Тема 1.4. Ингибиторы и активаторы ферментов.

Регуляция активности ферментов.

Вопросы для самоподготовки.

1.Какие вещества называются ингибиторами ферментов?

2.Перечислите виды ингибирования ферментов по прочности связывания и механизму действия.

3.Дайте определение необратимому ингибированию ферментов.

4.Приведите пример веществ, являющихся необратимыми ингибиторами энзимов.

5.Приведите примеры применения необратимого ингибирования ферментов в медицине.

6.Дайте определение обратимому ингибированию ферментов.

7.Перечислите виды обратимых ингибиторов.

8.Дайте определение конкурентному ингибированию энзимов.

9.Приведите примеры веществ, являющихся конкурентными ингибиторами.

10.Нарисуйте график Михаэлиса-Ментен для конкурентного ингибирования.

11.Как изменяется константа Михаэлиса и максимальная скорость ферментативной реакции при конкурентном ингибировании? Объясните причину таких изменений.

12.Нарисуйте график Лайнуивера-Берка для конкурентного ингибирования.

13.Приведите примеры действия лекарственных веществ как конкурентных ингибиторов.

14.Дайте характеристику неконкурентным ингибиторам ферментов.

15.Как изменяется константа Михаэлиса и максимальная скорость ферментативной реакции при неконкурентном ингибировании? Объясните причину таких изменений.

16.Нарисуйте график Михаэлиса-Ментен для неконкурентного ингибирования.

17.Нарисуйте график Лайнуивера-Берка для неконкурентного ингибирования.

18.Приведите примеры веществ, являющихся неконкурентными ингибиторами.

19.Дайте определение аллостерической регуляции активности ферментов.

20.Какой уровень структурной организации характерен для аллостерических ферментов?

21.Объясните механизм регуляции активности ферментов по типу аллостерической модификации.

22.Какие регуляторные ферменты называются гомотропными?

23.Нарисуйте схему регуляции активности фермента по принципу прямой положительной связи.

24.Какие регуляторные ферменты называются гетеротропными?

25.Нарисуйте схему регуляции активности фермента по принципу обратной отрицательной связи.

26.Какие регуляторные ферменты называются гомогетеротропными?

27.Особенности структуры и кинетики ферментативных реакций для регуляторных ферментов.

28.Нарисуйте график зависимости между концентраций субстрата и скоростью реакции, катализируемой регуляторным ферментом.

29.Как называются этапы метаболических путей, катализируемых регуляторными ферментами?

30.Механизм активации ферментов частичным протеолизом.

31.Как называется неактивный предшественник фермента?

32.Приведите примеры ферментов, активация которых идет частичным протеолизом.

33.Какое биологическое значение имеет биосинтез протеолитических ферментов в виде зимогенов?

34.Механизм регуляции ферментов путем их фосфорилирования-дефосфорилирования.

35.Приведите пример регуляции ферментов путем фосфорилирования-дефосфорилирования.

Вопросы, задачи и упражнения для самоконтроля.

1.Определите тип ингибирования, проанализировав приведенные ниже данные зависимости степени ингибирования фермента глутаматдегидрогеназы аспартатом и салицилатом. Требуется учесть, что в обоих случаях активность фермента можно восстановить, удалив ингибитор. Ответьте на вопросы:

1. Какое из веществ является конкурентным ингибитором, какие результаты это доказывают?

2. Какой метод можно использовать для удаления ингибитора?

Ингибирование аспартатом (концентрация аспартата постоянна)

Концентрация субстрата, мМ	2,0	3,0	4,0	10,0	15,0
Степень ингибирования, %

Ингибирование салицилатом (концентрация салицилата постоянна)

Концентрация субстрата, мМ	1,5	2,0	3,0	4,0	8,0
Степень ингибирования, %

2.Обратимо ли действие ингибиторов в следующих реакциях? Требуется обосновать ответ, используя данные по инактивации ферментов, приведенные в уравнениях.

а)

СООН СООН

| СООН–(СН₂)–С–СООН |

СН₂ || СН₂

| О |

СН₂ СН₂

| |

СHNН­₂ СН₂NH₂

| глутаматдекарбоксилаза

СООН

б)

Фермент–SH + JCH₂COOH Фермент–S–СН₂СООН + HJ

^{активный фермент неактивный фермент}

3.Укажите правильный ответ или ответы. Лекарства – ингибиторы ферментов:

1. являются исключительно необратимыми ингибиторами;

2. часто похожи на промежуточные соединения реакции;

3. могут взаимодействовать с несколькими ферментами;

4. изменяют структуру образованного продукта реакции.

