мегалоцитоз при пернициозной анемии, 4 – анизоцитоз на фоне (жёлтом) нормальной кривой Прайс-Джонса.

Количество эритроцитов

В норме число эритроцитов у мужчин равно 4—5´10¹²/л, или 4 000 000 - 5 000 000 в 1 мкл крови.

У женщин количество эритроцитов меньше и, как правило, не превышает 4,5´10¹²/л.

При беременности число их может до­стигать 3,5´10¹²/л и даже 3,2´10¹²/л .

Содержание эритроцитов в норме подвержено незначительным колеба­ниям. При различных заболеваниях количество эритроцитов может умень­шаться или увеличиваться.

Подобное состояние носит название эритропения. Увеличение числа эритроцитов обозначается как эритроцитоз.

Методики подсчета эритроцитов

Подробнее Учебник 2003 г. С.272-273.

Наиболее точными и менее трудоемкими методами исследования сис­темы крови являются автоматические.

Многие из применяемых в настоя­щее время автоматических счетчиков способны определять не только чис­ло клеток, но и другие гематологические показатели.

Электронные счетчи­ки могут анализировать значительное количество проб крови.

Наиболее часто для определения числа кле­ток крови используются кондуктометрические счетчики (рис. 711291248), принцип работы которых сводится к подсчету клеток путем пропускания их суспензии че­рез отверстие малого диаметра (апертуру) и изменения электрического со­противления, вызванного прохождением клеток.

Рис. 711291248. Принцип работы кондуктометрического (проточного) счетчика.

Для подсчета различных форменных элементов крови пользуются разными по размеру апертурами. Более того, при подсчете лейкоцитов и тромбоцитов необходимо предва­рительно лизировать эритроциты. Существуют более современные кондук­тометрические счетчики, в которых подсчет эритроцитов и тромбоцитов проводится одновременно.

Счетная камера Горяева

Подсчитайте количество эритроцитов в малом квадрате камеры Горяева[V.G.1] .

Автоматические счётчики эритроцитов делятся на два типа: планшетные и проточные.

3. Гемоглобин: строение, свойства, количество в крови, методики определения.

Основные функции эритроцитов обусловлены наличием в их составе белка хромопротеида — гемоглобина.

Мол. масса гемоглобина человека равна 68 800. Гемоглобин состоит из белковой (глобин) и железосодержа­щей (гем) частей; на одну молекулу глобина приходится 4 молекулы гема.

В крови здорового человека содержание гемоглобина составляет 120— 165 г/л (120—150 г/л у женщин, 130—160 г/л у мужчин). У беременных со­держание гемоглобина может понижаться до 110 г/л.

Основные функции гемоглобина:

• транспорт О₂ и СО₂ (дыхательных газов)

• буфер

• связывание токсичных веществ

Гемоглобин человека и различных животных имеет разное строение. Это касается белковой части — глобина, а гем у всех представителей жи­вотного мира имеет одну и ту же структуру.

Гем состоит из молекулы порфирина, в центре которой расположен ион Fe²⁺, способный присоеди­нять О₂. Структура белковой части гемоглобина человека неоднородна, благодаря чему белковая часть разделяется на ряд фракций.

Большая часть гемоглобина взрослого человека (95—98 %) состоит из фракции А (от лат. adultus — взрослый); от 2 до 3 % всего гемоглобина приходится на фрак­цию А₂; наконец, в эритроцитах взрослого человека находится так называ­емый фетальный гемоглобин (от лат. foetus — плод), или гемоглобин F, содержание которого в норме редко превышает 1—2 %. Гемоглобины А и А₂ обнаруживают практически во всех эритроцитах, тогда как гемоглобин F присутствует в них не всегда.

Гемоглобин F содержится преимущественно у плода. К моменту рожде­ния ребенка на его долю приходится 70 — 90 %. Гемоглобин F имеет боль­шее сродство к О₂, чем гемоглобин А, что позволяет тканям плода не ис­пытывать гипоксии, несмотря на низкое напряжение кислорода в его кро­ви. Эта приспособительная реакция объясняется тем, что гемоглобин F труднее вступает в связь с 2,3-дифосфоглицериновой кислотой, которая уменьшает способность гемоглобина переходить в оксигемоглобин, а сле­довательно, и обеспечивать легкую отдачу О₂ тканям.

Кроме так называе­мых нормальных, существуют более 300 аномальных гемоглобинов, встре­чающихся при различных заболеваниях системы крови. Все они отличают­ся друг от друга строением глобина.

Гемоглобин обладает способностью образовывать соединения с О2, СО2 и СО. Гемоглобин, присоединивший О2, называется оксигемоглобин (ННbО2); гемоглобин, отдавший О2, называется восстановленным, или pe­дуцированньм гемоглобином (ННb). В артериальной крови преобладает содержание оксигемоглобина, от чего ее цвет приобретает алую окраску. В венозной крови до 35 % всего гемоглобина приходится на ННЬ. Кроме того, часть гемоглобина через аминную группу связывается с СО₂, обра­зуя карбогемоглобин (ННb СО₂), благодаря чему переносится от 10 до 20% всего транспортируемого кровью СО2.

Виды гемоглобина в зависимости от состояния гема и глобина:

• оксигемоглобин (НbО₂) — присоединивший четыре мо­лекулы О₂ (в артериальной крови -98 %, в венозной -65 %).

• дезоксигемоглобин (ННb)— гемоглобин, отдавший кис­лород (в артериальной крови ~2 %, в венозной -35 %);

• метгемоглобин (MetHb) — имеет окисленные атомы же­леза (Fe³⁺), не присоединяющие О₂ (в норме менее 3 %).

• карбгемоглобин (НbСО₂) — присоединяет СО₂ к глоби­ну (находится в венозной крови);

• карбоксигемоглобин (НbСО) — СО имеет сродство к Нb в 240 раз выше, чем О₂, и блокирует присоединение О₂ (например, если в крови Рсо = 0,5 мм рт. ст., то 50 % гемо­глобина будет связано с СО);