Лабораторная диагностика сифилиса
Сифилис - инфекционная болезнь, характеризующуюся первичным аффектом (твердый шанкр), высыпаниями на коже и слизистых оболочках с последующим поражением различных органов и систем. Заражение происходит половым путем, реже контактно-бытовым, трансплацентарным путями и через кровь. Заболевания протекают циклически: первичный сифилис, вторичный, третичный. Без лечения может наступить четвертичный сифилис. Иммунитет после перенесенной болезни не развивается.
Бактериоскопический метод Исследуемый материал: - отделяемое твердого шанкра, пунктаты лимфатических узлов, материал из высыпаний кожного покрова
Типы микроскопических препаратов и методы окраски:
1) Микроскопия раздавленной капли в темном поле; 2) Иммунофлюоресценция (РИФ) мазка, окрашенного иммунной антитрепонемной сывороткой, меченной флюорохромом. ; 3) Импрегнация серебром по Морозову; 4) Окраска по Романовскому- Гимзе.
Серодиагностика сифилиса
Цели постановки отдельных серологических реакций при сифилисе
Используемые реакции | Цель | |
1. Скрининг (отборочные) | 2. Подтверждающие (диагностические) | 3. Контроль эффективности терапии |
Реакция микропреципитации | ИФА, РПГА, реже РИФ с тканевым штаммом T.pallidum (непрямой метод), и РИБТ (реакция иммобилизации бледных трепонем) для выявления антител | РПГА с трепонемным эритроцитарным диагностикумом.), |
Скрининг (отборочные реакции)
Обследуемые лица доноры, декретируемый контингент -лица подлежащие обязательному обследованию: медицинские работники, работники питания, детских дошкольных учреждений
Реакция микропреципитации
Исследуемый материал сыворотка крови
Диагностический препарат кардиолипиновый антиген – (вытяжка из из сердечной мышцы быка)
Варианты постановки качественный и количественный методы
Подтверждающие (диагностические) реакции
Реакция иммобилизации трепонем (РИБТ)
Исследуемый материал сыворотка крови
Диагностический препарат живые Treponema pallidum (культивируемые в яичках кролика)
Дополнительные ингредиенты комплемент
Принцип метода: при наличии антител в сыворотке крови пациента в присутствии комплемента происходит обездвиживание- иммобилизация трепонем
Оценка результатов производится по препарату "раздавленной" капли. Темнопольной микроскопией определяют процентное соотношение обездвиженных и подвижных трепонем. При иммобилизации от 0 до 20% реакция считается отрицательной; от 21 до 50% - слабоположительной; от 51 до 100% - положительной.
Реакция иммунного прилипания (РИП)
Исследуемый материал: сыворотка крови
Диагностический препарат убитые Treponema pallidum
Дополнительные ингредиенты комплемент, эритроциты I (0) группы крови человека
Принцип метода: при наличии антител в сыворотке крови пациента в присутствии комплемента происходит прилипание трепонем к эритроцитам т выпадение их в осадок
РИФ (непрямая) для определения антител
Исследуемый материал: сыворотка крови
Диагностический препарат убитые Treponema pallidum
Дополнительные ингредиенты иммунная ( антитела) сыворотка против Y глобулинов человека, меченая флюорохромом
Принцип метода: при наличии антител в сыворотке крови пациента они связываются с Treponema pallidum, с ними сязываются меченые флюорохромом антитела против Y глобулинов человека в ультрфиолете наблюдаем свечение Treponema pallidum
Реакция Вассермана
Тип реакции Реакция связывания комплемента Исследуемый материал сыворотка крови
Диагностические препараты:
1.Антигены: а) Кардиолипиновый Аг (КЛАГ) неспецифический антиген
б) Ультраозвученный трепонемный Аг ( ТАГ) специфический антиген
Другие ингредиенты реакции: 2. комлемент 3. гемолитическая система: эритроциты барана и атиэритроцитарная гемолитическая сыворотка 4.физиологический раствор
антиген | испытуемая сыворотка | контроли | ||
положительная сыворотка | слабоположительная сыворотка | отрицательная сыворотка | ||
КЛАГ | ||||
ТАГ | ||||
Физ. р-р |
Результат: Реакция Вассермана положительная, у обследуемого (больного) сифилис