Лабораторная диагностика коклюша
Царство: Procaryota, Отдел: Gracilicutes, Семейство Alcaligenaceae, Род: Bordetella,
Виды: В. Pertussis-(коклюш), B. parapertussis (паракоклюш), B. bronchiseptica (трахеобронхиты)
Бордетеллы мелкие кокковидные грамотрицательные палочки с закругленными концами, более интенсивно окрашивающиеся биполярно. В. pertussis и B. parapertussis неподвижны, B. Bronchiseptica подвижна. Имеют микрокапсулу и пили. Облигатные аэробы, хемоорганотрофы, требовательны к питательным средам. Имеют термостабильный родоспецифический О-антиген, 14 поверхностных термолабильных капсульных К-антигенов, которые называются факторами.
Коклюш — острая инфекционная болезнь, характеризующаяся поражением верхних дыхательных путей, приступами спазматического кашля; наблюдается преимущественно у детей.
Возбудитель Bordetella pertussis
Исследуемый материал отделяемое слизистой зева ( откашливаемое пациентом или мазок с задней стенки носоглотки)
Bordetella pertussis коккобактерии Окраска по Граму Увеличение х1000 |
Методы лабораторной диагностикиВ первые дни болезни применяют бактериологический метод
В поздние сроки болезни применяют серологический метод метод
Посев на среды среда Борде-Жангу( кровяно-картофельно-глицериновый), агар КУА (казеиново-угольный агар). Растут очень медленно В. pertussis 2 суток, B. parapertussis 3-4 сут. Образуют мелкие колонии, похожие на капельки ртути. При боковом освещении колоний виден светящийся конус («парашутик»).
Способы посева: 1) методом «кашлевых пластинок». 2 изогнутым тампоном
Окончательная идентификация выделенной культуры проводится в серологической реакции агглютинации на стекле с агглютиногенами – адсорбированными факторными сыворотками :
Дифференциальные признаки видов рода Bordetella
Признак | Виды бордетелл | ||
B.pertussis | B.parapertussis | B.bronchiseptica | |
Наличие жгутиков | - | - | + |
Образование уреазы | - | + | + |
Проба на каталазу | - | + | + |
Рост на простом агаре | - | + | + |
Рост на среде Борде -Жангу: через 24-48 часов | - | + | + |
через 72-96 часов | + | + | + |
Агглютинация сыворотками к антигенам: 7 (родовой) | + | + | + |
1 (только B.pertussis) | + | - | - |
12 (только B bronchiseptica.) | - | - | + |
14(только B.parapertussis) | - | + | - |
Серодиагностика КОКЛЮША
Название реакции реакция агглютинации Исследуемый материал сыворотка крови
Диагностический препарат диагностикум содержащий антигены B.pertussis
Дополнительные ингредиенты физиологический раствор Диагностический титр ≥1:80 или нарастание
Сроки от начала болезни | Разведения сыворотки | |||||
1/10 | 1/20 | 1/40 | 1/80 | 1/160 | 1/320 | |
10-й день | + хлопья | + хлопья | + хлопья | - муть | - муть | - муть |
20-й день | + хлопья | + хлопья | + хлопья | + хлопья | + хлопья | - муть |
Результат: титр на 10 день 1:40 титр на 20 день 1:160 Вывод: увеличение титра свидетельствует о заболевании коклюшем
Специфическая профилактика коклюша в / м вакциной АКДС- состоящей из взвеси убитых коклюшных микробов и очищенных дифтерийного и столбнячного анатоксинов, адсорбированных на гидроксиде алюминия; по схеме с 3 месяцев 3 прививки через 1,5 месяца, ревакцинация через 2 года.
В состав вакцины входят в 1 мл 20 млрд. коклюшных микробных клеток, 30 флокулирующих единиц (ЛФ) дифтерийного и 10 антитоксинсвязывающих единиц (ЕС) столбнячного анатоксина.