Род Francisella, Francisella tularensis.
Методические указания
по теме 2.7: «Патогенные возбудители зооантропонозных
бактериальных инфекций»
Тема 2.7.1: « Иерсинии чумы. Франциселлы туляремии».
I. Иерсинии чумы.
1.Таксономия:
Отдел Gracillicutes,
Y.pestis. семейство Enterobacteriaceae,
(грам -) род Yersinia , вид Y.pestis.
2. Y.pestis вызывает чуму – природно-очаговое заболевание, которое относится к ООИ. В зависимости от входных ворот инфекции и локализации возбудителя в организме различают следующие клинические формы чумы: кожная, бубонная, кожно-бубонная, первично-септическая, вторично-септическая, первично-легочная, вторично-легочная, пушечная.
3. Материал для исследования: пунктат из бубона, содержимое пустулы и язвы, мокрота, кровь, испражнения, секционный материал.
4. Питательные среды и характер роста:
СПА –через 10-12 час. Колонии имеют вид глыбок с неровными краями. Через 24-48 час. образуют колонии R-формы: шероховатые, выпуклые, с мутно-белым центром, окружающей кружево; колонии напоминают смятые кружевные платочки. R-формы обладают высокой вирулентностью. Но могут образовывать и S-формы – гладкие, прозрачные колонии без кружевной зоны; они менее вирулентны.
СПБ –образуют пленку, от которой ко дну тянутся слизистые нити наподобие сталактидов; в последующем образуется хлопьевидный осадок, а бульон остается прозрачным.
Элективными средами являются казеиновые среды и гидролизаты кровяных сгустков.
5. Методы лабораторной диагностики:
1. Бактериологический – основной 3. Микроскопический
2. Биологический 4. Серологический
6. Тесты идентификации Y.pestis:
1. Проверяют однородность выделенной культуры, т.е. делают мазок со скошенного СПА, окрашивают по Граму и микроскопируют.
2. Проводят первичную идентификацию выделенной культуры по характеру её роста на среде Клиглера (Ресселя).
3. Посев на кроткий «пестрый» ряд Гисса и СПБ с двумя индикаторными бумажками → 28оС 24 часа.
4. Посев на среду Симмонса → 28оС 24 часа.
5. Посев на среду с мочевиной → 28оС 24 часа.
6. Проба на оксидазу.
7. Посев в 2 столбика полужидкого агара → при 22оС и при 37оС 24 часа.
8. Биопроба с чистой культурой – решающий тест идентификации Y.pestis.
9. Фаголизабельность чумным и псевдотуберкулезным фагами.
10. РА с противочумной агглютинирующей сывороткой.
11. Проба на чувствительность к антибиотикам: посев на АГВ→ 37оС 24
часа.
7. 1) Средства специфической терапии:
· антибиотики с учетом антибиотикограммы;
· серотерапия: противочумную антитоксическую сыворотку 50-100 мл в/уля или специфический иммуноглобулин;
· чумной бактериофаг (от 2 до 100 мл в/мышечно или внутрибубонно).
2) Средства специфической профилактики:
· живая чумная вакцина из аттенуированного штамма EV, которую можно вводить накожно, подкожно, перрорально и аэрозольно.
II. Франциселлы туляремии
1.Таксономия:
Отдел Gracilicutes, семейство не определено
род Francisella, Francisella tularensis.
2. Fr.tularensisвызываеттуляремию,в зависимости от входных ворот инфекции различают следующие клинические формы: бубонную, язвенно-бубонную, глазобубонную, ангинозно-бубонную, кишечную (абдоминальную), легочную, первично-септическую.
3. Материал для исследования:пунктат из увеличенного лимфоузла, слизь из зева, от-деляемое конъюктивы глаз, кожной язвы, мокрота, кровь, секционный материал, а также почва, вода, ил, солома, пищевые продукты и кровососущие насекомые.
4. Элективные среды и характер роста на них:
Среда Мак-Коя и Чепина (свернутая яичная среда) –колонии S-формы, мелкие, молочно-белого цвета.
Кровяно-цистеиновая среда (на основе агара Д) –характер роста как на среде Мак-Коя и Чепина.
Полужидкая желточная среда Дрожевкиной –растет на поверхности среды в виде пленки.
5. Методы лабораторной диагностики:
1) Серологический – основной 2) Кожно-аллергический
3) Бактериологический 4) Микроскопический 5) Биологический
6. Тесты идентификации Fr.tularensis
1. Определяют характер роста на среде Мак-Коя и Чепина.
2. Делают мазок по Граму, проверяя однородность выделенной культуры.
3. Посев на короткий «пестрый» ряд Гисса и среду Клиглера → 37оС 24 часа.
4. Посев на СПА → 37оС 24 часа (отсутствие роста).
5. РА с противотуляремийной сывороткой.
6. РИФ с чистой культурой.
7. Проба на чувствительность к антибиотикам на среде Мак-Коя и
Чепина→ 37оС 24 часа.
7. 1) Средства специфической терапии:
-антибиотики с учетом антибиотикограммы;
- вакцинотерапия: убитая туляремийная вакцина.
2) Средства специфической профилактики:
-живая туляремийная вакцина.