Опыт: Нарушение физиологических функций при острой кровопотере и их экспериментальная терапия

Лягушку децерибрируют, ножницами вырезают маленькое окошко в области грудины, обнажают сердце и подсчитывают число сердечных сокращений. Готовят препарат языка лягушки .Под малым увеличением микроскопа рассматривают и зарисовывают картину нормального кровообращения в сосудах языка. Затем выделяют и перерезают бедренные артерии на обеих задних конечностях. В период кровотечения каждые 5 минут подсчитывают число сердечных сокращений и наблюдают за изменением кровообращения в языке. После прекращения кровотечения с целью восстановления кровообращения перевязывают конечности выше перерезанных сосудов, а затем вводят в лимфатический мешок 2 мл 0,65% р-ра хлористого натрия. Под микроскопом наблюдают за восстановлением микроциркуляции в сосудах языка лягушки и подсчитывают число сердечных сокращений. Данные об изменении работы сердца заносят в таблицу. Для контроля параллельно проводят аналогичный опыт без введения физ.р-ра.

Показатели	Исходный фон	Время опыта	Патоген.терапия
5мин	10мин	15мин	20мин	5’ 10’
ЧСС
Кровообращение языка

Выводы:

В опыте были продемонстрированы 3 фазы патологического эксперимента, именно:

А) изучение исходного фона

Б) создание модели и изучение патогенеза

В) патогенетическая терапия

Установлено, что при острой кровопотери происходит кратковременное учащение частоты сердечных сокращений и спазмы периферических сосудов, что можно рассматривать как защитную реакцию на кровопотери.

Восстановление физиологических функций после введения физ.р-ра доказывает, что пусквым механизмом изменения физиологических функций является уменьшение объема крови, о чем можно судить по изменению амплитуды сердечных сокращений. Соответственно терапия начальных стадий острой кровопотери должна заключаться в восстановлении объема крови.

Опыт. Действие концентрированных кислот и щелочей на р-р белка в пробирке

В три пробирки вносят по 1 мл яичного белка. В опытные пробирки добавляют по 5 капель конц.кислоты и щелочи. Оценивают характер изменения белка в сравнении с контролем.

Выводы. Оба химических агента вызывают денатурацию белка – один из универсальных механизмов повреждения.

Повреждение белковых структур протекает по типу коликвации или коагуляции.

Опыт. Общая реакция организма на повреждающее действие механического фактора

Лягушка фиксирована крючком за нижнюю челюсть и подвешивается на штативе. Подсчитывается частота дыхания и частота сердечных сокращений, определяется время рефлекса по Тюрку. Для этого фильтровальную бумажку, смоченную сначала 0,25% раствором серной кислоты, кладут на тыльную часть стоны лягушки и отмечают время от момента наложения до одергивания лапки. Затем проводится проба с 1% раствором кислоты. Затем производится перелом интактной конечности и вновь исследуется вышеуказанные показатели через 1, 4, 8, 12, 16 минут после перелома.

Показатели	Исходный фон	Время после нанесения травмы
1мин	4мин	8мин	12мин	16мин
Частота дыхания
ЧСС
Время рефлекса по Тюрку	0,25% р-р
1% р-р

Опыт. Общее и местное повреждающее действие электрического тока на организм

Интактная лягушка фиксируется на штативе за нижнюю челюсть. Определяется частота дыхания и сердечных сокращений и время рефлекса по Тюрку. Электрический ток напряжением 220 В пропускается в течение 3-5 сек, приложив электроды на интактном бедре на расстоянии 5-7 мм друг от друга. И вновь определяют изучаемые показатели через 1, 4, 8, 12, и 16 мин. При проведении опыта обратить внимание на поведение лягушки сразу после травмы (местное действие электротока) и сравнить с первым опытом.

