Определение рН при помощи лакмусовой бумаги следует проводить одновременно двумя ее видами — синей и красной.

Трактовка результатов следующая:

· если синяя лакмусовая бумага краснеет, а красная не изменяет своего цвета — реакция кислая;

· если красная лакмусовая бумага синеет, а синяя не изменяет своего цвета — реакция щелочная;

· если же оба вида бумаги не меняют своего цвета — реакция мочи нейтральная.

Моча здоровых взрослых людей при обычном питании имеет средние значения рН от 5,0 до 7,0.

Длительный сдвиг реакции мочи в сторону кислой или щелочной реакции является неблагоприятным фактором. При постоянно кислой реакции выпадают ураты, мочевая кислота, что может привести к образованию уратных и мочекислых камней. При постоянно щелочной реакции могут образоваться фосфатные камни.

Белок у здоровых людей практически не содержится. Почечная протеинурия может возникнуть вследствие поражения почек (органическая) и без него (функциональная). Патологическая ренальная протеинурия встречается при нефрозах, нефритах, нефросклерозах, амилоидном поражении почек. Кроме того, она наблюдается при артериальной гипертензии с развитием первично-сморщенной почки; нефропатии беременных; заболеваниях, сопровождающихся лихорадкой, недостаточности кровообращения, отравлениях, воспалительных заболеваниях мочевыводящих путей и др.

К функциональным протеинуриям относятся случаи временного появления белка в моче, не связанных с каким-либо заболеванием: после значительных физических напряжений, переохлаждений, эпилептических приступов и др.

Внепочечная протеинурия обычно вызывается белковыми примесями, которые попадают в мочу при заболеваниях мочевых путей и половых органов.

Выделение с мочой глюкозы называется глюкозурией. В нормальной моче содержаться незначительные следы сахара, практически не обнаруживаемые обычными качественными реакциями на сахар. В патологических условиях глюкозурия появляется при повышении уровня сахара в кроки свыше 16-18г/л. Причина глюкозурии – ограниченная способность канальцев реабсорбировать глюкозу. Кетонурия – выделение с мочой большого количества кетоновых тел (ацетон, ацетоуксусная кислота). В норме выделяемое количество кетоновых тел не обнаруживается. В патологии встречается при сахарном диабете, голодании, дизентерии, продолжительных желудочно-кишечных расстройствах.

Выявляют несколько видов протеинурии (появление белка в моче):

· физиологическая (ортостатическая, после повышенной физической нагрузки, переохлаждении);

· клубочковая (гломерулонефрит, действие инфекционных и аллергических факторов, гипертоническая болезнь, декомпенсация сердечной деятельности);

· канальцевая (амилоидоз, острый канальцевый некроз, интерстициальный нефрит, синдром Фанкони).

· преренальная (миеломная болезнь, некроз мышечной ткани, гемолиз эритроцитов);.

· постренальная (при циститах, уретритах, кольпитах).

Билирубин

Билирубин в норме в моче отсутствует. Билирубинурия выявляется при паренхиматозных поражениях печени (гепатиты), механической желтухе, циррозах, холестазе, в результате действия токсических веществ.

Кетоновые тела

· К кетоновым телам относятся ацетон, ацетоуксусная и бета-оксимаслянная кислоты. Увеличение выделения кетонов с мочой (кетонурия) появляется при нарушении углеводного, липидного или белкового обмена.

Нитриты

· Нитриты в нормальной моче отсутствуют. В моче они образуются из нитратов пищевого происхождения под влиянием бактерий, если моча не менее 4 часов находилась в мочевом пузыре. Обнаружение нитритов в правильно хранившихся образцах мочи свидетельствует об инфицировании мочевого тракта.

Уробилинявляется производным билирубина. Общепринятые в лабораториях пробы на уробилин дают отрицательный или слабоположительный результат. Увеличение уробилина наблюдается при недостаточности печеночной паренхимы, гемолитической анемии, после ликвидации механического препятствия оттоку желчи.

Гемоглобинурия – выделение с мочой гемоглобина при отсутствии эритроцитов. Истинная гемоглобинурия встречается при отравлениях уксусной кислотой, сульфаниламидными препаратами, после переливания несовместимой крови и др.

Фермент альфа-амилаза вырабатывается в поджелудочной и слюнных железах. Увеличение активности амилазы в моче наблюдается при заболеваниях поджелудочной железы, перфоративных язвах желудка и 12-перстной кишки.

Присутствие эпителиальных клеток в моче в небольшом количестве свидетельствует о слущивании эпителия слизистой оболочки мочевыводящих путей, что чаще всего наблюдается при воспалительных процессах, травмах и большого диагностического значения не имеет.

Слизь в норме почти не содержится, чаще проявляется при заболеваниях мочевыводящих путей (уретриты, простатиты, циститы, мочекаменная болезнь).