4.Выберите наиболее полный ответ. Регулировать активность ферментов можно:

1. с помощью аллостерического лиганда;

2. путем фосфорилирования и дефосфорилирования;

3. специфическим гидролизом пептидных связей;

4. изменив конформацию активного центра;

5. с помощью белков-ингибиторов.

5.Аллостерический фермент:

1. это часто олигомерный белок;

2. имеет каталитические и аллостерические центры, которые всегда локализованы в разных протомерах;

3. аллостерическим эффектором для него может быть субстрат;

4. аллостерическим эффектором может быть конечный продукт метаболического пути;

5. присоединяет эффектор и при этом изменяется конформация всех протомеров.

6.Неактивная форма фермента пепсина – одна полипептидная цепь – имеет молекулярную массу 42000 Д. После добавления к раствору этого белка HCl молекулярная масса белка уменьшилась до 25000 Д и фермент стал активным. Выберите возможные причины активации фермента:

1. изменение рН;

2. отщепление субъединиц;

3. фосфорилирование;

4. изменение первичной структуры;

5. метилирование.

7. Модуляторами регуляторного фермента могут быть молекулы субстрата и молекулы продукта реакции, катализируемой ферментом. Как изменяется скорость реакции, катализируемой регуляторными ферментами, под влиянием субстрата и под влиянием продукта реакции? Какое биологическое значение имеет каждый из этих типов модуляции?

ВОПРОСЫ К ИТОГОВОМУ ЗАНЯТИЮ

«ХИМИЯ БЕЛКОВ. ФЕРМЕНТЫ».

1.Первичная структура белков (определение, связи, стабилизирующие первичную структуру, свойства).

2.Вторичная структура белков (определение, связи, стабилизирующие вторичную структуру, виды).

3.Третичная структура белков (определение, связи, стабилизирующие третичную структуру).

4.Четвертичная структура белков (определение, связи, стабилизирующие четвертичную структуру).

5.Протомер (определение, пример). Строение молекулы гемоглобина.

6.Изоэлектрическое состояние белковой молекулы (определение, свойства белков в изоэлектрической точке).

7.Напишите структурную формулу трипептида, состоящего из ВАЛ, ЦИС и ФЕН.

8.Напишите структурную формулу трипептида, состоящего из АЛА, ГИС и ТИР.

9.Напишите структурную формулу трипептида «глицил-серил-триптофан».

10.Напишите структурную формулу трипептида «лейцил-метионил-цистеин».

11.Классификация белков (по строению, функциям, примеры).

12.Денатурация белков (виды, факторы, вызывающие денатурацию).

13.Применение обратимой и необратимой денатурации в медицине.

14.Назовите признаки, отличающие биологические катализаторы от неорганических.

15.Укажите, в чем сходство биологических и неорганических катализаторов.

16.Дайте определение понятиям: кооперативность действия ферментов, компартментализация.

17.Дайте определение активного центра фермента. Какие функциональные группы и радикалы наиболее часто входят в состав активного центра?

18.Структура сложных ферментов.

19.Дайте определение специфичности ферментов. Виды специфичности.

20.Дайте определение абсолютной специфичности ферментов. Приведите пример.

21.Дайте определение относительной специфичности ферментов. Приведите пример.

22.Дайте определение стереохимической специфичности ферментов. Приведите пример.

23.Перечислите факторы, от которых зависит скорость ферментативной реакции.

24.Дайте определение оптимальному значению рН фермента.

25.Нарисуйте график зависимости скорости ферментативной реакции от рН среды.

26.Дайте определение термолабильности ферментов. Температурный оптимум действия ферментов.

27.Нарисуйте график зависимости скорости ферментативной реакции от температуры.

28.Константа Михаэлиса (определение, значение). На графике определите К_m (укажите, какое свойство фермента характеризует K_m).

29.Регуляторные ферменты. Особенности структуры, кинетика реакций, катализируемых регуляторными ферментами. Биологическое значение.

30.Нарисуйте график зависимости скорости реакции от концентрации субстрата для регуляторного фермента.

31.Назовите виды ингибирования ферментов. Приведите пример необратимого ингибирования.

32.Назовите типы обратимого ингибирования. Приведите пример.

33.Конкурентное ингибирование. Основные признаки конкурентного ингибитора. Выявление типа ингибирования с помощью графиков Михаэлиса-Ментен и Лайнуивера-Берка.

34.Неконкурентное ингибирование. Основные признаки этого типа ингибирования, выявление с помощью графиков Михаэлиса-Ментен и Лайнуивера-Берка.

35.Аллостерическая регуляция активности ферментов. Физиологическое значение регуляции активности ферментов.

36.Гомотропная регуляция активности ферментов. Приведите пример.

37.Гетеротропная регуляция активности ферментов. Приведите пример.

38.Изоферменты (особенности строения, локализация, функции). Приведите примеры.