Этапы клинико-лабораторного исследования, общая характеристика.

Этапы лабораторного биохимического исследования:

• 1. преаналитический (до поступления биоматериала в лабораторию)

За проведение этого этапа отвечает врач-клиницист и врач-клиницист лаборант. Пациент должен придти в процедурный кабинет и в СТАБИЛЬНОМ МЕТАБОЛИЧЕСКОМ СОСТОЯНИИ(сутки не перенапрягаться, вести обычный режим сна и бодрствования, НАТОЩАК)

1-2 мл крови

У детей раннего возраста кровь берут из вены головы. После забора КРОВЬ НЕ ДОЛЖНА НАХОДИТЬСЯ ВНЕ ЛАБОРАТОРИИ.

• 2. аналитический(кровь забирается на сыворотку, в стерильную пробирку, для получения плазмы крови, также в стерильную пробирку с антикоагулянтом ЭТИЛЕНДИАНИНТЕТРААЦЕТАТ) в лаборатории кровь хранится в холодильнике или на полке при t=4°C.

Через час после нахождения в холодильнике или комнате, пробирка помещается в центрифугу при t=24°C, на 15-20 мин., со скоростью 3 тыс. оборотов.

Щедящий режим (снижение эритроцитов, подвергшихся гемолизу) 1,5 тыс. оборотов, разливается по пробиркам и анализируется.

• 3. постаналитический(выдача матевированного полученного заключения) Бланки анализов не стандартизированы, в бланке принято писать номы или референтные показатели.

9.Преаналитический этап лаб. биохимической диагностики, требования к нему.

Характеристика этапа смотри выше.

Требования(наличие): - врач клинической лабораторной диагностики

- лаборант(о средним мед.образованием), выполняющий ручной

метод анализа

- лаборант-техник

10. Постаналитический этап: выдача, оцененного заключения (врач)
Постаналитический этап включает в себя:

а) внутрилабораторную фазу, в рамках которой результат исследования оценивает лабораторный специалист на предмет его аналитической достоверности (по данным внутрилабораторного контроля качества), его биологической вероятности (правдоподобия), а также путем сопоставления с ранее проведенными аналогичными исследованиями или параллельно проведенными другими исследованиями у того же пациента (при цитологических исследованиях лабораторное заключение может содержать формулировку вероятного диагноза);

б) внелабораторную фазу, когда клиницист оценивает клиническую значимость информации о состоянии определенной сферы внутренней среды организма пациента, полученной в результате лабораторного исследования, и сопоставляет ее с данными собственного наблюдения за пациентом и результатами других видов объективных исследований.

В) принятие решения о дообследовании, назначении терапии и контрольных обследований.

На постаналитическом этапе отрицательное влияние на использование лабораторных результатов в клинических целях могут оказать:

- непринятие во внимание расхождения результатов параллельно проведенных близких по биологическим основам исследований у одного и того же больного;

- недоучет результатов внутрилабораторного контроля качества и выдача в клинику результатов с неприемлемыми погрешностями;

- перепутывание результатов анализов различных пациентов;

- использование для оценки результатов общих популяционных референтных интервалов без учета возрастных или иных особенностей пациента;

- неучтенные причины интерференции;

- несвоевременная доставка результатов исследований лечащему врачу;

- недоверие врача к лабораторным результатам или их игнорирование.

11.Иммуноферментный метод — лабораторный иммунологический метод качественного или количественного определения различных соединений, макромолекул, вирусов и пр., в основе которого лежит специфическая реакция антиген-антитело. Выявление образовавшегося комплекса проводят с использованием фермента в качестве метки для регистрации сигнала.

Любой вариант ИФМ содержит 3 обязательные стадии:

1. стадия узнавания тестируемого соединения специфическим к нему антителом, что ведет к образованию иммунного комплекса;

2. стадия формирования связи конъюгата с иммунным комплексом или со свободными местами связывания;

3. стадия превращения ферментной метки в регистрируемый сигнал.

Классификация ИФМ.

1. По типу реагентов, присутствующих на первой стадии ИФА, различают конкурентный и неконкурентный методы.

А) В конкурентном ИФА на первой стадии в системе присутствуют одновременно анализируемое соединение и его аналог, меченный ферментном и конкурирующий за центры специфического связывания с ним.

Б) Для неконкурентных методов характерно присутствие в системе на первой стадии только анализируемого соединения и специфичных к нему центров связывания.

2. Все методы ИФА делются на гомогенные и гетерогенные.

В основе гомогенного ИФА, применяемого, как правило, для определения низкомолекулярных субстанций, лежит ингибирования активности фермента при его соединении с антигеном или антителом. Активность фермента восстанавливается в результате реакции антиген-антитело.

Для гетерогенных методом характерно проведение анализа в двухфазной системе с участием твердой фазы – носителя, и обязательная стадия разделения иммунных комплексов от непрореагировавших компонентов (отмывка), которые находятся в разных фазах (образовавшиеся иммунные комплексы находятся на твердой фазе, а непрореагировавшие комплексы – в растворе). Гетерогенные методы, в которых формирование иммунных комплексов на первой стадии протекает на твердой фазе, называют твердофазными методами.

3. По принципу определения тестируемого вещества:

А) Прямое определение концентрации вещества (антигена или антитела) по числу провзаимодействующих с ним центров связывания. В этом случае ферментная метка будет находиться в образовавшемся специфическом комплексе АГ-АТ. Концентрация определяемого вещества будет прямо пропорциональна регистрируемому сигналу.

Б) Определение концентрации вещества по разности общего числа мест связывания и оставшихся свободными центров связывания. Концентрация определяемого вещества при этом будет возрастать, а регистрируемый сигнал снижаться, следовательно, в данном случае прослеживается обратная зависимость от величины регистрируемого сигнала. Характеристика компонентов, используемых в ИФА.