I. Вирусы полиомиелита и энтеровирусы А-Д.

1. Обозначить на рисунке основные структурные элементы вириона пикорнавирусов.

___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________

2. Изучить схему репродукции пикорнавирусов и написать основные её этапы.

3. Указать способы культивирования пикорнавирусов и методы их индикации: ____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

4. Выявить цитопатическое действие вирусов в культуре клеток Hep -2, зараженных фильтратом из испражнений больного c подозрением на энтеровирусную инфекцию. Вывод: ____________________________________________________

_____________________________________________________________________

5. Учесть реакцию нейтрализации энтеровирусов по бляшкообразованию в культуре клеток под бентонитовым покрытием (демонстрация).

6. Произвести заражение однодневных мышей-сосунков материалом, содержащим вирус Коксаки В.

7. Учесть реакцию связывания комплемента с парными сыворотками больного энтеровирусной инфекцией. Записать результаты и сделать вывод: ____________________________________________________________________

8. Дополнить схему лабораторной диагностики энтеровирусной инфекции.

Исследуемый материал:

___________________метод

____________________метод

_________________метод

1. Выделение и накопление вирусов:____________________ ____________________________

Заражение мышей-сосунков: - вирусы ECHO не патогенны; - вирусы Коксаки А вызывают диффузный миозит;

Выявление АТ в сыворотках крови: РСК РН

2. Индикация вирусов: ________ ____________________________

- вирусы Коксаки В поражают ЦНС и вызывают развитие параличей.

3. Идентификация вирусов: РН РСК

________________ метод ПЦР (выявление___________)

9. Указать механизм действия противовирусного препарата Pleconaril, применяемого для лечения заболеваний, вызываемых пикорнавирусами: ____________________________________________________________________
____________________________________________________________________

10. Ознакомиться с препаратами, применяемыми для специфической профилактики и диагностики полиомиелита и энтеровирусных инфекций (полиомиелитные аттенуированная и инактивированная вакцины, диагностические иммунные сыворотки, вирусные антигены).

11. Дать характеристику полиомиелитным вакцинам, указать их преимущества и недостатки:

IPV (инактивированная полиомиелитная Солка)_____________________________

____________________________________________________________________

OPV (живая вакцина Сэбина)__________________________________________

____________________________________________________________________

Примечания:

* По современной классификации род энтеровирусов человека подразделяют на основании молекулярно-биологических характеристик на следующие виды:

Вид	Серотип
Вирус полиомиелита	1-3
Энтеровирусы А – НЕV A	Коксаки А - 2-8, 10, 12, 14, 16; EV – 71, 76, 89-91
Энтеровирусы B – НЕV B	Коксаки А – 9; Коксаки В – 1-6; ECHO – 1-7, 9, 11-21, 24-27, 29-33; EV – 69, 73-75, 77-88, 95; EV – 100-110;
Энтеровирусы C – НЕV C	Коксаки А – 1, 11, 13, 15, 17-21, 24
Энтеровирусы D – НЕV D	EV – 68, 70, 94

** Серозный менингит могут вызывать вирусы Коксаки А 2, 4, 9, 10 серотипов, Коксаки В 1-6 серотипов, вирусы ECHO 1-11, 13-22, 25, 27, 29-31 серотипов.

II.Вирусы гепатитов с фекально-оральным механизмом заражения

1. Обозначить на рисунках основные структурные элементы вирионов вирусов гепатитов и дописать названия семейств и родов к которым они относятся.

HAVСемейство_____________________ Род___________________________
HЕVСемейство_____________________ Род___________________________

2. Ознакомиться с диагностическими тест-системами для постановки ИФА с целью выявления вирусных антигенов или антител к вирусам гепатитовА, Е. Демонстрация выявления вируса гепатита А в фекалиях больного методом ИФА.

3. Ознакомиться с методом экспресс-диагностики – постановкой ПЦР и обратной ПЦР с использованием пар праймеров к консервативным участкам геномов вирусов гепатита.

4. Дополнить схему лабораторной диагностики гепатитов А и Е.

Исследуемый I. Вирусы полиомиелита и энтеровирусы А-Д. - student2.ru

материал:

_____________метод

___________________метод

1. Выявление АГ вирусов ИФА РИФ

Выявление АТ: I. Вирусы полиомиелита и энтеровирусы А-Д. - student2.ru

Ig M ИФА

2. Выявление генов вируса ПЦР

Ig G

5. Изучить препараты для лечения и профилактики вирусного гепатита А (интерфероны, противовирусные химические препараты – ламивудин, рибавирин, вакцины ).

6. Перечислить вакцины против гепатита А по способу их получения:

___________________________________________________________________

Подпись преподавателя ________________

Дата____________

Занятие 11

Тема:Ортомиксовирусы. Лабораторная диагностика гриппа.

Парамиксовирусы. Лабораторная диагностика парагриппа, кори, эпидеми-ческого паротита.

СРС: Аденовирусы. Лабораторная диагностика аденовирусных инфекций.

Вопросы для обсуждения:

Характеристика и классификация семейства Orthomyxoviridae.
Морфология и ультраструктура вириона ортомиксовирусов.
Антигенная структура рода Influenzavirus.
Антигенный дрейф и шифт вирусов гриппа типа А.
Культивирование и репродукция вирусов гриппа.
Отличия вирусов гриппа типов А, В и С.
Патогенез и клинические проявления гриппа.
Формирование иммунитета при гриппе.
Лабораторная диагностика гриппа.
Противовирусные противогриппозные химио– и иммунобиологические препараты.
Классификация и характеристика семейства Paramyxoviridae.

