Влияние внешних условий на спермиев вне организма животного 3 страница

Концентрацию сперми- е в (количество в 1 мл эякулята) наибо­лее точно определяют в счетной камере Горяева или другого автора (см. Практи­кум по акушерству). Это один из основ­ных показателей качества спермы, на который ориентируются при разбавле­нии эякулята.

Для определения концентрации спермиев жеребцов Г. В. Паршу- тин и Е. В. Румянцева сконструировали специальные стандарты. Они представ­ляют собой запаянные пробирки, содер­жащие жидкость, имеющую цвет, соот­ветствующий той или иной известной концентрации спермы. Для определе­ния концентрации исследуемую сперму наливают в пробирку с диаметром стан­дартных пробирок, устанавливают ря­дом с ней пробирки стандарта и подби­рают наиболее подходящий по виду стандарт, на котором отмечено количе­ство спермиев в 1 мл спермы.

Концентрацию спермиев в эякулятах хряка удобно определять оптическим стандартом С. И. Сердюка.

В настоящее время станции искусст­венного осеменения пользуются фото- электроколориметрическим методом, основанным не на прямом подсчете спермиев, а на учете степени оптичес­кой плотности спермы, т. е. мутности. Этот метод позволяет быстро (2—3 мин) определить концентрацию спермиев в сперме, но так как фотоэлектроколори- метр создан для анализа истинных ра­створов, а сперма является взвесью и в ней содержится большее или меньшее количество эпителиальных и других клеток, то результат нередко может быть неточным.

Для получения более точных резуль­татов М. П. Рязанский разработал пря­мой метод подсчета числа спермиев в сперме на скоростном (за 37—40 с) авто­матическом счетчике клеток — целлос- копе. С этой целью можно использовать и венгерский прибор «Пикоскель».

Определение количе­ства мертвых спермиев. В. А. Морозов предложил использовать красители, которые окрашивают спер­миев только мертвых и с колебательны­ми движениями. Самый простой способ окраски спермы быков следующий. Ис­следуемая сперма должна иметь кон­центрацию спермиев 0,2—0,4 млрд/мл, при более высокой концентрации эяку­лят разбавляют 3%-ным раствором цит­рата натрия до указанного показателя. Готовят 1—5%-ный раствор эозина во­дорастворимого на 3%-ном растворе ли­моннокислого натрия. На чистое обез­жиренное теплое (35 + 2 °С) предметное стекло наносят каплю спермы, добавля­ют 2—3 капли краски, подогретой до 30 °С, смешивают 2—4 с и делают три тонких мазка, которые высушивают. В каждом препарате подсчитывают 100— 150 спермиев, отдельно учитывая коли­чество с окрашенными и неокрашенны­ми головками.

Определение содержа­ния патологических форм спермиев и включений спермы у быков проводят в мазках, окрашенных азур-эозином или другими красителя­ми, где подсчитывают 100—200 сперми­ев и различные включения. Среди нор­мальных спермиев всегда находится бо­лее или менее значительное количество патологических форм. Чаще аномалии выявляются в хвостовой части сперми­ев, основании головки и шейки. С воз­растом к моменту физиологической зре­лости производителя количество ано­мальных спермиев уменьшается. Могут встречаться самые различные патологи­ческие формы спермиев: гигантского размера или карликовые, спермии с дву- мя-тремя головками, но общим хвос­том, с двумя хвостами, с укороченным хвостом, его деформацией или отсут­ствием, с цитоплазматической капель­кой, слишком большой или маленькой головкой и другие формы. Иногда встречаются спермии, лишенные голов­ки, но способные двигаться (рис. 29).

Л. А. Черномаз отмечает как признак патологических спермиев слабо выра­женный перфораторий или его отсут­ствие. Нарушение структуры перфора­тора и оболочки спермия — признак начальных изменений спермиев при их хранении.

Большое количество патологических спермиев свидетельствует о нарушении спермиогенеза, о вредном влиянии па­тологически измененных секретов при­даточных половых желез и мочевых пу­тей или, наконец, указывает на наруше­ние правил получения спермы и ее хра­нения во внешней среде от выделения до исследования.

