Определение групповой принадлежности крови по системе ав0

А. Оснащение:

1. Две серии стандартных изогемагглютинирующих сывороток трех групп (О,А,В) с титром не ниже 1:32. Сыворотки располагают в специальных штативах в два ряда. Каждой сыворотке соответствует маркированная пипетка. Для дополнительного контроля в отдельный стаканчик должна быть поставлена ампула с сывороткой АВ(IV).

2. Плоские тарелки или фарфоровые планшеты. На левой стороне тарелки (планшета) делают надпись 0 (I), в середине А(II), на правой стороне В (III).

3. Флакон с физиологическим раствором поваренной соли.

4. Стерильные иглы для прокола мякоти кончика пальца, спирт, стерильная вата, стеклянные палочки, предметные стекла.

B. Правила определения групповой принадлежности крови донора и реципиента:

1. Обработать спиртом кончик пальца реципиента

2. Проколоть мякоть пальца иглой и взять пипеткой несколько капель крови.

3. Нанести на тарелку (планшет) капли крови по две рядом -размером с булавочную головку там, где сделаны надписи: 0(I),А (II), В (III).

4. Добавить к каждой капле стандартные сыворотки (0,А,В)двух серий, по объему в 8-10 раз превышающие объем капли крови.

5. Размешать кровь в сыворотке покачиванием тарелки (планшета) или с помощью стеклянных палочек.

6. Наблюдать наступление реакции агглютинации появляются песчинки "тертого кирпича" в течение 5-8 мин.

7. Добавить по одной капле физиологического раствора через3 мин. после наступления агглютинации.

8. Чтение окончательного результата производится через 5мин после прибавления капли физиологического раствора.

ПРОГРАММА ВЫПОЛНЕНИЯ ПРОБЫ НА ИНДИВИДУАЛЬНУЮ СОВМЕСТИМОСТЬ

1. Из вены реципиента в пробирку взять 3-5 мл крови без добавления стабилизатора.

2. Кровь центрифугировать.

3. Пипеткой отсосать 2-3 капли сыворотки реципиента и нанести их на тарелку.

4. К сыворотке реципиента добавить одну (меньшую в 10 раз)каплю крови донора и тщательно ее перемешать стеклянной палочкой.

5. Реакцию читать через 5-10 мин: отсутствие агглютинации свидетельствует об индивидуальной совместимости крови донора и реципиента.

ПРАВИЛА ПРОВЕДЕНИЯ ПРОБ НА ИНДИВИДУАЛЬНУЮ РЕЗУС СОВМЕСТИМОСТЬ

Проба на совместимость на водяной бане

Оснащение: водяная баня, чашки Петри, термометр для измерения температуры воды, центрифуга.

1. Из вены реципиента в пробирку взять 3-5 мл крови без добавления стабилизатора

2. Кровь центрифугировать

3. Пипеткой отсосать 2 капли сыворотки реципиента и нанести их на чашку Петри

4. К сыворотке добавить в 5-10 раз меньшую каплю крови и капли перемешать

5. Чашку Петри поставить на водяную баню (температура воды 42-46 градусов С на 10 мин.

6. Чтение результата: если произошла агглютинация, кровь не совместима и переливать ее нельзя.

Проба на индивидуальную резус-совместимость с использованием 33% раствора полиглюкина (Разрешено Минздравом РБ 12.10.97 г.)

Необходимые ингредиенты для выполнения пробы:

§ сыворотка реципиента;

§ кровь донора;

§ 33% раствор полиглюкина;

§ изотонический 0,9% раствор хлорида натрия.

Техника проведения пробы

Проба проводится в пробирке без подогрева в течение 5 минут в следующей последовательности:

§ напишите на пустой пробирке фамилию, инициалы, группу крови реципиента и номер флакона донора;

§ внесите на дно пробирки пипеткой 2 капли сыворотки реципиента, 1 каплю крови донора и 1 каплю 33% раствора полиглюкина (перед употреблением раствор полиглюкина необходимо выдержать при комнатной температуре не меннее 1 часа):

§ перемешайте полученную в пробирке смесь и, наклоняя пробирку до горизонтального положения, поворачивайте ее таким образом, чтобы содержимое растекалось по стенкам пробирки в нижней ее трети;

§ по истечении 5 минут долейте в пробирку 2-3 мл изотонического 0,9% раствора хлорида натрия и перемешайте содержимое путем 2-3-х кратного переворачивания пробирки (не взбалтывать);

§ внимательно изучите содержимое пробирки в проходящем свете.

Оценка результатов

Наличие агглютинации эритроцитов (взвесь) на фоне просветленной или полностью обесцвеченной жидкости указывает на то, что кровь донора несовместима с кровью больного и не может быть перелита.

Равномерное окрашивание содержимого пробирки без признаков агглютинации эритроцитов (взвесь не выявляется) свидетельствует о совместимости крови донора с кровью больного.