Значение своевременого и адекватного взятия материала для микробиологических исследований. Меры предосторожности при сборе и транспортировки исследуемого материала.
Значение своевременного и адекватного взятия материала для микробиологических исследований:
Цель микробиологического исследования – установить этиологическую роль тех или иных микроорганизмов при возникшем заболевании или клиническом синдроме. Среди факторов, влияющих на достоверность микробиологической диагностики, можно выделить следующие условия взятия и транспортировки биологического материала: адекватный выбор методов микробиологического исследования; полноценность сведений о состоянии обследуемого пациента, важных с точки зрения оценки полученных результатов.
Меры предосторожности при сборе и транспортировке исследуемого материала:
Правила работы в базовой лаборатории включают: запрет работ с пипеткой при помощи рта; запрет приема пищи, питья, курения, хранения пищи и применения косметических средств в рабочих помещениях; поддержание чистоты и порядка; дезинфекцию рабочих поверхностей не реже 1 раза в день и после каждого попадания на них заразного материала; мытье рук персоналом после работы с заразным материалом, животными, перед уходом из лаборатории; проведение всех работ таким образом, чтобы свести к минимуму возможность образования аэрозоля; обеззараживание всех инфицированных материалов перед выбросом или повторным использованием.
Правила взятия исследуемого материала: знание оптимальных сроков для взятия материала на исследование; взятие материала с учетом места максимальной локализации возбудителя путем его выделения в окружающую среду; отбор материала для исследования в необходимом и достаточном объеме с обеспечением условий, исключающих контаминацию проб; по возможности взятие материала до применения антибиотиков и других химиотерапевтических препаратов или после отмены антибиотиков через 2 – 3 дня. Материал доставляется в контейнерах, исключая их опрокидывание. При транспортировке не допускаются смачивание ватных пробок и замораживание материала. Материал поставляется в течение 1 – 2 ч после взятия. При невозможности доставки в указанные сроки биоматериал хранят в холодильнике (кроме крови и материала, исследуемого на наличие менингококка). При увеличении времени доставки проб до 48 ч необходимо использовать транспортные среды.
Собранный материал должен быть доставлен в лабораторию и подвергнут исследованию в максимально сжатые сроки, поскольку некоторые микробы не выдерживают высушивания, длительного пребывания при измененном температурном режиме (гонококки, менингококки). К тому же если исследуемый материал наряду с патогенными микробами содержит и другую микрофлору, то последняя может оказать антагонистическое действие на возбудителей данного заболевания.
Для взятия и транспортировки биологического материала следует использовать одноразовые стерильные тубсеры (пробирки с тампонами) промышленного производства или транспортные системы со средой. Ватные (хлопковые) тампоны, изготовляемые непосредственно в лаборатории из медицинской ваты, могут быть использованы только в крайнем случае, так как медицинская вата может обладать антимикробными свойствами.
75.Посуда,инструменты и химические реагенты, используемые для сбора материала, их перечень,подготовка к работе,утилизация.
Исследуемый материал должен соответствовать месту локализации инфекционного процесса (мокрота при пневмонии, кровь при сепсисе, испражнения при дизентерии). Для обеспечения тщательного исследования материал должен быть собран в достаточном количестве. Для микробиологических исследований необходима различная стеклянная посуда. Чашки Петри (диаметр 10 см, высота 1,5 см) применяют для выделения чистых культур, количественного учета микроорганизмов, анализа качественного состава микрофлоры на плотных питательных средах и других исследований; стеклянные поплавки – для изучения процессов брожения; пробирки биологические – для хранения чистых культур и проведения микробиологических исследований; пастеровские пипетки с оттянутым капилляром. Кроме специальной посуды широко используют обычную химическую посуду: колбы плоскодонные конические Эрленмейера, круглодонные, мерные, пипетки, градуированные на 1 мл, пипетки Мора, мензурки, мерные цилиндры, бюксы, склянки и т.д.
Колбы и пробирки, используемые для приготовления и стерилизации питательных сред и выращивания микроорганизмов, закрывают ватно-марлевыми пробками, которые изготовляют вручную или при помощи специальной машины. Правильно изготовленная пробка для пробирок должна иметь длину 3 – 4 см, умеренно туго входить в пробирку, быть плотной и не менять своей формы при многократном применении. В микробиологической практике применяют петли, иглы, пинцеты, ножницы, пластмассовые и металлические штативы для пробирок, металлические лотки и др. Петли и иглы изготовляют из платиновой, никелевой или хромоникелевой проволоки и закрепляют в металлическом петледержателе.
Для лабораторных исследований в микробиологии используются специальные химические реактивы – реагенты. В процессе всестороннего изучения микроорганизмов применяют реагенты для окраски мазков по Граму, различные реактивы для биохимической идентификации бактерий, наборы реагентов. Окрашивание мазков может производиться с помощью широкого спектра красителей: метиленовый синий, основной фуксин Циля, карболовый генциан‒виолет, реагенты для окраски по способу Ожешки, по Нейссеру, по Цилю-Нильсену, по Гинсу. биохимическую идентификацию патогенных и условно‒патогенных микроорганизмов позволяют проводить следующие реагенты: реактив Эрлиха, раствор Люголя, реагенты для определения цитохромоксилазы, лизиндекарбоксилазы, аргининдигидролазы, уреазы, каталазы и другие.