Работа № 3. Характер роста микроорганизмов на жидких питательных средах
Цель:изучить характер роста бактерий на жидких питательных средах; изучить особенности роста микроорганизмов
Самостоятельная работ:описать характер роста на жидкой питательной среде
Опыт № 1 Опыт № 2 Опыт № 3
МПБ МПБ 1% пептонная вода
(кишечная палочка) (возбудитель сибирской язвы) (возбудитель холеры)
Характер
роста: _________________ __________________ ___________________
Вывод:
_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Теоретическая справка
Работа № 3
Дыхание микроорганизмов – биологическое окисление субстрата с выделением необходимой для метаболизма энергии. По типу дыхания микроорганизмы делятся на 3 основные группы: аэробы могут жить только в присутствии кислорода (холерный вибрион);факультативные анаэробы могут жить при любом процентном содержании кислорода и без него (кишечная палочка); анаэробы (облигатные) – только в отсутствие кислорода (возбудители газовой гангрены).При культивировании облигатных анаэробов требуется создание особых условий анаэробиоза. При этом используют особые приборы и среды (анаэростат, эксикатор, среды тиогликолиевая, Вильсона-Блер).
Работа № 4. Техника посева на питательные среды
Цель:ознакомиться с техникой посева на жидкие и плотные питательные среды и указать значение метода (см. теоретическую справку).
Самостоятельная работа:рассмотреть готовые демонстрационные посевы, зарисовать и указать назначение каждой техники посева.
название | рисунок | значение |
1) седиментация по Коху | ||
2) посев по Дригальскому | ||
3) посев по Шукевичу | ||
4) посев методом укола | ||
5) посев на скошенный агар |
Вывод:
________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Теоретическая справка
Работа № 4
Техника посева на жидкие и плотные питательные среды
Методы, основанные на механическом разобщении микробов
Метод Дригальского
Стерильной пипеткой материал помещают на поверхность МПА в чашку Петри
посев шпателем (газоном) посев петлей (штрихом)
Стерильным шпателем материал Чашку Петри с МПА делят на
тщательно распределяют по 4 сектора. Исследуемый мате-
поверхности агара. Затем, не беря риал стерильной петлей вносят
нового материала и, не обжигая в 1 сектор и делают штрихи,
шпатель, делают посев на 2 и 3 затем такие же линии проводят
чашку МПА. и на других секторах.
На последних секторах вырастают
отдельные колонии.
1 2 3 1 2
изолированные колонии 4 3
4 сектор - изолированные колонии
Снижение концентрации микробов
Метод седиментации по Коху -основан на свободном оседании микроорганизмов на питательную среду в чашку Петри из воздуха. Применяется для определения загрязненности воздуха микрооргагнизмами.
Метод укола -применяется для выращивания анаэробов или выявления характерного признака микроба, т.к. рост по ходу укола типичен для рада бактерий. Также применяется для длительного хранения культур.
Посев на скошенный агар – применяется для накопления биомассы, получения чистой культуры и их хранения.
Методы, основанные на биологических свойствах микроорганизмов
■ Метод Шукевича
Техника посева. Исследуемый материал засевают в конденсационную воду скошенного агара. При размножении подвижные формы микробов из конденсационной воды дают «ползущий» рост по скошенному агару. Для получения чистой культуры ее отсевают с верхнего края посева.
■ Метод прогревания. Позволяет отделить спорообразующие бациллы от не споровых форм. Прогревают исследуемый материал на водяной бане при 80°С 10-15 мин. Вегетативные формы погибают, а споры сохраняются и при посеве на соответствующую питательную среду прорастают.
■ Метод фильтрации основан на пропускании исследуемого материала через специальные фильтры с определенным диаметром пор и разделение содержащихся микроорганизмов по величине. Этот метод применяется для очистки вирусов от бактерий, а также при получении фагов и токсинов (в фильтрате - чистый фаг, очищенный токсин).