В качестве конкретных причин обра­зования уродливых форм спермиев от­мечают: слабо развитые семенники; по­ражения семенника и придатка (гигант­ские и карликовые спермии); длитель­ные промежутки между коитусами, обусловливающие старение и распад спермиев в придатке (отдельные голов­ки, изолированные хвосты); половое ис­тощение производителя вследствие большой половой нагрузки или недоста­точного кормления (спермии с цито- плазматическими капельками в области шейки, тела и хвоста — незрелые спер­мии). Чем ближе к головке расположена капелька, тем моложе спермий.

Большое значение в образовании па­тологических форм спермиев придается нарушению терморегулирующей функ­ции мошонки.

Закручивание хвостов спермиев в сторону происходит при смешивании спермы с гипотоническим раствором (неправильная подготовка разбавите­лей, попадание воды).

При микроскопическом исследова­нии спермы выявляются следующие включения: клетки плоского, переход­ного эпителия, клетки семенных ка­нальцев (зернистые); форменные эле­менты крови — эритроциты и лейкоци­ты; гиалиновые шары, круглые или овальные, иногда слоистые и напомина­ющие зерна крахмала, амилоидные тельца, сильно блестящие — лецитино- вые зернышки, кристаллы спермина и др. Если примесей в сперме мало, это считается нормой. Если примесей мно­го, необходимо выявить их источник и причину.

Предельные количества патологи­ческих спермиев показаны в таблице 6. Содержание патологических форм спермиев (1Чп) в процентах, коэффици­ент (индекс) патологии (Кп) и содержа­ние включений спермы (N6) в процен­тах вычисляют по формулам

N„=^100, Кп = -2-,

Дъ-^100,

где Я—количество патологических форм спер­миев; Н— количество нормальных форм сперми­ев; В — количество включений спермы.

Значительное количество патологи­ческих спермиев следует безусловно расценивать как признак наступающей импотенции.

Дегидрогеназная активность спермы быка определяется скоростью обесцве­чивания метиленовой сини в капилля­рах или в пробирках (метод Н. П. Шер- гина). Первый вариант получил более широкое распространение в практике. На предметное стекло, подогретое до 30—37 °С, наносят каплю спермы и до­бавляют теплой пипеткой каплю 0,01%-ного раствора метиленовой сини, подогретого до 30 °С. Капли тщательно перемешивают и набирают смесь в теп­лую (30—37 °С) стеклянную трубку дли­ной 5—6 см с внутренним диаметром 0,8—1 мм, чтобы высота столбика была 2—3 см. Заполненную смесью трубочку

1 2

7 8

/ 2

9 9 © 0 © 6° 00

3 ** 5

9 900969 9

₃ Ь 5 6

9 /Р Н

1 2

кладут горизонтально на лист белой бу­маги в термостат с температурой 37 ± 0,5 °С. Записывают время начала исследования и окончания обесцвечи­вания метиленовой сини. Дегидрогеназ- ную активность спермы (Да) в условных единицах вычисляют по формуле

Да = Пс/С/10,

где Пс — подвижность спермиев, баллы; /—вре­мя обесцвечивания метиленовой сини в опыте, мин; С — концентрация спермиев, млрд/мл; 10 — постоянный коэффициент.

Все исследования спермы проводят при строгом соблюдении действующих стандартов и инструкций по искусст­венному осеменению сельскохозяй­ственных животных.

В результате исследования могут быть установлены следующие недостатки:

асперматизм (Азм) — отсутствие спермы;

олигосперматизм (Озм) — малый объем эякулята;

аспермия (А) — отсутствие в сперме спермиев;

олигоспермия (О) — недостаточное число спермиев в эякуляте;

некроспермия (Н) — мертвые спер­мии;

тератоспермия (Т) — патологические спермии и др.

Производителя можно использовать для естественного или искусственного осеменения, если его сперма отвечает требованиям действующей инструкции по осеменению животных.

