При цитомегаловирусной инфекции

1. Маркеры активной репликации ЦМВ: ДНК-емия методом ПЦР. Обнаружение у новорожденных генома ЦМВ в крови и ликворе можно трактовать как признак ак­тивного периода внутриутробной ЦМВИ. Если ДНК вируса обнаружива­ется в клетках других биологических сред, то необходима оценка характе­ра иммунного ответа на АГ возбудителя.

2. Иммунологические маркеры активной ЦМВИ:

- Сероконверсия (выявление анти-ЦМВИ- IgM и /или анти-ЦМВ IgG у ранее серонегативных лиц). Обнаружение анти-ЦМВ IgM свидетельствует об активной ЦМВИ, чаще - первич­ной. Выявление анти-ЦМВ IgG не позволяет охарактеризо­вать период заболевания. Сте­пень авидности анти-ЦМВ IgG косвенно характеризуeт период и остроту инфекционного процесса: вы­явление низкоавидных анги-ЦМВ IgG (индекс авидности менее 40%)свидетельствует о текущей или недавно перенесенной ЦМВИ, а обнаружение высокоавидных антител (индекс авидности более 60%)по­зволяет исключить активную фазу заболевания, а у новорожденных свидетельствует об их материнском происхождении.

- 4-х кратное и выше нарастание титров анти-ЦМВ-lgG в «парных сы­воротках».

При этом для получения достоверных результатов и правильной их трактовки должны соблюдаться следующие правила:

-серологическое обследование должно проводиться до введения препаратов крови (плазма, иммуноглобулины и др.);

-серологическое обследование новорожденных и детей первых месяцев жизни должно проводиться с одновременным серологическим обследованием матерей (для уточнения генеза иммуноглобулинов - «материнские» или «собственные»);

-серологическое обследование должно проводиться методом «парных сывороток» с интервалом в 14-21 день одним и тем же способом в одном и том же диагностическом учреждении;

-оценка результатов серологических исследований должна проводиться с учетом возможных особенностей характера и фазы иммунного ответа;

Особо следует подчеркнуть, что сероконверсия (появление специфи­ческих AT у ранее серонегативного пациента) появляется позже клиниче­ских проявлений инфекции и выявления прямых маркеров репликации вируса (виремии, ДНК-емии или АГ-емии). Целесообразно также отме­тить, что у некоторых детей с врожденной ЦМВИ из-за развития иммуно­логической толерантности к АГ вируса цитомегалии возможен неадекват­ный специфический анти-ЦМВ иммунный ответ (инфицирование ЦМВ не сопровождается эффективным синтезом анти-ЦМВ-АТ).

II. При герпетической инфекции (HSV 1-2 типа):

- Для подтверждения герпетической этиологии поражения кожи содер­жимое везикул или соскоба с эрозированных или подозрительных участков исследуeтся прямым иммунофлюоресцентным методом для обнаружения антигена вируса простого герпеса.

- Для подтверждения герпетической этиологии генерализованной инфекции и менингоэнцефалита проводят обнаружение ге­нома вируса в крови и ликворе методом полимеразной цепной реак­ции (ПЦР). Однако неправильная техника забо­ра, нарушение условий хранения и транспортировки биологического материала в лабораторию отрицательно влияют на клиническую ин­формативность метода.

- Обнаружение специфических антител, относящихся к IgM. свидетельствует о наличие герпетической инфекции у новорож­денного, однако их появление в сыворотке крови нередко отстает от клинических проявлений заболевания.

- Уровень противогерпетических антител в сыворотке крови ребенка, относящихся к IgG. в неонатальном периоде не имеет диагностиче­ского значения. У детей первых 6 мес. выявляются материнские IgG к ВПГ.

При нарастании титров а- HSV 1-2 IgG через 3-4 недели даже при отсутствии а- HSV 1-2 IgM нельзя исключить врожденную инфекцию.

Для повышения значимости исследования можно определять авидность антител. Если индекс авидности менее 50%, то сыворотка содержит низкоавидные антитела, что указывает на первичную инфекцию.

- Определение уровня противогерпетических антител у матери не имеет диагностического значения для новорожденного.

111. При токсоплазмозе:

Серологические исследования в динамике включают 2 пробы с ин­тервалом в 2-4 недели: 4-х кратное повышение титров или положитель­ные антитела классов IgM и IgA - указывают на свежую инфекцию. Анти­тела класса IgM остаются до 6 месяца от начала заболевания; a IgG появ­ляются с 6-8 недели и чаще являются показателем нестерильного имму­нитета или хронического варианта токсоплазмоза. Редкие случаи актива­ции процесса (чаще хориоретинита) сопровождаются нарастанием анти­тел класса IgG.

В последнее время в диагностике токсоплазмоза используют полимеразную цепную реакцию (ПЦР).

При оценке серологических проб следует учитывать:

- клинические данные и показатели других лабораторных исследований;

- тот факт, что у здоровых детей и взрослых непрерывная продукция антител свидетельствует о нормальном нестерильном иммунитете;

- возможные несоответствия титров антител и клинических вари­антов заболевания (очень высокие титры у здоровых детей, отсутствие антител у новорожденных, недоношенных, детей первых месяцев жизни).

В связи с прохождением материнских антител через плаценту у новорожденных могут выявляться материнские а- Toxo IgG. К 4-6 мес. концентрация материнских антител падает и повышение уровня а- Toxo IgG ко второму полугодию жизни подтверждает врожденный токсоплазмоз.

V. Хламидийная инфекция.

1. Обнаружение возбудителя.Основным методом диагностики хламидиоза, вызванного Сl. Trachomatis, является РИФ. Исследуются соскобы из уретры, цервикального канала, коньюнктивы, а при врожденном хламидиозе также с задней стенки глотки. Результаты исследований выражают в виде положительного или отрицательного ответа.

2. Серологическая диагностика. Определение антител к Chlamydia trachomatis методом ИФА является вспомогательным исследованием, т.к. из-за низкой иммуногенности антитела образуются у 50% больных хламидийной инфекцией. Для установления диагноза необходимо одновременно определять антитела классов IgA и IgG. При сомнительном результате IgA необходимо дополнительно исследовать IgM.

IgM к Сl. trachomatis появляются в крови к концу первой недели заболевания. Диагностический титр 1:200 и выше. Максимальные концентрации определяются через 1-2 недели болезни. IgM к С. trachomatis исчезают через 2-3 мес.

IgG к Cl. trachomatis появляются через 15-20 дней от начала заболевания (диагностический титр 1:10-1:50), сохраняются длительно (годы), снижаются при излечении или затухании воспалительного процесса.

Очень ценным является определение антител класса IgA. Их выявляют через 10-14 дней от начала заболевания. После успешного лечения титр снижается ко 2-4 мес. Титр IgA C. trachomatis 1:50 трактуется как сомнительный, рекомендуется повторить исследование через 10-14 дней.

При подозрении на внутриутробную хламидийную инфекцию сроки обследования новорожденного: 1-3 сутки жизни, повторно – на 5-7 и 10-14 сутки. Отсутствие у новорожденных антихламидийных антител не исключает врожденный хламидиоз.

Аннотация