Микроскопия осадка мочи

Микроскопия мочевого осадка включает оценку следующих объектов:

· Организованный осадок мочи:

o присутствие эритроцитов;

o лейкоцитов;

o эпителиальных клеток;

o цилиндров;

o бактерии;

o дрожжевых грибов;

o паразиты;

o опухолевые клетки;

· Неорганизованный осадок мочи (кристаллы и аморфные соли).

Методы исследования

Исследование проводят визуально в нативном препарате с использованием микроскопа. Кроме визуального микроскопического исследования, применяется исследование с помощью автоматических и полуавтоматических анализаторов.

Эритроциты

За сутки с мочой выделяется 2 млн. эритроцитов, что при исследовании осадка мочи составляет в норме 0–3 эритроцита в поле зрения для женщин и 0–1 эритроцит в поле зрения у мужчин. Гематурией называют увеличение эритроцитов в моче выше указанных значений. Выделяют макрогематурию (изменен цвет мочи) и микрогематурию (цвет мочи не изменен, эритроциты обнаруживаются только при микроскопии).

В мочевом осадке эритроциты могут быть неизмененные (содержащие гемоглобин) и измененные (лишенные гемоглобина, выщелоченные). Свежие, неизмененные эритроциты характерны для поражения мочевыводящих путей (цистит, уретрит, прохождение камня).

Появление в моче выщелоченных эритроцитов имеет большое диагностическое значение, т.к. они чаще всего имеют почечное происхождение и встречаются при гломерулонефритах, туберкулезе и других заболеваниях почек. Для определения источника гематурии применяют трехстаканную пробу. При кровотечении из уретры гематурия бывает наибольшей в первой порции (неизмененные эритроциты), из мочевого пузыря – в последней порции (неизмененные эритроциты). При других источниках кровотечения эритроциты распределяются равномерно во всех трех порциях (выщелоченные эритроциты).

Лейкоциты

Лейкоциты в моче здорового человека содержатся в небольшом количестве. Норма для мужчин 0–3, для женщин и детей 0–6 лейкоцитов в поле зрения.

Увеличения числа лейкоцитов в моче (лейкоцитурия, пиурия) в сочетании с бактериурией и наличием клинических симптомов свидетельствует о воспалении инфекционной природы в почках или мочевыводящих путях.

Эпителиальные клетки

В мочевом осадке практически всегда встречаются клетки эпителия. В норме в анализе мочи не больше 10 эпителиальных клеток в поле зрения.

Эпителиальные клетки имеют различное происхождение:

· клетки плоского эпителия попадают в мочу из влагалища, уретры, их наличие особого диагностического значения не имеет;

· клетки переходного эпителия выстилают слизистую оболочку мочевого пузыря, мочеточников, лоханок, крупных протоков предстательной железы. Появление в моче большого количества клеток такого эпителия может наблюдаться при мочекаменной болезни, новообразованиях мочевыводящих путей и воспалении мочевого пузыря, мочеточников, лоханок, крупных протоков предстательной железы;

· клетки почечного эпителия выявляются при поражении паренхимы почек, интоксикациях, лихорадочных, инфекционных заболеваниях, расстройствах кровообращения.

Цилиндры

Цилиндр – белок, свернувшийся в просвете почечных канальцев и включающий в состав своего матрикса любое содержимое просвета канальцев. Цилиндры принимают форму самих канальцев (слепок цилиндрической формы). В норме в пробе мочи, взятой для общего анализа цилиндры отсутствуют. Появление цилиндров (цилиндрурия) является симптомом поражения почек.

Различают цилиндры:

· гиалиновые (с наложением эритроцитов, лейкоцитов, клеток почечного эпителия, аморфных зернистых масс);

· зернистые;

· восковидные;

· пигментные;

· эпителиальные;

· эритроцитарные;

· лейкоцитарные;

· жировые.

Неорганизованный осадок

Основным компонентом неорганизованного осадка мочи являются соли в виде кристаллов или аморфных масс. Характер солей зависит от рН мочи и других свойств мочи. Например, при кислой реакции мочи обнаруживаются мочевая кислота, ураты, оксалаты, при щелочной реакции мочи – кальций, фосфаты, мочекислый аммоний. Особого диагностического значения неорганизованный осадок не имеет, косвенно можно судить о склонности пациента к мочекаменной болезни. При ряде патологических состояний в моче могут появляться кристаллы аминокислот, жирных кислот, холестерина, билирубина, гематоидина, гемосидерина и т.д.

Появление в моче лейцина и тирозина говорит о выраженном расстройстве обмена веществ, отравлении фосфором, деструктивном заболевании печени, пернициозной анемии, лейкозе.