Биологическая проба спермы. Решаю­щее значение для оценки спермы имеет определение оплодотворяющей способ­ности спермиев. Установлено, что она может быть выявлена только в отноше­нии определенной группы самок, нахо­дящихся при конкретных условиях су­ществования и времени осеменения. Оплодотворение зависит от степени родства самки и производителя, состоя­ния их здоровья, упитанности, качества кормления и др. Поэтому для определе­ния оплодотворяющей способности спермы лучше всего использовать здо­ровых ремонтных телок. Правильно по­ставленная биологическая проба спер­мы на здоровых животных — самый на­дежный критерий ее оценки. Все другие методы являются только косвенными, т. е. они позволяют лишь условно судить об оплодотворяющей способности спермы. Сперма считается нормальной, если оплодотворяемость от первого осе­менения составляет не менее 70—75 %. Быки с пониженной оплодотворяющей способностью спермы дают маложиз­ненное потомство, и их нельзя исполь­зовать ни при искусственном, ни при ес­тественном осеменении.

Рис. 29. Патологические формы спермиев быка(по Бретшнейдеру): А — колпачок головки: 1 — нормальный; 2 — широкий; 3 — гранулированный; 4 — косой; 5— маленький; 6— неприк­репленный; 7— уродливый; Б — форма и величина головки: 1—3— нормальная; 4— узкая; 5— грушевидная; 6 — лан­цетовидная; 7— лопатовидная; 8— колбовидная; В — основание головки и шейка: / — нормальная; 2— прямая; 3 — су­женная; 4— узкая; 5 — широкая; 6— симметричная; 7— несимметричная; 8— с изломом; 9 — с перегибом; 10 — с раз­ломом; 11 — отсутствие головки; У—тело: / — нормальное; 2— короткое; 3— широкое; 4— тонкое; 5 —уродливое; 6 — разрывы; 7— перегибы; 8— осевой тип; 9— расщепленное; Д— хвостик: 1 — капелька на шейке; 2— на теле; 3— на хвостике и 4— при изгибах хвостика; 5 — петлеобразный; 6— в форме завитка; 7— хвостик вокруг головки; 8— руди­ментарный; Е— уродливые спермии: / — одноголовый двухвостый; 2— одноголовый треххвостый; 3— одноголовый четыреххвостый; 4—двухголовый двухвостый; 5— двухголовый четыреххвостый

Наблюдения показали, что даже все­стороннее лабораторное исследование спермы иногда не отражает ее качеств. От некоторых жеребцов с прекрасными лабораторными показателями спермы оплодотворяемость кобыл оказывалась низкой, если интервалы между садками были больше 48 ч. Осеменение кобыл через 24—36 ч этими же производителя­ми давало резкое повышение плодови­тости. Этот факт X. И. Животков объяс­няет неодинаковой выживаемостью
спермиев отдельных производителей в половом аппарате матки и предлагает применять у ценных производителей «биологическую пробу», заключающу-

Для разбавления спермы используют специальные среды, создающие следую­щие преимущества:

получается большой объем спермы, что имеет важное практическое значе­ние для интенсивного использования ценных производителей;

в сперме, смешанной с некоторыми разбавителями, спермии переходят из активного в анабиотическое состояние;

удлиняется срок переживаемое™ спермиев вне организма вследствие за­мены секретов придаточных половых желез искусственной средой и ослабле­ния концентрации в сперме токсичес­ких веществ, бактериостатического дей­ствия добавляемых в разбавитель анти­септиков и других веществ.

Перед разбавлением эякулята опре­деляют подвижность и концентрацию спермиев. Эти показатели должны удов­летворять требованиям инструкции, по­скольку они являются основой для оп­ределения степени разбавления, кото­рая выражается отношением, показыва­ющим объем среды, добавляемой на каждый миллилитр эякулята, и имеет определенные пределы у каждого вида производителей (табл. 7). Предельную степень разбавления спермы можно вы­числить по формуле

Ср = 1 :(СПэПо-0,01 - Од: :КСппд- 1,2-1),

где Ср — предельная степень разбавления эякуля­та; С — концентрация спермиев в разбавляемом эякуляте, млрд/мл; Пэ — подвижность спермиев в эякуляте, баллы; По — минимально допустимая подвижность спермиев перед осеменением, бал­лы; 0,01 — поправочный коэффициент подвиж­ности спермиев; Од — объем дозы разбавленной спермы, мл; КСппд — минимальное количество спермиев с прямолинейным поступательным движением в дозе, млрд; 1,2 — поправочный ко­эффициент для КСппд.

