Тема: Спиртовое брожение. Обмен галактозы и фруктозы.

Теоретические вопросы:

  1. Схема включения фруктозы в процесс гликолиза в печени, сердце, мышцах. Фруктозурия и причины.
  2. Схема включение галактозы в процесс гликолиза. Галактоземия, причина.
  3. Спиртовое брожение: пируватдекарбоксилазная и алкогольдегидрогеназная реакции.
  4. Глюконеогенез - биосинтез глюкозы из неуглеводов
  5. а) реакции образования фосфоенолпирувата из пирувата,
  6. б) механизм транспорта оксалоацетата из митохондрии в цитоплазму,
  7. в) обходные реакции глюконеогенеза с участием специфических ферментов.

8. Контрольная работа по гликолизу, синтезу и распаду гликогена.

ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА:

1.Количественное определение концентрации глюкозы в крови глюкозооксидазным методом.

ХОД работы: Определение без депротеинирования – без осаждения белков анализируют сыв. и плазму крови, мочу.

Приготовить опытную пробу по след схеме:

Компоненты в мл опытная
Рабочий р-р реактивов 2,0
Исследуемый образец 0,02

Перемешать и выдержать в теч. 20 мин. при 37 0С. Через 15 мин после начала

инкубации содержимое пробирки вновь перемешать. Раствор следует предохранять

от прямого действия света. Измерить оптич. плотность раствора опытной пробы против дист.

воды при длине волны 500-560 нм кюветы 0,5см.

Еп

Расчет по формуле: С=--------х 10,0

Ек

Где. ЕП-оптич: плотность исслед. пробы.

ЕК-оптич: плотность калибров. пробы, Ек=0,5

10,0 – сод.глюкозы в ммоль/ л, калибратр

Нормальные величины: в цельной крови, натощак- 3,4- 5,5 ммоль/л

в сыв. плазме - 4,2- 6,1 ммоль/л

Литература:

1. Алдашев А.А. и соавт., Биохимия человека, Бишкек, 2013 г стр. 141-171.

2. Комов В.П., Шведова В.Н. Биохимия. – М.: Дрофа, 2008. стр. 222-254.

3. БерезовТ.Т., Коровкин Б.Ф., Биологическая химия. – М.: «Медицина»,

1990,стр. 177-191, 222-267, 2007, стр. 319-359

4. Николаев А.Я. Биохимия , 1989, стр. 368-379, 2004, стр. 380-386, 404-41

5. Лекции

Занятие-15 пед-2017г

Тема: Аэробный метаболизм пирувата. Цикл Кребса. Челночные механизмы.

Теоретические вопросы:

1.Строение пируватдегидрогеназного мультиферментного комплекса: ферменты и коферменты,

их локализация в клетке.

2. Механизм окислительного декарбоксилирования пирувата, конечные продукты.

3. Цикл Кребса, биологическое значение. Последовательность реакций окисления ацетил-КоА.

Субстратное фосфорилирование в цикле Кребса, его значение.

4. Глицерофосфатный и малатаспартатный челночный механизмы, их биороль.

5. Полный энергетический эффект окисления глюкозы до СО2 и Н2О в печени, сердце и

мышцах.

Практическая работа:

Качественные реакции на субстраты цикла Кребса.

Ход работы:в пробирку вносят несколько кристаллов лимонной кислоты, во вторую – несколько кристаллов янтарной кислоты /сукцината/ в каждую пробирку + по 1кап. дист. воды, затем в каждую пробирку + по 10-12 кап Н2SO4 концентрированной

после чего + несколько кристаллов резорцина, пробирки осторожно нагреть на водяной бане – появляются окрашенные продукты, к охлажденным растворам + по 10кап. дист. воды и наблюдаем флюоресценцию в ультрафиолетовых лучах: лимонная кислота дает голубое свечение, янтарная- зеленое.

Литература:

1.Алдащев А.А. и соавторы. Биохимия человека, Бишкек, 2013. С.141-171.

2. Комов В.П., Шведова В.Н. Биохимия. – М.: Дрофа, 2008. стр.239-271

3. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. – М.: «Медицина»,

1990,стр. 177-191, 222-267, 2007,стр. 319-359

4. Николаев А.Я. Биологическая химия.- М., 2004, с. 225-234, 1989, стр.232-299

5. Лекции

Занятие-16 пед- 2017год.

Тема: Глюконеогенез. Пентозофосфатный путь окисления глюкозы -6фосфат.

Лактатный и глюкозоаланиновый циклы. Регуляция и патология углеводного обмена.

1. Пентозо - фосфатный путь окисления глюкозы (реакции окислительной стадии).

Биологическое значение пентозного окисление.

2. Взаимосвязь между процессами гликолиза в мышцах и глюконеогенеза в печени

лактатный и глюкозо – аланиновый циклы, их значение.

3. Регуляция углеводного обмена.

4. Патология углеводного обмена.

5. Контрольная работа по окислению пирувата и ц. Кребса.

Практическая работа:

Качественные реакции на пентозы.

1. Рибозу / дезоксирибозу / - дифениламин с d- рибозой дает синее окрашивание, а с рибозой -

зеленое

Ход раб:10 кап. раствора пентозы + 20 кап раствора орцина и кипятят в водяной бане в

течение 15 мин.- образуется сине- зеленое окрашивание.

2. Реакция с альфа- нафтолом/

Ход раб: к 10 кап. раствора пентозы + 5кап. 0,2% спиртового раствора альфа - нафтола + 20 кап.

H2SO4 конц. (осторожно наслаивать ) – появляется розово-фиолетовое

окрашивание (кольцо)

Наши рекомендации