Вирусы гепатитов А и Е. Лабораторная диагностика энтеральных гепатитов
Гепатиты с энтеральным (фекально - оральным) механизмом передачи (гепатиты А, Е и предположительно, F), передаются пищевым, водным и контактным путями. Возбудителями вирусных гепатитов с энтеральным путем заражения являются: HAV — Hepatitis A virus, относящийся к семейству пикорнавирусов, роду энтеровирусов (РНК-содержащий, локализуется в цитоплазме гепатоцитов); HEV — Hepatitis E virus, относящийся к семейству калицивирусов (РНК- содержащий, локализуется в цитоплазме гепатоцитов).
Маркерами вирусного гепатита А являются: HA-Ag, определяемый методами иммуноэлектронной микроскопии, радиоиммунного и иммуноферментного анализа, лантанидного иммунофлюоресцентного анализа; PCR — полимеразная цепная реакция, ISH — метод гибридизации in situ, Саутерн-блот. Анти-HAV Ig М — определяются до 6–8 месяцев от начала заболевания. Анти-HAV IgG — максимально регистрируются на 5–6-м месяце реконвалесценции. Многообразие клинических проявлений связано с неоднородностью вируса гепатита А: известно 6 генотипов и один серотип HAV. Маркерами вирусного гепатита Е являются: HE-Ag и анти-HEV Ig total, определяемые методами иммуноферментного анализа.
Основные методы:
∙ общий анализ крови (лейкопения или нормоцитоз с лимфоцитозом и
нормальной СОЭ);
. общий анализ мочи с определением уровня уробилина и желчных пигментов
(наличие уробилина в моче в преджелтушном и раннем периоде
реконвалесценции и желчных пигментов в желтушном периоде);
. биохимический анализ крови с определением содержания билирубина (при
желтушных формах увеличено за счет связанной фракции), активности
аланинаминотрансферазы (повышена не менее чем в 5 раз), тимоловой пробы
(увеличены показатели), протромбинового индекса (снижен, особенно при
острой печеночной энцефалопатии III-IV ст.):
. при наличии эпидемиологических данных серологическое определение
антигенов и антител к ВГА, ВГЕ с использованием высокочувствительных методов (ИФА, РИА) во фракциях IgM и IgG.
Дополнительные методы:
. определение содержания стеркобилина в кале;
. определение уровня холестерина, ?-липопротеидов, развернутой коагулограммы, активности щелочной фосфатазы, фруктозомонофосфатальдолазы;
. определение содержания ретикулоцитов в крови, осмотической
резистентности эритроцитов;
. обследование на герпесвирусную инфекцию (вирус простого герпеса,
цитомегаловирус, вирус Эпстайна-Барра);
. УЗИ печени и при необходимости компьютерная томография органов брюшной
полости;
. электроэнцефалография;
. определение уровня гемоглобина в плазме крови и моче при подозрении на
ВГЕ.
Безжелтушные варианты вирусных гепатитов протекают с симптомами интоксикации, увеличением размеров печени, но без желтухи. При стертых формах все клинические признаки минимально выражены. Субклинический (инаппарантный) вариант клинически не проявляется, но увеличена активность АлАТ в крови.
Так, при легком течении заболевания уровень общего билирубина не превышает 85 мкмоль/л, свободного - 25 мкмоль/л, при среднетяжелом - соответственно 85-150 мкмоль/л и до 51 мкмоль/л
101. Принципы цитологической диагностики злокачественных новообразований. Цитологические критерии злокачественности.
Лаб. д-ка злокачественных новообразований основана на морфологическом выявлении злокач. процесса и изучении молекулярно-биологических изменений, характерных для опухолевого роста.
Опухолевые маркёры либо продуцируются и секретируются клетками опухоли, либо высвобождаются в кровь др. клеточными структурами вследствие системного действия опухоли на организм. Маркёры: белки антигенов, ферментов, полипептидных гормонов и др. Опух. Маркёры могут повышаться и при доброкачеств. опухолях, воспалит. процессах, интенсивной пролиферации. Это снижает диагностич. ценность.
Цитологический метод основан на изучении клеточного материала, полученного различными способами из патологического очага. Проводится параллельно с гистологическими.
По способу взятия материала выделяют эксфолиативную, пункционную и эндоскопическую цитологию.
1.Эксфолиативная – основана на изучении физиологически слущенных клеток со слизистой оболочки (мокрота, моча, вагинальное отделяемое, выделения из соска, простатический сок, смывы из бронхов, мазки, соскобы).
2.Пункционная цитология изучает материал, полученный путём пункции (тонкоигольная аспирационная биопсия). Исследуются пунктаты лимфотических узлов , щитовидной, молочной железы, кости и др.
3.При эндоскопическом методе материал непосредственно из очага поражения, путём соскобов и приготовления мазков отпечатков (эндоскопия желудка, кишечника, бронхов и др.). Позволяет получить более информативный материал для исследования.
Цитологический метод позволяет установить истинный характер патологического процесса, определить степень выраженности пролиферации и дисплазии, выявить наличие злокачественного новообразования, оценить распространённость процесса, указать источник метастазирования.
Цитологические критерии злокачественности разделяются на общие, позволяющие отнести клетки к новообразованию злокачественного типа; частные, которые помогают определить гистологическую форму опухоли.
Общие критерии злокачественности клеточных элементов
1. Структурные особенности клетки и ядра.
2. Взаимоотношения между клетками, сохранившими межклеточные связи.
3. Непрямые критерии злокачественности.