юся в осеменении кобыл через различ­ные промежутки времени. На основа­нии учета итогов этих осеменений уста­навливают индивидуальную нагрузку.

Е СПЕРМЫ

Эякулят разбавляют, добавляя по частям необходимое количество раз­бавителя и тщательно перемешивая жидкость. Обычно сперму быка раз­бавляют в 10 (1 : 9)—15 (1: 14) раз. В не­которых странах разбавляют сперму 1 : 20 : 25 : 50. Отдельные специалисты рекомендуют разбавлять сперму быка 1 : 100 и даже 1 :200. Такое различие в степени разбавления объясняется раз­ным подходом к определению количе­ства спермиев, необходимого для опло­дотворения. Одни авторы считают, что в дозе для осеменения одной коровы дол­жно быть минимум 10—15 млн живых спермиев, другие — 25—50 млн.

Состав сред меняется в зависимости от вида животных и способа хранения спермы. Разбавляют эякулят не позднее чем через 30 мин после его получения.

Впервые для разбавления спермы И. И. Иванов использовал физио­логический раствор хлорида натрия (0,9%-ный). Однако он оказался мало­пригодным для этой цели, так как его вязкость меньше вязкости спермы, по­этому спермии в ней быстро оседают: рН физиологического раствора колеб­лется в пределах 5,6—6,2 и даж е ниже, так как дистиллированная вода погло-

7. Минимальные показатели спермы, допускаемой к разбавлению и хранению, и степень ее разбавления Произво­дитель Концен­трация спермиев, млрд/мл Подвиж­ность спермиев, баллы Степень разбавления мини­мальная макси­мальная Бык 0,7 1 : 9 1 : 31 Баран 1,0 1 : 1 1 : 3 Хряк 0,15 1 : 1 1:9 Жеребец 0,15 1 : 1 1 : 3 Петух, 2,0 1 : 1 1 : 2 индюк         Гусак 0,4 1 : 1 1 : 2

щает из воздуха углекислоту. Затем предложили готовить физиологический раствор с учетом видовых особенностей спермы; применялся подщелоченный сахарофизиологический раствор хлори­да натрия. Были предложены: ГФО — глюкозофосфатный разбавитель для овец; ГСЛ — глюкозосульфатный разба­витель для лошадей; ГТС —глюкозо- тартратный разбавитель для свиней; ГТКр — глюкозотартратный разбави­тель для кроликов; ГТСо — глюкозотар­тратный разбавитель для собак, желати­нированный и другие разбавители.

К. Н. Кржишковский и Г. Н. Павлов (1927) установили важность включения в разбавитель лецитина и желтка кури­ного яйца для выживаемости спермиев. На основе этого с первой половины XX столетия широкое распространение получили глюкозоцитратно-желточные среды.

В настоящее время для краткосроч­ного хранения спермы применяют раз­ные среды (табл. 8).

8. Среды для краткосрочного хранения спермы Сперма компоненты среды быка барана жеребца хряка петуха и индюка гусака Сокращенное название сред ГЦЖ ГЦЖ ЛХЦЖ ГХЦС ВИРГЖ-2 внитип Компоненты:             вода дистиллированная, мл глюкоза, г 0,8 — — — фруктоза, г — — — — 1,8" 0,ЗГ лактоза, г — — — — — цитрат натрия, г 1,4 2,8 0,089 0,38 — 0,57 натрий глютаминовокислый, г — — — — 2,8 1,67 гидрокарбонат натрия, г — — 0,008 0,05 — — сульфат аммония, г — — — 0,18 — — хелатон (трилон Б), г — — 0,1 0,26 — — желток куриного яйца, мл 1,6 — — — спермосан-3, тыс. ед. 75-90 50-75 25-30 25-30 — — Температура хранения разбавленной 2-5 2-5 2-5 16-20 2-4 — спермы, °С             Максимальная продолжительность 3-4 0,5 хранения, ч * Если нет фруктозы, можно использовать глюкозу в тех же дозах.

