Таксономия боррелий, лептоспир и трепонем, и названия заболеваний, вызываемых ими.

Семейство:Spirochaetaceae

Род: Borrelia

Вид: B. recurrentis – возбудитель эпидемического возвратного тифа.

Род: Treponema

Вид: T. pallidum - возбудитель сифилиса

Род: Leptospira

Вид: L. Icterohaemorrhagiae – возбудитель лептоспироза

Микроскопическая диагностика сифилиса.

Темнопольная микроскопия: перед исследованием берут тканевую жидкость со дна язвы или пунктат лимфатического узла. Готовят препарат раздавленной капли: на середину предметного стекла наносят каплю исследуемого материала, каплю накрывают покровным стеклом так, чтобы не было пузырьков воздуха. Положительный результат: при микроскопии обнаруживаются трепонемы с равномерными 8-12 крупными завитками. Для них характерны плавные вращательно-поступательные, маятникообразные и сгибательные движения.
При окраске по Романовскому-Гимзе: возбудитель сифилиса окрашивается в бледно-розовый цвет, другие трепонемы – в красновато-фиолетовый.

Реакции, используемые в серодиагностике сифилиса. Общая характеристика каждой из них.

РСК (реакция Вассермана): Компоненты: 1 система – сыворотка больного, диагностикум, комплемент, ИХН; 2 система – гемолитическая сыворотка и взвесь эритроцитов барана. Готовят 1 систему, инкубируют 37С 1 ч. Добавляют вторую, инкубируют 37С 1 ч. Положительный результат – отсутствие гемолиза.

РПГА: Компоненты: ИХН, сыворотка больного, эритроцитарный диагностикум. Готовят разведения сыворотки, добавляют диагностикум, в термостат 24 ч 37С. Пол.результат: зонтик.

ИФА: Компоненты: сыворотка больного, диагностикум, конъюгат, хромогенный субстрат. Связывают диагностикум с пластиком лунки планшета, вносят разведенную сыворотку, конъюгат и субстрат. Пол.результат: изменение окраски субстрата.

Непрямая РИФ: на предметное стекло наносят АГ – бледные трепонемы (штамм Никольса). Мазки высушивают на воздухе и фиксируют в ацетоне 5 минут. Сыворотку больного истощают взвесью непатогенных трепонем штамма Рейтера или разводят 1:200, затем наносят на приготовленные препараты. Выдерживают во влажной камере при 35С 30 мин (1 фаза). Мазки промывают 10 минут в ИХН и высушивают. Далее наносят на препарат каплю флюоресцирующей сыворотки против глобулина человека и инкубируют во влажно камере при комнатной температуре 30 мин (2 фаза). Мазки промывают ИХН, высушивают. Просматривают в люминесцентном микроскопе. Положительная реакция: зеленое свечение.

Реакция флоккуляции на стекле: плазму крови или непрогретую сыворотку смешивают с неспецифическим липидным антигеном в течение нескольких минут на предметном стекле. Положительный результат: под малым увеличением видны укрупненные частицы антигена (флоккулят).

Серодиагностика сифилиса с использованием РПГА.

Компоненты: ИХН, сыворотка больного, эритроцитарный диагностикум. Готовят разведения сыворотки, добавляют диагностикум, в термостат 24 ч 37С. Пол.результат: зонтик.

5. Серодиагностика сифилиса с использованием ИФА.

Компоненты: сыворотка больного, диагностикум, конъюгат, хромогенный субстрат. Связывают диагностикум с пластиком лунки планшета, вносят разведенную сыворотку, конъюгат и субстрат. Пол.результат: изменение окраски субстрата.

6. Серодиагностика сифилиса с использованием РСК.

Реакция Вассермана: можно использовать сыворотку крови больного и спинномозговую жидкость (на стадии нейросифилиса). В качестве диагностикума – трепонемный или кардиолипиновый антиген. Компоненты: 1 система – сыворотка больного, диагностикум, комплемент, ИХН; 2 система – гемолитическая сыворотка и взвесь эритроцитов барана. Готовят 1 систему, инкубируют 37С 1 ч. Добавляют вторую, инкубируют 37С 1 ч. Положительный результат – отсутствие гемолиза.

Кардиолипиновый антиген.

Кардиолипиновый антиген для реакции Вассермана представляет собой очищенный от балластных примесей спиртовый экстракт липидов из мышц бычьего сердца. Активность антигена обусловливается присутствием трех компонентов - фосфолипида, лецитина и холестерина.

Перед употреблением антиген из ампулы переносят в сухую чистую пробирку, плотно закрывают корковой или притертой стеклянной пробкой.

В случае выпадения кристаллов холестерина антиген необходимо прогреть на водяной бане при 56 град. или в термостате при 37 град. до полного растворения кристаллов.