12. Морфология и ультраструктура вириона парамикосвирусов.

13. Культивирование и репродукция парамиксовирусов.

14. Род Respirovirus. Вирусы парагриппа: структура вириона и антигенные свойства.

15. Патогенез и клинические проявления парагриппа.

16. Лабораторная диагностика парагриппа.

17. Род Rubulavirus. Характеристика свойств вируса эпидемического паротита.

18. Патогенез и клинические проявления паротита.

19. Род Morbillivirus. Характеристика свойств вируса кори и вируса подострого склерозирую-

щего панэнцефалита (ПСПЭ).

20. Патогенез и клинические проявления кори.

21. Специфическая профилактика кори и паротита.

22. Факторы, способствующие развитию ПСПЭ – медленной инфекции.

23. Род Pneumovirus. Характеристика свойств респираторно-синцитиального вируса (РС – вирус).

24. Род Metapneumovirus. Роль метапневмовирусов в развитии заболеваний дыхательных путей детей первого года жизни.

Практические задания:

I. Вирусы гриппа.

1. Обозначить на рисунке основные структурные элементы вириона ортомиксовирусов.

2. Изучить схему репродукции вирусов гриппа и написать основные её этапы.

3. Указать способы культивирования вирусов гриппа и методы их индикации: ___________________________________________________________________

___________________________________________________________________

4. Промикроскопировать в люминесцентном микроскопе мазки, приготовленные из носоглоточного смыва больного и обработанные противогриппозными иммунофлюоресцирующими сыворотками.

Вывод:_____________________________________________________________

5. Учесть реакцию гемагглютинации с аллантоисной жидкостью куриного эмбриона, зараженного носоглоточным смывом больного гриппом. Зарисовать и сделать вывод.

1:4

1:8

1:16

1:32

1:64

Контроль -0,85% NaCl

Разведения аллантоисной жидкости, полученной из куриного эмбриона, зараженного носоглоточным смывом больного с подозрением на «грипп» и выдержанного в термостате при t 37°С в течение 72 ч.

Вывод: ______________________________________________________________

____________________________________________________________________

6. Определить подтип гемагглютинина вируса гриппа по результатам реакции торможения гемагглютинации (РТГА).

Н1
Н2
Н3

Вывод: _______________________________________________________________

7. Учесть реакцию связывания комплемента с парными сыворотками больного гриппом.

1-я сыворотка крови больного
2-я сыворотка крови больного	1:10 1:20 1:40 1:80 1:160 1:320 к/с к/аг

Вывод: ______________________________________________________________

____________________________________________________________________

8. Ознакомиться с диагностическими тест- системами для постановки ИФА, применяемыми для экспресс-диагностики гриппа.

9. Дополнить схему лабораторной диагностики гриппа.

Исследуемый материал:

_____________метод

____________________метод

_________________метод

РИФ (Выявление …………)

1. Выделение и накопление вирусов:

К/Э К/К

Выявление АТ в парных сыворотках крови: РТГА

ПЦР (Выявление ………..)

2. Индикация вирусов:

РГА РГадс.

РСК ИФА

3. Идентификация вирусов: РТГА РТГадс РСК ИФА Реакция ингибирования нейраминидазы

10. Изучить препараты для диагностики, профилактики и лечения гриппа: наборы диагностических иммунных сывороток, вирусные антигены, иммуноглобулины, вакцины, интерферон, интерфероногены, ремантадин, озельтамивир (тамифлю), занамивир (реленза), оксолин.

11.Указать механизмы противовирусного действия химиопрепаратов:

ремантадин _________________________________________________________

озельтамивир(тамифлю) _______________________________________________

занамивир (реленза) __________________________________________________

12. Перечислить гриппозные вакцины по способу их получения: _______________

____________________________________________________________________

II. Парамиксовирусы

1. Обозначить на рисунке основные структурные элементы вириона парамиксовирусов.

2. Изучить схему репродукции парамиксовирусов и написать основные её этапы.

_______________________________ _______________________________ _______________________________ _______________________________ _______________________________ _______________________________ _______________________________ _______________________________

3. Указать способы культивирования вирусов парагриппа и методы их индикации: ________________________________________________________________________

________________________________________________________________________

4.Учесть РСК с парными сыворотками больного парагриппом:

1-я сыворотка крови больного
2-я сыворотка крови больного	1:10 1:20 1:40 1:80 1:160 1:320 к/с к/аг

Учет результата: _______________________________________________________

Вывод: ______________________________________________________________

5. Ознакомиться с диагностическими тест-системами для постановки ИФА при подозрении на парагрипп, РС – инфекцию.

6. Дополнить схему лабораторной диагностики парагриппа.

Исследуемый материал:
_____________метод	____________________метод	_________________метод
РИФ (Выявление …………)	1. Выделение и накопление вирусов:____________________ ____________________________	Выявление АТ в парных сыворотках крови: РСК
ПЦР (Выявление …………)	2. Индикация вирусов: ________ ____________________________	РТГадс ИФА
	3. Идентификация вирусов: ___ ___________________________

7. Изучить препараты для диагностики, профилактики и лечения парагриппа, кори, паротита, РС – инфекции (диагностические иммунные сыворотки, вирусные антигены, иммуноглобулины, вакцины, интерфероны).

8. Дать характеристику вакцинам.

Коревая вакцина ______________________________________________________

____________________________________________________________________

Паротитная вакцина ___________________________________________________

____________________________________________________________________