Все компоненты для приготовления разбавителей должны быть химически чистыми, проверенными на токсич­ность и соответствовать ГОСТу, указан­ному в инструкции по искусственному осеменению. Компоненты хранят в су­хом темном месте в плотно закрытых банках. Биологический контроль обяза­телен для новой серии каждого препара­та, особенно антибиотиков, добавляе­мых в среду, так как некоторые из них могут оказаться губительными для спер­миев. Разбавители необходимо готовить только на дистиллированной воде. В ней нет хлористых соединений, разрушаю­щих оболочку спермиев.

Глюкоза, фруктоза, лактоза, сахароза и гликокол (аминоуксусная кислота) снижают электропроводность раствора, предупреждая агглютинацию спермиев, связанную с потерей ими электрических зарядов. Глюкозу и фруктозу спермии могут использовать как источник энер­гии.

В сперме быка и барана при хранении начинают образовываться молочная кислота и другие продукты обмена. Для их нейтрализации, задержки набухания коллоидов цитоплазмы, оболочки спер-
миев, уменьшения их проницаемости вводят в состав разбавителей лимонно­кислый натрий (цитрат), являющийся естественным буфером спермы (его рН 7,8—8,0). Поскольку в сыворотке спер­мы жеребца и хряка содержится много солей, то в разбавитель для спермы та­ких животных лимоннокислый натрий не вводят или добавляют его в очень не­значительном количестве.

Один из первых факторов внешней среды, действующих на свежую спер­му, — температура. При ее понижении (особенно ниже 18 °С) спермии подвер­гаются температурному шоку и гибнут. Для ослабления шока в разбавитель вво­дят желток куриного яйца, содержащий около 7 % неокисленного лецитина. Он одновременно является питательным веществом, предохраняющим расходо­вание липидов цитоплазмы спермиев. Яйца должны быть обязательно свежи­ми, с ярко окрашенным желтком, полу­чены от здоровых кур, которым предос­тавляют полноценные корма и доста­точное движение. В хорошем яйце со­держатся полный набор незаменимых аминокислот, углеводы, жироподобные вещества, пигменты, микроэлементы, витамины. Яйца с загрязненной скорлу­пой негодны. На поверхности скорлупы выявляли до 13 видов микробов и 7 ви­дов плесневых грибов. Поэтому перед использованием яиц скорлупу их необ­ходимо облучать бактерицидными лам­пами или протирать спиртовыми тампо­нами.

Зарубежные ученые обнаружили в сперме быка белок семиналплазмин, сила действия которого на микрофлору соответствует пенициллину, стрептоми­цину или тетрациклину. При разбавле­нии эякулята концентрация семинал- плазмина снижается и соответственно уменьшается его защитное действие. Для предупреждения отрицательного действия микробов на спермиев в среду добавляют пенициллин, стрептомицин и белый растворимый стрептоцид или смесь из перечисленных препаратов, выпускаемую под названием «спермо- сан-3», в рекомендуемых дозах (см. табл. 8 и 10). Опыты показали, что до­бавление в среду стрептоцида положи­тельно сказывается на жизнеспособнос­ти спермиев, но не приостанавливает рост микробов. Пенициллин задержи­вает рост микробов, но не повышает оп- лодотворяемости. Стрептомицин, угне­тая рост микробов, в больших дозах от­рицательно влияет на спермиев.

Имеются работы, свидетельствующие о неце­лесообразности введения каких-либо антибиоти­ков в сперму. Ни антибиотики, ни сульфанил­амидные препараты в рекомендуемых дозах не прекращают размножения микроорганизмов, обусловливающих глубокие морфологические из­менения спермиев.

