Определение групп крови с помощью стандартных изогемагглютинирующих сывороток.
Оснащение: набор стандартных изогемагглютинирующих сывороток I-IV групп крови двух различных серий, белые фарфоровый или эмалированный планшет со смачиваемой поверхностью, на котором расположено 8 (или 7) лунок, маркированных 0(I), А (II), B(III), AB(IV), 0,9% раствор хлорида натрия, пипетки, стеклянные палочки.
Техника выполнения. Процедура проводится в хорошо освещённом помещении при температуре воздуха от 15 до 25 ºС. На планшет под соответствующую маркировку наносят сыворотки I, II, III групп крови в объеме ~ 0,1 мл. Кровь у больного берут из пальца или из вены и добавляют по ~ 0,01 мл (малая капля) к сыворотке. Кровь и сыворотка смешиваются стеклянными палочками. Ожидание реакции гемагглютинации 0,5-5 минут. В те капли, где произошла агглютинация добавляют по 1 капле изотонического раствора, после чего производят учёт результатов пробы согласно приведённой ниже схеме.
| 0(I) | А (II) | B(III) | AB (IV) | Группа крови |
| - | - | - | Не проводят | 0(I) |
| + | - | + | Не проводят | А (II) |
| + | + | - | Не проводят | B(III) |
| + | + | + | - | AB (IV) |
Рис. 61. Схема учёта результатов пробы при определении группы крови с помощью набора стандартных сывороток. На схеме обозначено: + агглютинация, - агглютинация отсутствует.
Обращаем внимание, что проба с сывороткой IV группы (не содержащей никаких агглютиногенов) проводится только при наличии агглютинации во всех трёх лунках на планшете для подтверждения определения IV группы путём исключения неспецифической агглютинации.
Рис. 62. Внешний вид эмалированного планшета, соответствующего группе крови В(III).
Проба на индивидуальную совместимость и резус-совместимость.
Оснащение: белые фарфоровые или эмалированные пластинки со смачиваемой поверхностью, 10% раствор желатина, водяная баня, 0,9% раствор хлорида натрия.
Техника выполнения. Предварительно у реципиента из вены берут кровь, которую путем отстаивания или центрифугирования делят на сгусток (эритроциты) и плазму.
Пробу на индивидуальную совместимость по системе АВ0 проводят следующим образом. На эмалированную пластинку наносят крупную каплю сыворотки крови реципиента и маленькую каплю крови донора, смешивают их между собой. Отсутствие агглютинации в течение 5 мин свидетельствует о совместимости крови донора и реципиента.
Проба на индивидуальную совместимость по резус-фактору проводится так. На дно пробирки помещают 1 каплю эритроцитов донора, 2 капли подогретого 10% раствора желатина, 2 капли сыворотки реципиента. Содержимое пробирки перемешивают и помещают на водяную баню при температуре 46-48 ºС на 10 мин. После этого в пробирку добавляют 6 мл 0,9% раствора хлорида натрия, перемешивают содержимое. Наличие агглютинации свидетельствует о несовместимости крови донора и реципиента.
Определение резус-фактора.
Оснащение: термостат, 0,9% раствор хлорида натрия, пробирка, антирезусная сыворотка, 10% раствор желатина.
Техника выполнения. В пробирку помещают равные объемы исследуемых эритроцитов, антирезусной сыворотки и 10% раствора желатина. Пробирку инкубируют при температуре 46-48 ̊С в термостате. После этого добавляют десятикратный объем физиологического раствора. Пробирку 2-3 раза переворачивают и учитывают результат по наличию агглютинации, видимой невооруженным глазом. Наличие агглютинации свидетельствует о присутствии резус-фактора в исследуемых эритроцитах (кровь резус-положительна).
Биологическая проба.
Оснащение: тонометр, фонендоскоп.
Техника выполнения. Струйно переливают реципиенту через капельницу около 15 мл крови донора, затем трансфузию прекращают и в течение 3-х минут наблюдают за состоянием больного. При отсутствии клинических проявлений реакции или осложнений (боль в пояснице, за грудиной, учащение пульса, дыхания, снижение артериального давления, появление одышки, затрудненное дыхание, гиперемия лица, ощущение озноба или жара и др.) описанную процедуру повторяют ещё дважды. Если при этом не было зафиксировано указанных выше патологических изменений, производят капельное переливание всего пакета с препаратом крови. При появлении трансфузионных реакций или осложнений при проведении биологической пробы переливание крови прекращают.