Для постановки реакции антиген разводят соответственно титру, указанному на этикетке ампулы. Разведенный антиген должен быть слегка опалесцирующим, но не мутным.

Бруцеллезные вакцины.

Накожная сухая живая бруцеллезная профилактическая вакцина
представляет собой взвесь живой культуры вакцинного штамма B. abortus в сахарозо-желатиновой среде, высушенную методом сублимационной сушки. Сухая вакцина имеет вид аморфной или кристаллической массы молочно-белого или слегка желтоватого цвета. Вакцину высушивают в вакуумных ампулах емкостью 6-8 мл. Вакцину проверяют на отсутствие бактериальной загрязненности, безвредность и иммуногенность.
Бруцеллезную живую сухую вакцину применяют для вакцинации и ревакцинации людей против бруцеллеза. Вакцинацию проводят накожно однократно. Непосредственно перед прививкой вакцину разводят стерильным физиологическим раствором.

Поливалентная бруцеллезная лечебная вакцина используют для лечения острых и хронических форм бруцеллеза. Этот препарат приготавливается из хорошо проверенных штаммов B. melitensis и B. abortusbovis. Вакцина представляет собой взвесь в физиологическом растворе бруцелл овечьего и коровьего видов, убитых нагреванием при 60 °С в течение 1 часа. Контролируется вакцина на стерильность, чистоту и стандарт, а маточная взвесь - на токсичность и специфическую безвредность.

17. Группы риска по бруцеллезу. Определение восприимчивых и невосприимчивых лицЧабаны, пастухи, ветеринарные работники, рабочие мясокомбинатов и консервных заводов, шерстеперерабатывающих предприятий составляют группу риска.

18. Проба Бюрне, компоненты, постановка, учет результатов.

Используют для выявления состояния ГЗТ к аллергенам бруцелл у больных, переболевших бруцеллезом. Ставят с 15-20 дня заболевания. Бруцеллин в дозе 0,1 мл вводят строго внутрикожно в среднюю треть ладонной поверхности предплечья. Через 6—12 часов на месте инъекции появляется болезненный отек и покраснение, которые достигают максимального развития через 24 и 48 часов, после чего постепенно угасают.

Учет: 1) отрицательная реакция (—) — полное отсутствие местных изменений; 2) сомнительная реакция (±) — наличие асимметрии кожной складки по сравнению с контрольной; 3) слабо положительная ( + )—наличие слабо выраженного отека и красноты диаметром 2—3 см; 4) положительная реакция ( + + )—наличие отечности диаметром 4—5 см, иногда с аденитом; 5) резко положительная (+ + + ) —при отеке 6—8 см с аденитом.

Серодиагностика бруцеллеза.

Реакция Райта: ставят в начале 2-й недели болезни. Реакцию ставят не менее чем в пяти разведениях (1:50, 1:100, 1:200, 1:400 и 1:800) в объеме 1 мл каждое. В качестве антигена применяют единый бруцеллезный дианостикум. Перед употреблением диагностикум разводят в 10 раз карболизированным (0,5%) физиологическим раствором. Учет реакции производят через 24 часа путем сравнения степени просветления в опытных пробирках с соответствующим стандартом мутности, который готовят следующим образом. В 4 пробирки последовательно наливают 1, 2, 3 и 4 мл разведенного диагностикума, затем в том же порядке добавляют 3, 2 и 1 мл карболизированного физиологического раствора, в последнюю пробирку ничего не добавляют. После взбалтывания содержимого берут по 0,5 мл антигена каждой концентрации и 0,5 мл карболизированного физиологического раствора. Таким образом получают 4 пробирки стандарта мутности с различной степенью просветления (75% — 3—, 50% — 2 — и 25% — 1 — и отсутствие просветления), которые вместе с опытными пробирками помещают в термостат при t° 37° на 24 часа, после чего производят учет реакции. Диагностическим титром исследуемой сыворотки считается 50% агглютинации (2+).

Реакция Хеддльсона: стеклянную пластинку делят на 6 квадратов и наносят неразведенную испытуемую сыворотку в количествах от 0,08 до 0,01 мл и добавляют единый бруцеллезный диагностикум (по 0,03), кроме последней (5), в которую вносят 0,03 мл ИХН (контроль сыворотки). В 6-м квадрате находится 0,03 мл АГ и 0,03 мл ИХН (контроль диагностикума). Капли смешивают стеклянной палочкой. Учет: отсутствие агглютинации во всех дозах – отриц, наличие в 1 – сомнительная, во 2 – слабоположительная, в 3 и 4 – положительная, везде – резко положительная.

+проводят РИФ, РПГА, ИФА, РСК.

Бруцеллин.