Раздел стресс (ОАС)

Опыт. Значение немедленной стадии стресса в формировании резистентности к гипоксии

Эксперимент проводят на 2 мышах. Одна – контрольная (меченная), другая испытуемая (без метки). Испытуемую мышь помещают в аквариум с водой (Т которой 30 градусов) на 5 мин. После этого каждую мышь помещают в банку с притертой крышкой, подвергая гипоксии. Определяют разницу времени – продолжительность жизни.

Выводы: под влиянием «купания» (эмоциональная нагрузка) повышается резистентность к гипоксии. Что , очевидно, связано с формированием немедленной фазы стресса.

Раздел резистентность

Раздел аллергия

Опыт. Анафилактический шок у морской свинки.

Для получения анафилактического шока животное сначала сенсибилизируют. Для этого подкожно вводят 0,01 мл лошадиной сыворотки. Состояние сенсибилизации наступает через 7-12 дней. Для воспроизведения анафилактического шока вводят разрешающую дозу 0,5-1,0 мл в/сердечно. Через 2-3 мин развивается картина анафилактического шока. Клинические симптомы фиксируют в результатах опыта. В выводах дают характеристику стадии аллергической реакции и их предположительные механизмы.

ЧАСТНАЯ ПАТОФИЗИОЛОГИЯ

Опыт №5. Образование внутрисосудистого пристеночного тромба

Методика. Лягушка децеребрируется. Готовится препарат брыжейки тонкого кишечника (см. практикум Н.И.Лосева, стр. 29). Приготовленный препарат помещают под малое увеличение микроскопа и отыскивают место слияния 2-х вен. Затем концом препаровальной иглы, смоченной водой, захватывают маленький кристаллик поваренной соли и под глаза через микроскоп помещают в развилку. Наблюдают за образованием пристеночного тромба и расстройством кровообращения при этом. Микроскопическую картину тромбоза зарисовать.

Сделать заключение, указав значение этой реакции для организма, условия, необходимые для тромбообразования и характерные черты этого процесса: 1) скорость, 2) плотность, 3) протяжённость тромба. Отразить в заключение изменения микроциркуляции ниже места тромбоза, отметить при этом:

- ширину просвета вен и капилляров;

- линейную скорость кровотока;

- маятникообразное движение крови.

Выводы. Повреждение сосудистой стенки в условиях замедленного кровотока приводит к патологической реакции – внутрисосудистому тромбозу. Характерными чертами этого процесса являются длительность образования тромба, распространённость его и расстройство микроциркуляции. Так, нарушение оттока крови при тромбозе приводит к развитию венозной гиперемии, которая проявляется расширением венул и капилляров, снижением линейной скорости кровотока, маятникообразным движением крови.

Опыт №6. Образование защитного гемостатического тромба при кровотечении из сосуда

Методика. У той же лягушки найти мелкую артерию и осторожно, под контролем глаза через микроскоп проколоть иглой стенку артерии. Пронаблюдать за кровотечением и образованием тромба. Зарисовать микроскопическую картину. Сделать заключение о характере возникающей при кровотечении реакции, отметив: 1) скорость, 2) интенсивность, 3) локализацию образующегося тромба, 4) значение его в данном случае.

Выводы. Образование гемостатического тромба – защитная реакция организма. Эта реакция характеризуется большой скоростью, интенсивностью образования тромба и локализацией его на месте повреждения.

Опыт №7. Жировая эмболия сосудов языка лягушки.

Методика. У лягушки после вскрытия грудной клетки обнажают сердце, осторожно снимают перикард, затем готовят препарат языка. Препарат помещают под малое увеличение микроскопа, находят артерии, вены, капилляры. Затем, приподняв лягушку на задние лапки, в полость желудочка сердца вводят 0,2 – 0,3 мл слегка подогретого вазелинового масла. Наблюдают за продвижением эмболов в просвете сосудов языка и развитием расстройств кровообращения. Обратить внимание на внешние признаки расстройства кровообращения в языке (цвет ткани, количество видимых сосудов, их ширину). Картину эмболии зарисовать. Сделать заключение, указав, к чему приводит попадание жира в сосудистое русло, и отразить местное расстройство кровообращения при этом процессе.

