Лабораторная диагностика. Бактериологический метод
Бактериологический метод. Матерьял: рвотные массы, кал, промывные воды желудка, моча, еда.
- Пробы берут из последней, жидкой части испражнений.
- Среды обогащения: селенитовая, магниевая, Эндо. 1 (испражнения) : 5 (среда). Висмунт-сульфит-агар для s.arizonae, s.diarizonae, они лактоза (+). Большинство лактозо (-).
- Для посева крови – среда Рапоппорт.
- Предварительно О1-сальмонеллёзный фаг (98% чувствительны к нему)
- Окончательно поливалентные адсорбированные О- и Н-сыворотки, а затем и моновалентные.
Внутрибольничные сальмонеллезы
• Чаще возникают в детских и послеродовых учреждениях.
• Вспышки развиваются постепенно и носят затяжной характер.
• Возникают не в инфекционных, а в соматических стационарах.
• Для новорожденных и детей высоко контагиозны, протекают в септической форме.
• Это антропоноз, передаются контактно-бытовым путем, иногда аэрозольным.
• Возбудители относятся к группе В, имеют R-плазмиду
Госпитальные эковары сальмонелл:
• Высоко устойчивы к антибиотикам и дезинфектантам
• Нечувствительны к соответствующим бактериофагам
• Снижена патогенность для мышей
• Снижены ферментативные свойства
• Устойчивы к повышенной температуре
• Длительно сохраняются в больничных помещениях, до 18 месяцев.
Возбудители брюшного тифа и паратифов.
Морфология:
-общие свойства – как у всех энтеробактерий
- грам(-) подвижные палочки (перитрихи),
- спор и капсул нет.
Культуральные признаки:
- факультативные анаэробы.
- способны расти при температуре от 10 до 41оС.
- хорошо размножаются на простых питательных средах.
- на МПА образуют нежные, прозрачные, гладкие колонии. (Сальмонеллы паратифа В вокруг колоний образуют слизистый валик, напоминающий пуговицу, коллонии с антигеном-Vi мутные).
- среды с желчью являются селективными для возбудителей тифа и паратифа (желчный бульон, жидкая среда Рапопорт)
- на диф.-диагностических средах Эндо, Левина образуют бесцветные колонии, т.к. сальмонеллы лактозо (-).
- селективной средой для сальмонелл служит висмут-сульфит-агар, где они растут в виде черных блестящих колоний.
Биохимия:
- ферментируют углеводы с образованием К и Г.В отличие от большинства сероваров S.typhi не выделяет газ при ферментации углеводов.
- оксидазо(-), каталазо(+), реакция Фогеса-Проскауэра отрицательна.
- образуют Н2S.
- не ферментируют лактозу, сахарозу,
- восстанавливают нитраты
Антигенная структура:
- О-АГ Является ЛПС.
- Н-АГ Два типа: 1 и 2 фазы.
- Vi-АГ принадлежит к группе поверхностных или капсульных АГ. Он термолабилен чувствителен к HCl и этанолу. Сальмонеллы, имеющие Vi-антиген, лизируются Vi-фагами. Фаготипирование проводят с целью установления источника инфекции, что имеет важное эпидемиологическое значение.
Vi-антиген
• Имеют все свежевыделенные штаммы S. typhi (V-форма), при пересеве утрачивается (W-форма)
• Фактор патогенности
• Располагается более поверхностно, чем О-АГ, его наличие препятствует агглютинации S. typhi О-специфической сывороткой, поэтому такую культуру обязательно проверяют Vi-сывороткой.
• Рецептор для бактериофагов, используется для фагодиагностики, т.к. является стабильным признаком:
– Vi-I – универсальный бактериофаг, используется для фагодиагностики
– Vi-II – набор типовых бактериофагов (96 фаговаров) – используется для фаготипирования, установления источника инфекции и путей распространения
Антигенная структура – разнородна, в основе классификации сальмонелл по Кауфману-Уайту.
Резистентность.Убивает мгновенно кипячение, хим.дезинфектанты через 10-15 минут, хлорирование и озонирование обеспечивают надёжное обеззараживание воды.
Основные возбудители:
1. Возбудитель брюшного тифа: S. enterica var. typhi (палочка Эберта-Гаффки)
• Самая патогенная для человека.
• Относится к группе D.
• Имеет Vi-антиген.
2. Возбудитель паратифа А – S. enterica var. paratyphi A (палочка Бриона-Кайзера),
3. Возбудитель паратифа В S. enterica var. schottmuelleri (палочка Шотмюллера).
4. Возбудитель паратифа С – S. enterica var. hirschfeldii
Характеристика заболевания:
-Брюшной тиф и паратиф А – возбудитель – человек (они есть в желудке и в желчном пузыре, т.к желчь элективная среда)
-Возбудители паратифов В и С – некоторые животные и птиц.
-Больной или носитель выделяет возбудителя с испражнениями, мочой, слюной.
-Основной механизм заражения – фекально-оральный (водный, пищевой и контактно-бытовой).
Факторы патогенности S. typhi:
• Vi-антиген
• Эндотоксин
• Нет экзотоксинов
• Белки секреторной системы 3 типа (инвазин) – продукты генов spi I, обеспечивают трансцитоз через М- клетки без повреждения слизистой.
• Белки – продукты генов spi II – устойчивость к фагоцитозу, способны размножаться в лимфоидной ткани.
• Ферменты: фибринолизин, плазмакоагулаза, гиалуронидаза, лецитиназа - редко
Брюшной тиф - острое инфекционное заболевание, для которого характерны: лихорадка, общая интоксикация, бактериемия, увеличение печени и селезенки, энтерит, поражение лимфоидного аппарата кишечника.