Препарат для выявления специфической сенсибилизации организма к бруцеллам путем постановки внутрикожной пробы по Бюрне. Препарат представляет собой фильтрат 3 недельной убитой нагреванием бульонной культуры бруцелл. Действующее начало препарата – специфический белок – аллерген.

При положительной реакции на месте введения появляется болезненная отечность красноватого или бледно-розового цвета. Реакцию оценивают на следующий день. Положительная реакция наблюдается у больных бруцеллезом, при бессимптомной инфекции, у вакцинированных людей.

Иммунотерапия столбняка.

Иммуноглобулин человеческий противостолбнячный: получен из гамма-глобулиновой фракции сыворотки крови людей-доноров, ревакцинированных очищенным сорбированным столбнячным анатоксином. Применяется для пассивной экстренной профилактики столбняка в сочетании со столбнячным анатоксином при травмах кожных покровов, также для лечения начавшегося заболевания. Доза 900 МЕ.

Противостолбнячная сыворотка: получена из крови лошадей, гипериммунизированных столбнячным анатоксином. Очищена и концентрирована методом диаферм-3. Активность измеряется в международных единицах. Доза 50-100 тыс. МЕ. Курс- 2 инъекции, в тяжелых случаях 3- дробно.

Антибиотики: пенициллин, цефалоспорин.

Иммунотерапия ботулизма.

Противоботулиническая сыворотка: до установления серотипа вводят поливалентную сыворотку против токсинов А, В, С, Е, после выявления типа возбудителя вводят сыворотку против данного типа. Вводят внутривенно по Безредко, однократного введения обычно недостаточно, поэтому вводят ежедневно до достижения эффекта.

Гомологичные иммуноглобулины.

Иммунотерапия дифтерии.

Противодифтерийная антитоксическая сыворотка: получена из крови лошадей, гипериммунизированных дифтерийным анатоксином, очищают и концентрируют методом диаферм-3. Специфическое лечение противодифтерийной сывороткой начинают немедленно при клиническом подозрении на дифтерию.

Иммуноглобулин человека противодифтерийный: получен из гамма-глобулиновой фракции сыворотки крови людей-доноров, ревакцинированных очищенным сорбированным дифтерийным анатоксином. Вводят внутривенно.

Антибиотикотерапия: пенициллин, эритромицин, тетрациклин, сульфаниламидные препараты).

Гонококковая вакцина.

Используется для диагностики скрытых форм гонореи при хроническом течении болезни. Проводят провокацию биологическим методом: однократное внутримышечное введение гоновакцины взрослым в количестве 500млн микробных тел, детям старше 3-х лет-100-200мн. микробных тел, детям до 3-х лет гоновакцину не вводят. Вакцина гонококковая инактивированная жидкая содержит взвесь инактивированной культуры гонококков в 0,9% растворе хлорида натрия.Концентрация микробных тел в 1 мл. соответствует 10 единицам стандартного образца мутности.

67.Факторы патогенности менингококков. Основной фактор патогенности-капсула , защищающая менингококки от фагоцитоза.Токсические проявления менингококковой инфекции обусловлены высокотоксичным эндотоксином.Тяжесть болезни зависит от количества эндотоксинов в крови больного(вызывают кровоизлияния во внутренних органах). Эти два фактора оказывают сенсибилизирующее действие и индуцируют феномен Шварцмана. К другим факторам патогенности относят пили, белки наружной мембраны , наличие гиалуронидазы и нейраминидазы. Пили являются факторами адгезии к слизистой оболочке носоглотки, тканям мозговой оболочки. Менингококки выделяют IgA- протеазы, расщепляющие молекулы IgA, что защищает бактерии от их действия.

68.Методы микробиологической диагностики менингококкового сепсиса. В качестве экспресс-метода диагностики приготавливают мазок толстой капли крови на менингококк , взятый из пальца или вены. На середину предметного стекла наносят каплю крови и распределяют палочкой так , чтобы диаметр мазка соответствовал величине копеечной монеты. Стекло оставляют в горизонтальном положении для подсушивания. Затем без фиксации его окрашивают 1% водным раствором метиленового синего в течение 2 мин и обнаруживают 5-20 менингококков, фагоцитированных лейкоцитами. Также можно провести бактеориологическое исследование крови. Оно проводится редко, так как препатат «толской капли» крови в 50-90% случаев дает положительный результат.

69.Менингококковые вакцины. Для специфической профилактики используют

менингококковую химическую вакцину( из полисахаридных антигенов серогрупп А и Б), которая эффективна при иммунизации людей в коллективах , где широко распространено носительство менингококков серогрупп А и Б.

Созданы вакцины группы В на основе белков наружной мембраны менингококков; эти вакцины иммуногенны, но только в отношении штаммов возбудителя, использованного в ее производстве.