Цистин – врожденное нарушение цистинового обмена – цистиноз, цирроз печени, вирусный гепатит, состояние печеночной комы, болезнь Вильсона (врожденный дефект обмена меди).

Ксантин – ксантинурия обусловлена отсутствием ксантиноксидазы.

Бактерии

В норме моча в мочевом пузыре стерильна. При мочеиспускании в нее попадают микробы из нижнего отдела уретры.

Появление в общем анализе мочи бактерий и лейкоцитов на фоне симптомов (дизурия или лихорадка) свидетельствует о клинически проявляющейся мочевой инфекции.

Наличие в моче бактерий (даже в сочетании с лейкоцитами) при отсутствии жалоб расценивается как бессимптомная бактериурия. Бессимптомная бактериурия повышает риск инфекции мочевых путей, особенно при беременности.

Дрожжевые грибы

Обнаружение грибов рода Саndida свидетельствует о кандидамикозе, возникающего чаще всего в результате нерациональной антибиотикотерапии, приеме иммуносупрессоров, цитостатиков.

Паразиты

В осадке мочи могут быть обнаружены яйца кровяной шистосомы (Schistosoma hematobium), элементы эхинококкового пузыря (крючья, сколексы, выводковые капсулы, обрывки оболочки пузыря), мигрирующие личинки кишечной угрицы (стронгилиды), смываемые мочой с промежности онкосферы тениид, яйца острицы (Enterobius vermiсularis) и патогенные простейшие – трихомонады (Trichomonas urogenitalis), амебы (Entamoeba histolitika – вегетативные формы).

Определение глюкозы в моче

В норме глюкоза в моче отсутствует. Появление глюкозы в моче может иметь несколько причин:

· физиологическая (стресс, прием повышенного количества углеводов);

· внепочечная (сахарный диабет, панкреатит, диффузные поражения печени, рак поджелудочной железы, гипертиреоз, болезнь Иценко-Кушинга, черепно-мозговые травмы, инсульты);

· ренальная (почечный диабет, хронические нефриты, острая почечная недостаточность, беременность, отравление фосфором, некоторыми лекарственными препаратами).

Определение глюкозы в моче

Качественные пробы

Большинство качественных проб, применяемых для определения глюкозы в моче, основано на редукционных свойствах альдегидной группы глюкозы. В качестве окислителя используют какую-либо легко редуцирующуюся соль, дающую при восстановлении окрашенное соединение. К таковым методам относят пробу Фелинга, Гайнеса, Ниландера, Бенедикта, глюкозооксидазную пробу.

Глюкозооксидазная (нотатиновая) проба

В основе метода лежит окисление глюкозы ферментом глюкозооксидазой (нотатином). Образующаяся при этом перекись водорода расщепляется другим ферментом (пероксидазой) и окисляет красительиндикатор (производное бензидина), изменяя его окраску. Для определения глюкозы в моче индикаторную бумажку «Глюкотест» погружают в испытуемую мочу на 1–2 сек так, чтобы нанесенная на бумажку желтая полоса полностью смочилась. Через 2 мин ориентировочно определяют концентрацию глюкозы в моче путем сравнения интенсивности окраски цветной полосы с цветной шкалой, имеющейся в стандартном наборе. Необходимо помнить, что при очень высокой глюкозурии (более 2 %) интенсивность окраски цветной полосы не меняется. Индикаторную бумагу следует хранить в плотно закрытом пенале, в темном прохладном месте (но не в холодильнике!).

Проба Гайнеса

Реакция основана на свойстве глюкозы восстанавливать гидрат окиси меди в щелочной среде (синего цвета) в гидрат закиси меди (желтого цвета), а затем в закись меди (красного цвета). Чтобы из гидрата окиси меди при нагревании не образовался черный осадок меди, к реактиву добавляют глицерин, гидроксильные группы которого связывают гидрат окиси меди.

Реактив Гайнеса готовят следующим образом:

1) 13,3 г х. ч. кристаллического сульфата меди (CuSO4 · 5H2O) растворяют в 400 мл воды;

2) 50 г едкого натра растворяют в 400 мл воды;

3) 15 г ч. или ч. д. а. глицерина разводят в 200 мл воды. Смешивают 2-й и 1-й растворы и тотчас приливают 3-й. Реактив стойкий.

Пробу проводят в следующем порядке: к 3–4 мл реактива прибавляют 8–12 капель мочи до появления голубоватой окраски. Смешивают и нагревают верхнюю часть пробирки до начала кипения над пламенем газовой горелки или спиртовки. Нижняя часть пробирки является контролем. При наличии глюкозы в моче наблюдается ясный переход цвета из бледно-голубого в желтый.

