Окраска по методу Грама состоит из четырех этапов
1. -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
2. ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
3. ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
4. ----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- ------------------------------------------------------------------------------------
В клеточной стенке грамположительных бактерий содержится------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Форма бактерий определяется строением ее ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
В отличие от эукариотических клеток бактерии имеют: --------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
L- формы бактерии --------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
В состав клеточной стенки грамположительных бактерий входит --------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Окраска по Цилю – Нильсену используется -----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Кислотоустойчивость микроорганизмов обусловлена наличием в их клетках ----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Окраска микроорганизмов по методу Циля –Нильсена включает следующие этапы:
1.--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
2. -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
3. -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Цитоплазматическая мембрана представляет собой-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Нуклеоид ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Плазмиды------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
САМОКОНТРОЛЬ
К сложным методом относят окраску: (выберите 3 правильных
ответа)
А. По Граму;
Б. Цилю- Нильсену;
В. Нейссеру;
Г. Фуксином.
Окраска по Цилю- Нильсену используется для: ( выберите один
Правильный ответ)
А. Выявления кислотоустойчивых микобактерий;
Б. Выявления зерен волютина;
В. Выявления клеточной стенки бактерий;
Г. Выявления жгутиков.
Окраска по Граму используется для: ( выберите один
Правильный ответ)
А. Выявления кислотоустойчивых микобактерий;
Б. Выявления зерен волютина;
В. Выявления клеточной стенки бактерий;
Г. Выявления жгутиков.
4. Окраска по Нейссеру используется для: ( выберите один
Правильный ответ)
А. Выявления кислотоустойчивых микобактерий;
Б. Выявления зерен волютина;
В. Выявления клеточной стенки бактерий;
Г. Выявления жгутиков.
Окраска по Бурри- Гинсу используется для: ( выберите один
Правильный ответ)
А. Выявления кислотоустойчивых микобактерий;
Б. Выявления зерен волютина;
В. Выявления клеточной стенки бактерий;
Г. Обнаружения капсул.
6. Окраска по способу Романовского-Гимзе позволяет контрастировать :
(выберите один правильный ответ)
А. Внутриклеточные нуклеопротеиды
Б. Капсульные полисахариды;
В. Миколевую кислоту кислотоустойчивых бактерий;
Г. Клеточную стенку.
Способ окраски по Цилю-Нильсену применяют для выявления в материале бактерий: ( выберите один правильный ответ)
А. Стафилококков и стрептококков;
Б. Туберкулезной палочки и палочки проказы;
В. Дизентерийной палочки и сальмонелл;
Г. Бацилл сибирской язвы и клостридий газовой гангрены.
Микоплазмы отличаются от большинства бактерий: (выберите один
Правильный ответ)
А. Отсутствием клеточной стенки;
Б. Отсутствием мембраны, окружающей нуклеоид;
В. Наличием рибосом;
Г. Отсутствием ядра.
СОСТАВЬТЕ ЛОГИЧЕСКИЕ ПАРЫ: ВОПРОС-ОТВЕТ
1. Компоненты наружной мембраны бактерий
2. Бактерии, имеющие много жгутиков вокруг клетки
3. Микроорганизмы, не имеющие клеточной стенки
А. Амфитрихи
Б. Перитрихи
В. Спирохеты
Г. Микоплазмы
Д. Порины
СОСТАВЬТЕ ЛОГИЧЕСКИЕ ПАРЫ: ВОПРОС-ОТВЕТ
1. Функция движения у бактерий
2. Адгезия бактерий к эукариотическим клеткам
А. Порины
Б. Пили
В. Включения
Г. Псевдоподии
Д. Жгутики
ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗАДАНИЕ № 2.
Тема: Бактериологический метод исследования. Физиология бактерий. Питательные среды. Их классификация, способы приготовления, стерилизация. Техника посевов материала на питательные среды.
I. Мотивационная характеристика, темы занятия.
Усвоение вопросов бактериологического метода определения чистой культуры аэробных и анаэробных инфекционных заболеваний, необходимых для диагностики и лечения, изучение которых осуществляется также на кафедре эпидемиологии, инфекционных болезней, детских инфекций и др. клинических дисциплин.
Необходимый исходный уровень знаний: Физиология микроорганизмов.