Некоторые авторы предлагают вводить в сре­ды для спермы хряков и быков окситоцин, карба- холин и другие препараты для усиления моторики матки и повышения оплодотворяемости самок. Специальные исследования показали, что добав­ление окситоцина или карбахолина к разбавлен­ной сперме не оказывает никакого эффекта на продвижение спермиев в половых органах сви­нок, а также на их оплодотворяемость. Окситоцин усиливает перистальтические, а не антипери­стальтические сокращения матки, способствую­щие передвижению спермиев. Нецелесообразно вводить в среду для спермы хряка в качестве загус­тителя поливиниловый спирт, он снижает эффек­тивность искусственного осеменения.

Среду нужно готовить с учетом того, что ее компоненты делятся на термоус­тойчивые, которые можно стерилизо­вать физическими методами (кипяче­ние, автоклавирование), и термочув­ствительные (желток куриного яйца, глицерин, спермосан), не подвергаемые стерилизации. Сначала растворяют в воде термоустойчивые компоненты и 10 мин стерилизуют в кипящей водяной бане. Остужают до 30—35 °С и добавля­ют термочувствительные компоненты. Затем среда находится при указанной температуре не более 4 ч в водяной бане или термостате. Остатки неиспользо­ванных сред выбрасывают.

Перед разбавлением среда и сперма должны быть одинаковой температуры.

Дляоценки качества сре- д ы на чистое предметное стекло поме­щают каплю проверенной на активность спермы и к ней добавляют 2—3 капли среды, пробу накрывают покровным стеклом и исследуют под микроскопом. Понижение активности спермиев — свидетельство непригодности, а отсут­ствие заметных изменений в сперме слу­жит основанием для использования раз­бавителя.

Хороший разбавитель для спермы быка, жеребца, хряка и других произво­дителей — свежее молоко. Как показали исследования Н. Н. Михайлова, молоч­ная среда обладает большой буфернос- тью, понижает степень раздражения спермиев, увеличивает вязкость разбав­ленной спермы и имеет концентрацию водородных ионов (рН), сходную с ма­точной слизью. Молоко — самая биоло­гически полноценная среда для сперми­ев, поэтому сперму им можно разбав­лять без опасения. Молочный разбави­тель повышает переживаемость спер­миев, их оплодотворяющую способ­ность, которая при температуре О °С со­храняется до 7 сут. Поэтому оплодотво­ряемость коров, кобыл при применении молочного разбавителя выше, чем при употреблении желточно-цитратных разбавителей. В качестве разбавителя можно применять и сухое молоко, взя­тое в количестве 10 г на 100 мл дистил­лированной воды.

Из многочисленных сред для разбав­ления и хранения спермы хряков при температуре 16—20 "С в настоящее вре­мя используют глюкозохелатоцитратную и глюкозохелатоцитратносульфатную. Один из основных компонентов этих сред — хелатон (двунатриевая соль эти- лендиаминтетрауксусной кислоты, СшНиСУ^аз^). Н. Т. Плишко устано­вил, что хелатон, снижая обменные про­цессы в сперме, увеличивает срок пере­живаемое™ спермиев и предохраняет их акросому и оболочку от разрушения. Он тормозит размножение микробов, а на некоторые из них оказывает бактериоли- тическое действие. Наибольшая пережи­ваемость спермиев хряка отмечается при разбавлении спермы 1: 3. Уменьшение и увеличение степени разбавления снижа­ют переживаемость спермиев.

При осеменении свиней фракцион­ным методом А. В. Квасницкий предло­жил ряд сред, назначение которых — за­полнить полости рогов матки, поэтому их называют заполнителями: глюкозо- солевой (30 г глюкозы и 4,5 г ШС1 на 1 л дистиллированной воды); солевой (9 г ТЧаС1 на 1 л дистиллированной воды); молочный (свежий обрат). Эти заполни­тели оказывают на слизистую оболочку матки более благоприятное действие, чем желточно-цитратные и другие раз­бавители.

В Болгарии (Братанов, Иосифов, Стоянов) предложен медовый разбави­тель для спермы жеребца, быка и барана. Авторы установили, что 7%-ный вод­ный раствор меда очень благоприятно действует на спермиев. Добавление в разбавители для спермы быка и барана фосфатов и сульфатов улучшает их каче­ство. Авторы не рекомендуют пользо­ваться медом с горьким вкусом.

