Характеристика красной крови
Для того чтобы владеть более детальной информацией о состоянии красной крови, следует вычислить несколько показателей, используя при этом полученные данные о содержании эритроцитов в крови (Э), гемоглобина по Сали (Нв), а также показатель гематокрита (Ht).
Задача 1
Вычисление цветового показателя крови
Цветовым показателем (ЦП) называют условную величину, характеризующую степень насыщения гемоглобином каждого эритроцита. Этот показатель можно вычислить, зная содержание гемоглобина в исследуемой крови и количество эритроцитов в 1 мкл этой же крови. Вычисление проводят по формуле, в числителе которой указана величина гемоглобина в грамм-процентах, умноженная на 3, а в знаменателе – две первые цифры величины количества эритроцитов в 1 мкл. Например, ЦП = 15 ´ 3/45 = 1.
Если ЦП ниже единицы, такое соотношение называют гипохромией, выше – гиперхромией. ЦП позволяет дифференцировать разные формы заболеваний красной крови.
Задача 2
Определение среднего объема эритроцита
(MCV – mean corpuscular volume)
Значение этого показателя получают при автоматическом подсчете количества эритроцитов. Средний объем эритроцитов можно также вычислить. Для вычисления необходимо знать показатель гематокрита (Ht) в процентах и число эритроцитов (Э) в 1 мкл. Вычисление проводят по формуле:
MCV = Ht,%, или мкм3/Э в 1 мкл (результат, мкм3).
Например:
Ht = 40% (или 400 000 000 мкм3);
Э = 4 500 000 в 1 мкл.
Тогда MCV = 400 000 000/4 500 000 = 400/4,5 = 88 мкм3.
Практически величину гематокрита надо умножить на 10 и разделить на число миллионов эритроцитов.
Показатель изменяется при обезвоживании организма и некоторых видах анемии.
Задача 3
Вычисление среднего содержания гемоглобина
В одном эритроците
(MCH – mean corpuscular hemoglobin)
Показатель отражает содержание гемоглобина в одной клетке. Среднее содержание гемоглобина в эритроците имеет такую же клиническую интерпретацию, как и цветовой показатель. Однако последний определяется в условных единицах, поэтому имеет отвлеченное значение. Хотя цветовой показатель по-прежнему входит в общий анализ крови, его определение на автоматических счетчиках не предусмотрено.
МСН рассчитывается путем деления содержания гемоглобина в г/л на количество эритроцитов в 1 л крови и измеряется в пикограммах (1 г = 1012 пг). В норме среднее содержание гемоглобина в одном эритроците составляет 24–33 пг.
Задача 4
Вычисление средней концентрации
Гемоглобина в эритроците
(MCHC – mean corpuscular hemoglobin concentration)
Вычисляется путем деления концентрации гемоглобина в крови в г/л на показатель гематокрита. Отражает насыщение эритроцита гемоглобином и в норме составляет 30–38 г/дл. В отличие от среднего содержания гемоглобина в эритроците (MCH) средняя концентрация гемоглобина в эритроците (MCHC) не зависит от среднего клеточного объема.
Современные гематологические автоматы получают величины MCH и MCHC расчетным путем по программе, заложенной в процессор.
Р а б о т а 7
ИЗУЧЕНИЕ РАЗЛИЧНЫХ ВИДОВ ГЕМОЛИЗА
Гемолизом называется разрушение эритроцитов с выходом гемоглобина в плазму крови. Гемолизированная кровь прозрачна, ее называют лаковой. Под микроскопом в ней не видно эритроцитов, так как они разрушены. Не выполняя своей основной дыхательной функции, гемолизированная кровь, кроме того, оказывает вредное воздействие на организм.
Для работы необходимы:штатив с пятью пробирками, пипетки, физиологический раствор, дистиллированная вода, 0,1%-ный раствор НС1, 5%-ный раствор аммиака, 5 мл цитратной крови любого животного (в пробирке).
Проведение работы. В штатив ставят 4 пробирки, в каждую из которых наливают по 3 мл соответственно физиологического раствора, дистиллированной воды, НС1 и раствора аммиака; в пятой пробирке – цитратная кровь. Во все четыре пробирки вносят пипеткой по две капли из пятой пробирки. Оставшуюся в пятой пробирке кровь помещают на 1 ч в морозильную камеру холодильника. Затем пробирку вынимают и оттаивают в стакане с горячей водой. Рассматривая содержимое всех пяти пробирок, сравнивают результаты.
