Что может влиять на результат?

§ У здоровых людей возможно повышение уровня глюкозы в крови и в моче после употребления богатой углеводами пищи, при стрессе, мышечном напряжении.

§ На результат анализа влияют принимаемые лекарства.

§ Однократное повышение глюкозы в моче не является основанием для постановки диагноза. Решение принимает врач с учетом клинической картины и анамнеза.

При бактериурии глюкоза мочи быстро разлагается.

При определении содержания глюкозы в суточном объеме мочи в контейнер до начала собирания следует добавить 5 мл ледяной уксусной кислоты. Снижение рН мочи до 4,0–5,0 замедляет утилизацию глюкозы бактериями и стабилизирует ее уровень.

При хранении образцов мочи при комнатной температуре после 24-часового хранения может теряться до 40% глюкозы

Задание №2. Изучите и законспектируйте методики определения глюкозы в моче.

В моче здорового человека содержатся минимальные количества глюкозы, которые не могут быть обнаружены обычными качественными методами. Это минимальное содержание глюкозы в моче называется глюкурез, в отличие от глюкозурии, означающей ненормальное увеличение концентрации глюкозы в моче, при которой обычные реакции идентификации глюкозы становятся положительными.

Делать анализ на сахар в моче нужно из суточной пробы.

Почему? Потому, что уровень сахара в крови постоянно меняется, а выше уже упоминалось, что в моче сахар появляется только при достижении отметки выше 9-10 ммоль/л в крови. Поэтому, анализ может быть не результативным, если собрать мочу утром натощак.

· Сбор мочи: утром в 6.00 пациент полностью опорожняет мочевой пузырь в унитаз. Далее вся моча собирается в течение суток в одну ёмкость, последнее мочеиспускание в 6.00 следующего утра. Во время сбора моча должна храниться в холодильнике при температуре +4 - +8ºС. Далее моча перемешивается, измеряется её объём (суточный диурез). Затем в контейнер отбирается 50-100 мл мочи на исследование. На этикетке указывается Ф.И.О. пациента, дата, суточный диурез в мл.

Контейнер с мочой необходимо доставить в лабораторию в тот же день.

· Моча. Накануне исследования не рекомендуется употреблять в пищу овощи и фрукты, которые могут изменить цвет мочи (свекла, морковь, черника и т.п.), по возможности не принимать ряд медикаментов (диуретики, витамины группы В, фурагин, антипирин, аспирин). Женщинам не следует сдавать анализ мочи во время месячных. Перед сбором мочи нужно произвести гигиенический туалет наружных половых органов.

Внимание! Для данного исследования необходимо будет указать суточный диурез. Суточный диурез - это общий объем мочи в мл, собранный (выделенный) пациентом за сутки.

Условия определения глюкозы в моче:

1. Моча должна быть прозрачной.

2. Моча не должна содержать белок.

Удаление белка:

Мочу подкисляют до кислой реакции уксусной кислотой, нагревают до кипения, охлаждают и отфильтровывают или центрифугируют.

Затем наличие белка проверяют качественной реакцией на белок.

Качественные методы определения глюкозы в моче

Метод Гайнеса-Акимова (унифицированная проба)

Принцип метода:

Метод основан на способности глюкозы восстанавливать в щелочной среде при нагревании гидрат окиси меди (синего цвета) в гидрат закиси меди (желтого цвета) и закись меди (красного цвета).

Для того чтобы из гидрата окиси меди при нагревании не образовался черный осадок окиси меди, к реактиву добавляют глицерин, гидроксильные группы которого связывают гидрат окиси меди.

Реактив Гайнеса:

113,3 г кристаллического сульфата меди (СuSO₄ * 5Н₂О) растворяют в 400 мл дистиллированной воды.

250 г едкого натра растворяют в 400 мл дистиллированной воды.

315 г глицерина растворяют в 200 мл дистиллированной воды. Далее первый и второй растворы смешивают и тотчас же приливают третий раствор. Реактив стоек, синего цвета.

Ход определения

К 3- 4 мл реактива Гайнеса в пробирке вносят 8-10 капель мочи.

Кипятят на водяной бане 1-2 минуты.

При наличии глюкозы в моче цвет синего реактива меняется от желтого до кирпично- красного и появляется осадок.

Унифицированный метод определения с помощью

индикаторных полосок

Принцип метода:

Метод основан на специфическом окислении глюкозы с помощью фермента глюкозооксидазы; образовавшаяся при этом перекись водорода разлагается пероксидазой и окисляет краситель. Изменение окраски красителя при окислении свидетельствует о присутствии глюкозы в моче.

Интенсивность изменения окраски в определенной степени пропорциональна содержанию глюкозы в растворе, поэтому “Глюкотест” используется и для полуколичественного определения содержания глюкозы в моче (от 1,0 до 20 г/л и выше).

Реактивная бумага “Глюкотест” представляет собой полоски бумаги

0,5 Х 5 см, имеющие поперечную полосу светло-желтого цвета, пропитанную раствором ферментов (глюкозооксидаза, пероксидаза )и красителя. С помощью бумаги “Глюкотест” можно обнаружить глюкозу в моче и ориентировочно определить ее концентрацию.

Ход исследования:

Индикаторную бумагу погружают в исследуемую мочу так, чтобы желтая полоса с реактивами оказалась смоченной, после этого ее немедленно извлекают из мочи и на 2 мин оставляют на пластмассовой пластинке. По истечении 2 мин сразу же сравнивают изменившуюся окраску цветной полосы на бумаге со шкалой, имеющейся в комплекте.

Содержание глюкозы в моче определяют по наиболее совпадающему со

шкалой цвету полоски.

При содержании в моче глюкозы более 20 г/л интенсивность окраски цветной полосы становится предельной (соответствует 2% по шкале) и далее не меняется.

Полоски хранят при температуре от +8 до +18 °С, избегая попадания на них прямых солнечных лучей; не рекомендуется дотрагиваться рукой до цветной шкалы полоски.

Количественные методы определения глюкозы в моче

Проводят только после положительной качественной реакции.