II. Целевые задачи
| Студент должен знать: | Студент должен уметь: |
| 1. Бактериологический метод диагностики инфекционных заболеваний, его цель и этапы. | 1. Приготовить питательные среды. |
| 2. Типы питания бактерий. | 2. Оценить эффективность стерилизации и дезинфекции. |
| 3. Принципы культивирования микроорганизмов. | |
| 4. Питательные среды, требования, предъявляемые к питательным средам. | |
| 5. Классификация питательных сред, состав и приготовление. | |
| 6. Методы стерилизации. | |
| 7. Механизм действия стерилизующих факторов на молекулярную структуру микроорганизмов. | |
| 8. Отличия понятий контаминации и деконтаминации, дезинфекции и стерилизации, асептики и антисептики. | |
| 9. Современные технологии стерилизации и аппаратура. | |
| 10. Способы контроля эффективности стерилизации и дезинфекции. |
Основная литература:
1. Микробиология с вирусологией и иммунологией / Под ред. Л.Б. Борисова, A.M. Смирновой - М., 1994.
2. Медицинская микробиология. / Под ред. акад. РАМН В.И. Покровского. - М., 2001.
3. Микробиология, вирусология, иммунология / Под ред. А.А. Воробьева. – М., 2004. Глава 3.
4. Микробиология, вирусология и иммунология / Под редакцией В.Н. Царева – М., 2009. Часть 1, глава 1.4
5. Руководство к практическим занятиям по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии. /Под. ред. В.В. Теца, 2002. Глава 3
6. Практикум лабораторных работ с иллюстрированными ситуационными заданиями по микробиологии, иммунологии и вирусологии / Под ред. В.Н. Царева, А.А. Воробьева. – М., 2008.
Дополнительная литература:
Физиология микроорганизмов / Методические разработки к практическим занятиям по общей микробиологии. – Ростов-на-Дону, 2001.
Методические рекомендации, изданные кафедрой микробиологии, вирусологии и иммунологии ГОУ ВПО СОГМА Росздрава:
1. Методы лабораторной диагностики / Методические рекомендации для студентов лечебного, педиатрического, стоматологического, фармацевтического факультетов, факультета высшего сестринского образования. – Владикавказ, 2003.
2. Забор патологического материала для микробиологической, вирусологической и серологической диагностики инфекций / Учебно-методические разработки для студентов высшего сестринского образования. – Владикавказ, 2005.
3. Методические рекомендации для самостоятельной работы студентов по микробиологии / Учебно-методические рекомендации. – Владикавказ, 2003.
4. Сборник методических разработок по микробиологии для студентов лечебного, педиатрического, медико-профилактического и фармацевтического факультетов / Учебно-методические разработки, часть I.- Владикавказ, 2008.
III. Задания для самостоятельной внеаудиторной работы
1. Дайте определение микробиологического исследования выделения чистых культур микроорганизмов. Каковы основные принципы?
2. Методы выделения чистых культур.
1.
2.
3.
4.
3. Перечислите этапы выделения чистых культур.
1.
2.
3.
4.
4. Классификация питательных сред и методы их приготовления.
5. Методы стерилизации. Заполните таблицу:
| № | Способ стерилизации | Аппарат | Надёжность | Стерилизуемый материал |
| 1. | Стерилизация в пламени | |||
| 2. | Плазменная стерилизация | |||
| 3. | Сухой жар | |||
| 4. | Паром под давлением | |||
| 5. | Текучим паром | |||
| 6. | Тиндализация | |||
| 7. | Фильтрование | |||
| 8. | Физические факторы (УФЛ, гамма-лучи, ультразвук) | |||
| 9. | Газовая стерилизация | |||
| 10. | Пастеризация |
6. Дайте определение асептики, антисептики, дезинфекции и стерилизации.
7. Перечислите химические методы дезинфекции:
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
8. Как осуществляется контроль эффективности стерилизации (методы).
САМОКОНТРОЛЬ
1. При стерилизации наиболее быстро разрушаются следующие виды химических связей в пептидогликане бактериальной клеточной стенки:
А. Пептидные;
Б. Гликозидные;
В. Водородные;
Г. Ковалентные.
2. Для разрушения прионов необходимо:
А. Нарушить структуру НК;
Б. Нарушить структуру белка приона;
В. Разрушить все молекулы, образующие прион;
Г. Разрушить пептидогликан.
3. Перечислите способы стерилизации, освобождающие объект от споровых форм микробов:
А. Облучение ультрафиолетом;
Б. Автоклавирование;
В. Пастеризация;
Г. Сухим жаром.
4. Комплекс мероприятий, направленных на уничтожение на/в объектах патогенных микробов называются:
А. Асептика;
Б. Антисептика;
В. Дезинфекция;
Г. Стерилизация.
5. Если средство обладает моющим и антимикробным свойствами:
А. Допускается совмещение дезинфекции и предстерилизационной отчистки;
Б. Дезинфекция и предстерилизационная отчитска должны проводиься раздельно;
В. Данное средство может использоваться только для очистки;
Г. Данное средство может использоваться только для дезинфекции.
