Тема: микроскоп и правила работы с ним. микроскопия биологических объектов. изготовление временных влажных микропрепаратов

Цели занятия:

1) Познакомиться с правилами охраны труда и техники безопасности при выполнении работы в лаборатории.

2) Изучить строение микроскопа и правила работы с ним; освоить методику приготовления влажного временного микропрепарата (лист элодеи); усвоить правила микроскопирования временных и постоянных микропрепаратов (на примере растительных и животных клеток).

3) Познакомиться с явлениями циклоза, плазмолиза и деплазмолиза в растительных клетках.

Базисные знания:

1) Из курса биологии средней школы Вы должны знать принципиальные черты строения клеток живых организмов; основные отличия в строении и жизнедеятельности растительной и животной клеток.

Учебная карта занятия:

А) Организационная часть.

Внимательно выслушав преподавателя, познакомьтесь:

· с программой дисциплины (кратко) и основными требованиями по подготовке к занятиям;

· с правилами поведения на кафедре и правилами охраны труда и техники безопасности при выполнении работы в лаборатории.

Б) Задания для учебно-исследовательской работы студентов.

Задание 1. Знакомство с устройством микроскопа и правилами работы с ним.

Устройство микроскопа:

- механическая часть – штатив, предметный столик, тубус, револьвер, макро- и микрометрические винты:

Штатив – массивное подковообразное основание, придающее микроскопу устойчивость. От середины основания отходит тубусодержатель, которому крепится трубка тубуса. На штативе укреплен предметный столик для размещения изучаемого микропрепарата. На боковых сторонах штатива располагаются макрометрический и микрометрический винты.

- оптическая часть – окуляр, объективы малого (х8 или х10) и большого (х40) увеличения:

Окуляр (от лат. oculus – глаз) находится в верхней части тубуса и обращен к глазу исследователя. Он представляет собой систему линз, заключенных в металлическую гильзу цилиндрической формы. По цифре на верхней стороне окуляра можно судить о кратности его увеличения (х7, х10, х15). На противоположной стороне тубуса находится револьвер (от лат. revolve – вращаю), в котором имеется три гнезда для объективов. Объектив представляет собой систему линз, заключенных в металлическую оправу. Объективы имеют различную кратность увеличения, которая обозначается цифрой на его боковой поверхности. Общее увеличение микроскопа равно произведению увеличений окуляра и объектива. Таким образом, при увеличении окуляра х7, а объективов х8 и х40, общее малое увеличение микроскопа составляет х56, большое х280.

- осветительная часть – зеркало, конденсор и диафрагма:

Зеркало расположено ниже предметного столика и способно вращаться, направляя пучок света на объект через отверстие в предметном столике. Зеркало имеет две поверхности: вогнутую и плоскую. Вогнутая поверхность сильнее концентрирует световые лучи и поэтому используется при более слабом освещении. Конденсор находится между зеркалом и предметным столиком, и состоит из 2-3 линз, заключенных в общую оправу. Пучок света, отбрасываемый зеркалом, проходит через систему линз конденсора. Меняя положение конденсора, можно изменять интенсивность освещенности объекта: более низкое положение конденсора уменьшает освещенность, более высокое напротив, увеличивает. Для перемещения конденсора служит винт, расположенный кпереди от микро- и макровинтов.

Правила работы с микроскопом:

- микроскоп устанавливают на рабочем месте против левого плеча на расстоянии 2-3 см от края стола.

- поворотом револьвера по часовой стрелке объектив малого увеличения устанавливают под тубус и с помощью макровинта опускают на высоту 0,5 см над предметным столиком;

- глядя в окуляр левым глазом, зеркало поворачивают к источнику света (лампочка, окно, специальный осветитель) до тех пор, пока поле зрения не будет ярко и равномерно освещено;

- препарат помещают на предметный столик покровным стеклом вверх;

- глядя сбоку, вращением макровинта опускают вниз объектив почти до самого препарата (расстояние около 2 мм);

- глядя в окуляр, вращением макровинта в обратную сторону медленно поднимают тубус, пока в поле зрения не сфокусируется объект. Запомните, что фокусное расстояние для объектива малого увеличения равно приблизительно 0,5-10 мм;

- рассмотрев препарат на малом увеличении, помещают изучаемые объекты в самый центр поля зрения. Помните, что микроскоп дает обратное изображение, поэтому, если необходимо рассмотреть часть объекта, расположенного справа, препарат смещают влево, и, наоборот, желая рассмотреть левую часть объекта, препарат перемещают вправо;

- поворотом револьвера устанавливают над препаратом объектив большого увеличения. При высоком расположении объектива медленно и осторожно опускают тубус до препарата. После этого осторожно поднимают тубус, пока в поле зрения не появится изображение объекта. Запомните, что фокусное расстояние для объектива большого увеличения равно примерно 1 мм;

- рассматривают объект, помогая себе микрометрическим винтом. Запомните, что микрометрический винт можно вращать вправо и влево (вперед и назад) не более чем на пол-оборота.

Задание 2. Приготовление и изучение временного влажного микропрепарата листа элодеи.

Приготовьте временный влажный микропрепарат листа элодеи и рассмотрите его, используя большое увеличение микроскопа.

Зарисуйте три клетки листа, отметив:

1. клеточную стенку;

2. хлоропласты;

Цитоплазму.

1.   2.   3.

Задание 3. Изучение явлений плазмолиза и деплазмолиза в клетках листа элодеи.

На приготовленный Вами препарат листа элодеи по периферии покровного стекла нанесите несколько капель гипертонического раствора NaCl.

Рассмотрите на большом увеличении микроскопа плазмолиз в клетках листа элодеи.

С помощью фильтровальной бумаги уберите солевой раствор и добавьте воду. Рассмотрите на большом увеличении микроскопа обратное явление – деплазмолиз в клетках листа элодеи.

Зарисуйте несколько клеток в состоянии плазмолиза, отметив:

1. клеточную стенку;

2. хлоропласты, сконцентрированные в центре клетки;