Есть много сообщений о примене­нии самых разных разбавителей. Во всех случаях приготовления и исполь­зования сред для спермы необходимо строго руководствоваться действующей инструкцией по искусственному осе­менению соответствующего вида жи­вотных.

ХРАНЕНИЕ СПЕРМЫ

При хранении неразбавленной и раз­бавленной спермы вне организма изме­няется плазма и нарушается акросом- ный аппарат спермиев. Поэтому чем дольше удастся сохранить жизнеспособ­ность спермиев вне организма животно­го, тем шире можно применять метод искусственного осеменения, так как за­пасы спермы позволяют без задержки осеменять маток в любое время года, а главное — дают возможность перево­зить сперму на различные расстояния и осеменять маток в хозяйствах, располо­женных в десятках и даже тысячах кило­метров от станции искусственного осе­менения.

Существующие способы хранения спермиев вне организма основаны на их физиологической способности перехо­дить в состояние анабиоза, в котором они находятся, продвигаясь по каналу придатка тестикула. В естественных ус­ловиях анабиоз спермиев вызывается повышенным содержанием угольной кислоты (кислотный анабиоз). Следова­тельно, в соответствующих условиях можно хранить сперму вне организма при плюсовой температуре.

Исследования показали, а практика подтвердила, что температура — надеж­ный регулятор скорости обмена веществ в сперме. Длительность хранения спер­миев определяется качеством их анаби­оза, который бывает неполным и пол­ным. При неполном анабиозе, когда об­мен веществ в спермияхтолько ослабля­ется в той или иной степени, возможно только краткосрочное их хранение (1 — 3 сут). При полном анабиозе обмен ве­ществ почти прекращается, благодаря чему создается возможность длительно­го хранения спермиев (на протяжении нескольких лет). Полный анабиоз дос­тигается при замораживании спермы.

Кратковременное хранение спермы при комнатной температуре (16—20 °С). Для хранения спермы хряков широко ис­пользуют хелатные среды (см. табл. 8). Хелатон (трилон Б) — сокращенное на­звание двунатриевой соли этилендиа- минтетрауксусной кислоты. Это соеди­нение при комнатной температуре инак- тивирует ферменты, подавляя таким об­разом обмен веществ у спермиев. Действие хелатона снимается, если спер­ма оказывается подогретой до температу­ры тела животного и спермии начинают двигаться. Это происходит после введе­ния спермы, разбавленной хелатной сре­дой, в половые органы самки.

Известны также среды с угольной кислотой для хранения спермы быков, баранов и хряков при комнатной темпе­ратуре, но они не получили широкого распространения.

Кратковременное хранение спермы при температуре тающего льда (2—5 °С). Такая температура пригодна для хранения спермы быка, барана и жеребца. Темпе­ратура, близкая к 0 °С, значительно удли­няет переживаемость спермиев и замед­ляет обменные процессы; дыхание и фруктолиз спермиев быка и барана тор­мозятся в 20—25 раз по сравнению с ин­тенсивностью этих процессов при темпе­ратуре тела животных (Н. П. Шергин).

Для охлаждения спермы используют холодильник или термосы различной конструкции, в которых температура до 2—5 °С. Применение желточных разба­вителей значительно повышает устой­чивость спермиев к температурному шоку, но полностью не устраняет его. Поэтому сперму необходимо охлаждать медленно и постепенно. После разбав­ления сперму быка выдерживают при комнатной температуре (18—20 °С) 20— 30 мин. Затем ампулы, флаконы или пробирки со спермой обертывают не­большим слоем ваты, помещают в поли­этиленовые мешочки и кладут в холо­дильник или термос со льдом. Мешочки со спермой укладывают так, чтобы они сверху были закрыты кусочками льда, что обеспечивает необходимую темпе­ратуру (2—5°С). При такой методике хранения сперму быка используют для осеменения коров максимум 3 сут с ак­тивностью не ниже 7 баллов, хотя ее жизнеспособность сохраняется более длительное время.