Качественный химический анализ биологически активных веществ
Реакции на стероидную структуру основаны на способности стероидного ядра сердечных гликозидов и стероидных сапонинов подвергаться дегидратации под действием кислотных реагентов (уксусный ангидрид, конц. серная кислота, трихлоруксусная кислота) с образованием окрашенных комплексных соединений (реакция Либермана-Бурхарда).
Реакции на ненасыщенное лактонное кольцо сердечных гликозидов основаны на способности ненасыщенного лактонного кольца легко окисляться полинитросоединениями (нитропруссид натрия, пикриновая кислота) в щелочной среде с образованием окрашенных в желтый или красный цвет продуктов реакции.
Реакции на углеводную часть молекулы гликозида основаны на способности моносахаридов углеводной цепи образовывать окрашенные комплексы с различными реактивами. Моносахара, входящие в состав гликозида вступают во все цветные реакции, свойственные углеводам (с раствором Феллинга, серебряного зеркала).
Фенольные гликозиды дают:
- растворимые в воде феноляты с гидроксидом натрия: флавоноиды и кумарины - желтого; антрагаикозиды - вишнево-красного цвета;
окрашенные комплексные соли с хлоридом окисного железа или железоаммонийными квасцами от зеленой до фиолетовой окраски (простые фенолы, кумарины, лигнаны, флавоноиды, дубильные вещества);
с хлоридом алюминия - желтую окраску с желто-зеленой флюоресценцией (флавоноиды);
с ацетататом свинца и магния, солями меди, молибдена, циркония (все фенольные соединения);
- реакцию азосочетания с солями диазония с образованием азокрасителя в
зависимости от структуры от желтого до вишнево-красного цвета.
Флавоноиды способны восстанавливаться (проба Синода),
простые фенольные соединения – (гидрохинон) окисляться раствором йода.
Дубильные вещества легко окисляются кислородом воздуха, перманганатом калия и другими окислителями. Они способны образовывать прочные межмолекулярные связи с белками и другими полимерами (пектиновые вещества, целлюлоза), легко адсорбироваться на кожном порошке, целлюлозе, клетчатке.
Из водных растворов дубильные вещества осаждаются желатином, алкалоидами - основным ацетатом свинца, бихроматом калия, сердечными гликозидами.
Алкалоиды образуют нерастворимые (или слабо растворимые) осадки с комплексными йодидами металлов, высокомолекулярными неорганическими кислотами, высокомолекулярными органическими веществами кислого характера (общеалкалоидные осадочные реакции).
Алкалоиды вступают в реакции, зависящие от наличия в их молекулах различных функциональных групп. Например, морфин содержит фенольный гидроксил, поэтому он со щелочами образует феноляты;
дает реакции с хлоридом окисного железа и другими реактивами.
ГРУППЫ СЫРЬЯ ПО БАВ
1. Полисахариды
с порошком микрохимические реакции на слизь:
- с тушью;
- с метиленовым синим;
- с раствором КОН;
- проделать микрореакцию на крахмал с раствором Люголя;
- проделать реакцию на одревесневшие элементы - с 1% спиртовым раствором флороглюцина и концентрированной НCl (1-2 капли).
Подлинность лекарственного растительного сырья подтверждают качественными реакциями.
Фармакопейными (ГФ-Х1, вып.2) являются следующие:
- на инулин:
1) альфа-нафтол и конц. серная кислота окрашивает корни одуванчика в фиолетово-розовый цвет;
2) альфа-нафтол и конц. серная кислота окрашивает корневища и корни девясила в красно-фиолетовый цвет, тимол и конц. серная кислота - в оранжево-красный цвет.
- на слизь:
1) раствор аммиака (NH3) или едкого натра (NаОН) окрашивает корни алтея в желтый цвет;
2) при смачивании водой цветки липы ослизняются;
3) на порошок семян льна выполняют гистохимическую реакцию с раствором туши.
При помощи качественных реакций чаще выявляются слизи:
Под влиянием раствора NaOH они приобретают лимонно-желтоватый цвет, пoд воздействием метиленового синего - голубой.
На фоне черной туши слизь имеет вид бесцветных сгустков.