Выводы. Попадание жира приводит к эмболии. Эмболия артериального отдела сопровождается ишемией, которая проявляется сужением артериол, уменьшением числа функционирующих капилляров и снижением скорости кровотока. Внешние признаки ишемии – побледнение ткани вследствие уменьшения числа видимых сосудов и их ширины, а также уменьшение объёма этого участка. Ишемия всегда сопровождается болью.

Раздел: Воспаление.

Опыт №1. Сосудистая реакция на воспаление (опыт Конгейма)

Методика. У децеребрированной лягушки вскрывают брюшную полость. Пинцетом осторожно извлечь петлю тонкой кишки, приготовить препарат брыжейки. Под малым увеличением микроскопа в течение 40 минут (с перерывом в 3 минуты) наблюдают кровообращение в мелких сосудах (артериях, артериолах, капиллярах, венулах). Обращают внимание на изменение просвета сосудов, количество функционирующих капилляров, скорость кровотока в них, отмечают время появления в плазматическом пристеночном слое лейкоцитов в виде движущихся вдоль стенок сосуда прозрачных серебряных шариков. Дальнейшее наблюдение за эмиграцией лейкоцитов продолжают под большим увеличением микроскопа, покрыв зону воспаления покровным стеклом. Полученные результаты заносят в таблицу.

Показатели микроциркуляции	Время исследования в минутах
И.Ф.				20…
Просвет артериол	+	+ +	+ + +	++++
Число функционирующих капилляров	+	+ +	+ + +	++++
Линейная скорость кровотока	+	+ + +	++++	+ + +
Объёмная скорость кровотока	+	+ + +	+ + +	++++
Краевое стояние лейкоцитов	-	-+	+ +	+ + +	++++
Эмиграция лейкоцитов	-	-	+	+ +	++++
Маятниковое движение	-	-	-+	+	+ + +
Стаз	-	-	-	-	-+ +

Делают выводы, отметив:

1) какие факторы вызвали воспаление

2) какие формы нарушения периферического кровообращения наблюдались в процессе развития воспаления, какова их последовательность

3) какие стадии эмиграции лейкоцитов отмечались в опыте.

Вывод: травматизация и высыхание брыжейки приводит к развитию острого воспаления, проявляющегося местными нарушениями кровообращения, характеризующимися первоначальным спазмом сосудов (ишемии), артериальной гиперемией, венозной гиперемией и стазом, а также эмиграцией лейкоцитов, которая включает в себя 3 стадии: 1) краевое стояние; 2) выход через стенку сосудов; 3) движение в очаг воспаления.

Слизистую кишечника

Берут 4 пробирки и в каждую наливают по 1,0 мл 1% р-ра крахмала. Первая пробирка остается интактной (контроль), во вторую добавляют 2-3 капли слюны для демонстрации влияния на крахмал фермента амилазы, которая содержится в слюне, в 3 пробирку помещают интактный кусочек кишки, в 4 повергнутый воздействию радиации в дозе 1000 грей. Пробирки выдерживают 20-30 мин. При температуре 37 град. С (можно при комнатной).

Для оценки остаточного количества крахмала в каждую пробирку добавляют по 5 капель р-ра Люголя. Оценивают интенсивность окраски в крестах синий цвет – окраска 4+, отсутствие (-).

В выводах отметить, что опыт является эспериментальной моделью прямого повреждающего действия на щеточную каемку энтероцитов физических, химических, биологических факторов внешней среды. В клинике это возможно при инкорпорации радионуклидов (энтеральное поступление).

Опыт: Нарушение физиологических функций при острой кровопотере и их экспериментальная терапия

Показатели	Исходный фон	Время опыта	Патоген.терапия
5мин	10мин	15мин	20мин	5’ 10’
ЧСС
Кровообращение языка