Проба Гайнеса является надежной, так как при большом разведении мочи (8–12 капель мочи и 3–4 мл реактива) восстанавливающее действие других редуцирующих веществ мочи (мочевая кислота, индикан, креатин, желчные пигменты), а также некоторых лекарственных веществ (ацетилсалициловая кислота, кофеин, ПАСК) выражено слабо. Наличие большого количества белка в моче мешает правильной оценке редукционных проб, поэтому желательно предварительно его удалить, подкислив мочу несколькими каплями уксусной кислоты, нагрев до кипения и отфильтровав.

Количественные методы

Колориметрический метод определения глюкозы в моче по Альтгаузену

Принцип метода: при нагревании глюкозы со щелочью появляется цветная реакция. Техника определения: К 4 мл мочи приливают 1 мл 10% натра едкого и кипятят 1 мин. Через 10 мин после кипячения цвет жидкости сравнивают с цветной шкалой, на которой возле каждой окрашенной полосы указан процент содержания глюкозы. Лучше пользоваться шкалой, приготовленной с помощью реактивов. Для этого берут 0,5; 1,0; 1,5; 2,0; 3,0 и 4,0% растворы глюкозы, обрабатывают их так же, как и исследуемую пробу мочи и плотно закрывают пробками. Цвет этих растворов не меняется примерно 10 дней.

Метод Альтгаузена дает ориентировочные результаты и поэтому им можно пользоваться при отсутствии поляриметра. Исключительной простотой выполнения отличается модифицированный метод Альтгаузена, который не требует дефицитных реактивов и занимает мало времени.

Принцип модифицированного метода Альтгаузена: при нагревании мочи, содержащей глюкозу, с раствором едкой щелочи изменяется цвет содержимого пробирки.

Техника определения:

4 мл исследуемой мочи смешивают с 1 мл 10% раствора едкого натра и ставят в кипящую водяную баню на 3 мин. Через 10 мин пробу колориметрируют на ФЭКе с зеленым светофильтром в кювете с рабочей шириной 5 мм. В качестве контроля берут воду. Количество сахара в моче находят по калибровочной кривой, для построения которой готовят 8% стандартный раствор глюкозы, из которого затем необходимо приготовить на прозрачной моче с низкой относительной плотностью 1,0; 1,5; 2,0; 2,5; 3,0; 3,5; 4,0; 4,5; 5,0% растворы глюкозы по схеме, представленной в табл. 9: из каждого разведения берут по 4 мл раствора, добавляют по 1 мл 10% раствора едкого натра и обрабатывают как опытные пробы. Определяют оптическую плотность в каждом соответствующем разведении и строят график. Для удобства работы по графику составляют таблицу. Следует помнить, что мочу перед определением глюкозы необходимо перемешать и при высоких концентрациях глюкозы в пробе (4–5 %) ее необходимо развести.

Цветная реакция с ортотолуидином

Основана на том, что глюкоза при нагревании с реактивом ортотолуидин дает окрашенное соединение, степень окраски которого про- порциональна концентрации. Для проведения пробы приготовляют ортотолуидиновый реактив (в 94 мл ледяной уксусной кислоты растворяют 0,15 г тиомочевины и добавляют 6 мл ортотолуидина) и стандартный раствор глюкозы. Мочу разводят в 2–10 раз в зависимости от характера качественной пробы. 0,1 мл разведенной мочи смешивают с 4,5 мл ортотолуидинового реактива, помещают на 8 мин в кипящую водяную баню, после чего сразу охлаждают до нормальной (комнатной) температуры. Полученный цветной раствор колориметрируют на ФЭКе при длине волны 590– 650 нм (оранжевый или красный светофильтр) против контроля, который ставят также, но вместо мочи берут стандартный раствор глюкозы. Наличие белка в моче не мешает определению глюкозы данным методом, поэтому он является предпочтительным.

Поляриметрический способ определения глюкозы в моче

Поляриметрический способ позволяет определить процент глюкозы в моче при помощи так называемого сахариметра. Принцип определения основан на том, что глюкоза, находящаяся в растворе, вращает плоскость поляризованного света пропорционально содержанию глюкозы в растворе. Перед определением необходимо отметить препараты тетрациклина, экскретируемые с мочой и искажающие результаты за счет дополнительной оптической активности. Для исследования мочу необходимо освободить от белка и профильтровать. Если моча после фильтрования остается мутной, то используют адсорбент. Трубку поляриметра заполняют просветленной мочой, накрывают шлифованным стеклышком, плотно завинчивают, насухо вытирают и помещают в аппарат. По интенсивности затемнения правой половины поля зрения поляриметра определяют угол отклонения поляризованного луча, что выражается в градусах шкалы прибора. Угол отклонения в 1° соответствует 1 % глюкозы (при длине трубки 18,94 см).

Этот метод на сегодняшний день используется редко, так как имеет ряд недостатков: субъективен (индивидуальное восприятие освещения), достаточно трудоемок и дает неточные результаты, если не достигнута полная прозрачность мочи.