Определение уровня сывороточных иммуноглобулинов G, А, М.

Количественные определения в сыворотки крови иммуноглобулинов основных классов M, G, A проводятся методами

· радиальной иммунодиффузии,

· ИФА

Нормы в г/л:

IgG -6,6-16,0

IgA - 0,7- 5,0

IgM -0,62 - 1,82

Метод высоко информативен в диагностике первичных и вторичных иммунодефицитных состояниях и хронических инфекциях.

Ig M - повышается при перинтальных инфекциях (цитомегаловирусная, токсоплазмоз, краснуха, и др. вирусные инфекции); также повышается при острых септических состояниях, инфекционном мононуклеозе, микоплазменной пневмонии, вирусных гепатитах, циррозе, ревматоидном артрите, особенно в начальном, трудном для диагностики периоде артритов, при обострении СКВ. При некоторых заболеваниях повышение уровня Ig М свидетельствует о хроническом процессе.

Повышение уровня IgМ наблюдается при макроглобулинемии Вальденстрема, бессимптомной моноклональной гаммапатии (редкие случаи), наличии холодовых IgM агглютининов.

IgM-снижается при первичных и вторичных ИД состояниях, при гастроэнтеропатиях, ожоговой болезни, иммунодепрессивной терапии.

IgG - повышается при разных заболеваниях, его повышение часто сопутствует активности процесса. Высокие концентрации данного иммуноглобулина наблюдаются при аутоиммунных процессах, острых инфекционных состояниях в фазу вторичного иммунного ответа. Увеличение концентрации моноклональных IgG имеет место при IgG-миеломе, бессимптомной моноклональной гаммапатии (редкие случаи).

Уровень IgG снижается при первичных и вторичных ИД, при гастроэнтеритах с потерей белка, при нефротическом синдроме, при иммунодепрессивной терапии.

IgA - повышается при перинатальных инфекциях, хронических заболеваниях печени, подострых и хронических инфекциях, аутоиммунных заболеваниях, IgA - миеломе, бессимптомной гипергаммаглобулинэмиии (редкие случаи).

Снижение уровня IgA отмечается при ИД, ожоговой болезни, селективном дефиците IgA. Лица с дефицитом IgA предрасположены к аутоиммунным и аллергическим заболеваниям.

Оценка фагоцитарного звена иммунитета

Методы:

· Определение фагоцитарной активности (поглотительной способности) - фагоцитоз с латексом или с культурой бактерий

· Определение переваривающей способности фагоцитов - фагоцитоз с культурой стафилококка

· Определение активности «кислородного взрыва» - НСТ-тест

· Оценка фагоцитарного звена методом проточной цитометрии

ФАЛ- ФАГОЦИТОЗ С ЧАСТИЦАМИ ЛАТЕКСА.

Для определения поглотительной способности нейтрофилов используется тест с частицами латекса (или взвесью бактерий). Для этого взвесь частиц латекса соединяют с гепаринизированной кровью больного. После инкубации готовят мазок и окрашивают его по Романовск

Затем при микроскопии мазка определяют процент активных (т.е поглотивших нейтрофилов - фагоцитарную активность.

Норма:52-90%

ФСт – ФАГОЦИТОЗ С КУЛЬТУРОЙ СТАФИЛОКОККА

Метод основан на способности нейтрофилов крови поглощать и переваривать микроорганизмы. Это является важнейшей характеристикой функций гранулоцитов. Ее снижение может быть результатом как недостаточности опсонизирующих факторов сыворотки (антител, комплемента), так и дефектов самих клеток (нарушение двигательной и метаболической активности врожденного или приобретенного характера).

Гепаринизированную кровь соединяют со взвесью бактерий (St. epidermidis.). Результаты оценивают через 30 минут и через120 минут. Поглотительная способность клеток оценивается по 2 показателям:

-ФА – фагоцитарная активность или процент фагоцитоза – это % нейтрофилов, поглотивших бактерии, от общего числа нейтрофилов. Норма 52- 90%, абс – 0,85 – 3,7.

ФЧ – фагоцитарное число – это среднее число поглощенных бактерий одним активным нейтрофилом.

Норма – 4,5 – 10.

Для определения переваривающей способности нейтрофилов эти же показатели определяют через 120 минут.

В норме через 30 минут начинается переваривание поглощенных микробов и поэтому значение ФА и ФЧ через 120 минут будут ниже, чем через 30 минут.

ИЗФ – индекс завершенности фагоцитоза определяется соотношением ФЧ через 30мин. к ФЧ через 120 мин. Поэтому он в норме больше 1.

Изучение показателей фагоцитоза имеет значение в комплексном анализе и диагностике иммунодефицитных состояний: часто рецидивирующих гнойных воспалительных процессов, при длительно незаживающих ранах и т.д. Помогает в диагностике вторичных иммунодефицитных состояний, вызванных лекарственной терапией, позволяет оценивать эффективность лечения. В связи с тем, что фагоциты участвуют в элиминации иммунных комплексов , их деятельность тесно связана с системой комплемента и уровнем IgG. Эти показатели имеют значение при оценке активности процесса и эффективности терапии при аутоиммунных заболеваниях.

НСТ-ТЕСТ - СПОНТАННЫЙ И СТИМУЛИРОВАННЫЙ.

Принцип метода основан на способности нейтрофилов поглощать нитросиний тетразолий и восстанавливать его в гранулы нерастворимого диформазана в виде гранул синего цвета. Восстановление НСТ обеспечивается энергией и продуктами окислительно- восстановительных реакций “метаболического взрыва”, сопровождающего процесс фагоцитоза. К гепаринизированной крови добавляют НСТ, инкубируют и затем в мазках определяют процент нейтрофилов, содержащих гранулы диформазана. Это спонтанный НСТ, в норме он от3 до 15%.Для выявления резервов бактерицидной функции нейтрофилов применяют стимулированный НСТ-тест. При этом в лунку еще добавляют стимулятор фагоцитоза (латекс, пирогенал, зимозан и т.д.).В норме стимулированный НСТ-тест на 40-80%выше спонтанного.

Это тест может быть использован для дифференциальной диагностики бактериальных (высокие результаты) и небактериальных (нормальные показатели) заболеваний, протекающих с лихорадкой, лейкоцитозом, высокой СОЭ. Однако следует помнить,что высокие показатели НСТ-теста отмечаются при паразитарных инвазиях, вирусном гепатите, грибковых поражениях легких, туберкулезе. Кроме того, высокие показатели теста наблюдаются при многих небактериальных процесах: инфаркте миокарда, переломах, оперативных вмешательствах, лейкозах, у онкологических больных.