Результаты работы и их оформление.Определите наличие или отсутствие гемолиза в каждой из пробирок. Опишите механизм гемолиза для каждого случая.
Р а б о т а 8
ИЗУЧЕНИЕ ОСМОТИЧЕСКОЙ
РЕЗИСТЕНТНОСТИ ЭРИТРОЦИТОВ
Под осмотической резистентностъю подразумевают способность эритроцита противостоять понижающемуся осмотическому давлению. При различных заболеваниях крови резис-тентность эритроцитов может меняться, поэтому определение ее границ имеет диагностическое значение в клинике.
Для работы необходимы:штатив с 18 пробирками, растворы NaCl убывающей концентрации (0,9%, 0,85, 0,8 и т. д. до 0,1%), пробирка с цитратной кровью любого животного, взятой не более чем за 3 ч до опыта, две пипетки.
Проведение работы. Пробирки последовательно нумеруют и ставят в штатив. Пипеткой наливают в каждую пробирку по 3 мл раствора NaCl в таком порядке: в первую пробирку – 0,9% раствор, во вторую – 0,85% и т. д. до 0,1% раствора. Затем пипеткой в каждую из пробирок добавляют по две капли цитратной крови. Через 5 мин смотрят результаты – наличие или отсутствие гемолиза.
Результаты работы и их оформление.Запишите, в какой из пробирок и при какой концентрации раствора NaCl отмечаются первые признаки гемолиза. Отметьте, при какой концентрации NaCl кровь полностью гемолизирована (стала «лаковой»). Определите верхнюю и нижнюю границы резистентности эритроцитов и сравните данные с нормой.
Р а б о т а 9
ОПРЕДЕЛЕНИЕ СКОРОСТИ
ОСЕДАНИЯ ЭРИТРОЦИТОВ (СОЭ)
Оседание эритроцитов – свойство стабилизированной цитратом натрия крови при отстаивании разделяться на верхний светлый слой плазмы и нижний красный слой форменных элементов, среди которых преобладают эритроциты. Скорость оседания прямо зависит от массы оседающих частиц, т. е. от размеров образующихся монетных столбиков и агглютинированных эритроцитов. Основным фактором, влияющим на образование монетных столбиков из эритроцитов, является белковый состав плазмы крови. Белковые молекулы снижают отрицательный заряд мембраны эритроцитов, который способствует их отталкиванию. На отрицательный потенциал влияют и другие факторы: рН плазмы (ацидоз снижает, алкалоз повышает СОЭ), содержание желчных кислот и пигментов (увеличение их количества ведет к уменьшению СОЭ), липиды крови (при увеличении содержания холестерина СОЭ увеличивается), увеличение вязкости крови замедляет СОЭ, наличие антиэритроцитарных антител ускоряет оседание. СОЭ также зависит от числа, формы и размеров эритроцитов.
СОЭ в норме меняется в зависимости от пола и возраста: у мужчин составляет 6–12 мм/ч, у женщин – 8–15 мм/ч, у новорожденных – 1–2 мм/ч, у пожилых людей обоего пола – 15–20 мм/ч.
Для работы необходимы:прибор Панченкова, стерильный скарификатор, часовое стекло, 5%-ный раствор цитрата Na, вата, спирт, йод.
Объект исследования – человек.
Проведение работы. Капилляром из прибора Панченкова (рис. 21) набирают раствор цитрата Na до метки 50 (Р) и выпускают раствор на часовое стекло. Прокалывают палец (прокол должен быть достаточно глубоким). Погружают в каплю крови кончик капилляра и, наклоняя капилляр, набирают в него (без пузырьков) кровь до метки О (К). Затем содержимое также выпускают в раствор цитрата Na на часовое стекло. Тотчас второй раз набирают из пальца кровь до метки О (К) и эту порцию тоже выпускают на часовое стекло. Быстро перемешивают кровь с цитратом натрия на часовом стекле. Наклоняя капилляр, набирают в него смесь до метки О (К) и закрывают пальцем верхний конец капилляра, чтобы раствор крови не вытек.
Упирают нижний конец капилляра в нижнее резиновое кольцо прибора Панченкова, затем вставляют верхний конец в резиновое кольцо сверху. Записывают время и ровно через 1 ч смотрят, какова высота столбика прозрачной плазмы, т. е. на сколько миллиметров за 1 ч осели эритроциты.
Результаты работы и их оформление.Напишите, чему равна СОЭ за 1 ч. Сравните полученные результаты с нормой.
Р а б о т а 10
НАБЛЮДЕНИЕ БУФЕРНЫХ СВОЙСТВ