6. Сложные среды, содержащие белковые и углеводные компоненты, стерилизуют:
А. Дробно-текучим паром;
Б. Кипячением;
В. Сухим жаром в печи Пастера;
Г. Тиндализацией;
Д. Фильтрованием;
Е. Химической дезинфекцией.
7. К физическим методам стерилизации относятся:
А. Ультразвук;
Б. Ультрафиолетовые лучи;
В. Антибиотики;
Г. Фильтрование;
Д. Паровая стерилизация;
Е. Сухожаровая стерилизация.
8. Какие факторы используются при автоклавировании:
А. Температура;
Б. Фильтры;
В. Пар;
Г. Давление.
9. К простым средам относятся:
А. МПА;
Б. Пептонная вода;
В. Кровяной агар;
Г. Среда Гисса;
Д. МПБ.
Е. Сывороточные среды.
10. К сложным средам относятся:
А. МПА;
Б. Пептонная вода;
В. Кровяной агар;
Г. Среда Гисса;
Д. ЖСА;
11. В жидкой питательной среде рост микробов может наблюдаться в виде:
А. Колоний;
Б. Диффузное помутнение;
В. Придонного помутнения;
Г. Пристеночного налета.
12. Плотность питательных сред зависит от содержания:
А. Сыворотки крови;
Б. Сахарозы;
В. Агар-агара;
Г. Пептона.
13. На рост бактерий влияют следующие условия культивирования:
А. Содержание в питательной среде питательных веществ;
Б. рН среды;
В. Температура;
Г. Влажность среды;
Д. Факторы роста.
14. Оптимальной температурой для выращивания большинства патогенных микроорганизмов является:
А. 20º С
Б. 30º С
В. 37º С.
Г. 40º С.
15. Питательные среды по назначению делят на:
А. Простые;
Б. Элективные;
В. Жидкие;
Г. Дифференциально-диагностические;
Д. Транспортные.
16.Для осуществления активного транспорта веществ в бактериальную клетку необходимо присутствие:
а) транскриптазы
б)транслоказы
в)гиалуронидазы
д)нейроминидазы
г)ДНК-азы
17.Процесс биологического окисления субстрата осуществляется микробной клеткой:
а) рибосомах
б)мезосомах
в)митохондриях
г)внутриклеточных включениях
д)лизосомах
18.Микробы, использующие неорганические источники углерода и хемосинтезирующие реакции для получения энергии называются:
а)фотолитотрофами
б)фотоорганотрофами
в)хемолитотрофами
д)хемоорганотрофами
д)истинными хемоорганотрофами
19.Среда тиогликолевая служит для выделения:
а) облигатных аэробов
б) облигатных анаэробов
в) факультативных аэробов
г) факультативных анаэробов
д) все ответы правильные
20.Энергия в микробной клетке запасается в виде:
а) УДФ
б) волютин
в) НАД
г) ФАД
д) АТФ
е) все ответы правильные
21.Для анаэробного культивирования используют:
а) баллоны с бескислородной газовой смесью
б) анаэростат
в) вакуумный насос
г) газовый пакет с редуцирующими реагентами
д) все ответы правильные
22. Среды, содержащие сахара и другие углеводы, стерилизуют:
а) автоклавированием
б) кипячением
в) сухим жаром в печи Пастера
г) фильтрованием
д) дробно-текучим паром
23.На рост бактерий влияют следующие условия культивирования:
а) газовый состав
б) содержание в питательной среде органических соединений
в) факторы роста
г) рН среды
д) влажность среды
е) все ответы неправильные
24.Процессы биологического окисления сопряжены с реакциями:
а) катабализма
б) амфиболизма
в) анаболизма
г) биосинтеза
д) расщепления веществ
25.При стерилизации наиболее быстро разрушаются следующие виды химических связей в пептидогликане бактериальной клеточной стенки:
а) пептидные
б) гликозидные
в) водородные
г) ковалентные
26.Пастерилизацию с последующим быстрым охлаждением проводят в следующем режиме:
а) при t 100 С в течении 30 секунд
б) при t 65-95 С в течении 30 сек.-2 минут
в) при t 35-55 С в течении 60 минут
г) все ответы верны
27.Для контроля качества стерилизации применяют:
а) физико-химические тесты
б) фенолфталеиновую пробу
в) биологические тесты
г) молекулярно-генетические методы
28.Кислоты как конечный продукт метаболизма источника энергии:
а) дыхание
б) брожение
в) оба
д) ни тот, ни другой