Раздел vii. биохимия крови, почек и печени
ЗАНЯТИЕ 28
ТЕМА: Кровь 1. Основы регуляции КОС. Белки крови.
Цель занятия: изучить механизмы изменения физико-химических констант крови в норме и при патологии. Научиться определять содержания кальция в плазме крови и щелочной резерв крови.
1. Исходный уровень знаний и умений:
1. Состав крови, форменные элементы.
2. Основные физико-химических параметры плазмы крови (значение pH, онкотическое и осмотическое давление, химический состав и др.).
3. Основные элементы теории буферных растворов (буферная емкость, буферные системы крови, уравнение Гендерсона-Хассельбалха). Уравнение Доннана.
4. Принципы работы ионных АТФ-аз.
Студент должен знать:
1. Состав крови.
2. Строение и функции форменных элементов.
3. Основные физико-химические константы крови.
4. Основные положения теории буферных растворов.
5. Принципы и механизм работы ионных АТФ-аз.
Студент должен уметь:
1. Проводить титрационный анализ.
Структура занятия:
1. Теоретическая часть.
1.1. Функции крови, основные физико-химические константы крови (pH, pCO2, pO2, плотность, осмолярность), их изменения при патологии. Плазма крови - качественный и количественный состав. Содержание триглицеридов, глюкозы, белка, общих липидов, мочевины, натрия, калия, кальция, магния, хлора, HCO3-).
1.2. Белки плазмы крови, их классификация, характеристика отдельных представителей и методы выделения: электрофорез, высаливание и др. Изменения белкового спектра при патологии.
1.3. Основные небелковые компоненты крови. Остаточный азот его происхождение и диагностическое значение.
1.4. Понятие о кислотно-основном состоянии (КОС). Основные принципы регуляции КОС:
1.4.1. изоосмолярность
1.4.2. электронейтральность
1.4.3. постоянство pH
1.5. Механизмы регуляции КОС:
1.5.1. физико-химические (разбавление, буферные системы)
1.5.2. физиологические (роль почек, легких, печени, ЖКТ и др.)
1.6. Классификация нарушений КОС (ацидозы, алкалозы, их виды). Основные механизмы развития респираторных, метаболических и выделительных нарушений КОС. Физиологические механизмы коррекции нарушений КОС. Способы оценки нарушений КОС (показатели КОС и электролиты крови, pH мочи и др.).
2. Практическая часть - выполнение лабораторных работ:
2.1. Определение кальция в сыворотке крови (метод Мойдина и Зака).
2.2. Титрометрический метод определения щелочного запаса крови.
3. Решение задач и проведение контроля конечного уровня
Литература основная:
1. Материал лекций.
2. Березов Т. Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия, М. Медицина, 1990, стр. 438-464, М. Медицина, 1998, стр. 567-599.
3. Николаев А.Я. Биологическая химия, М., Высшая школа, 1989, стр. 435-439.
дополнительная:
4. Агапов Ю.А. Кислотно-щелочной баланс, М., Медицина, 1968.
5. Робинсон Дж. Кислотно-щелочное равновесие, М., Медицина, 1970.
6. Рут Г. Кислотно-щелочное равновесие и электролитный баланс, М., Медицина, 1978.
7. Гомеостаз, под ред. П.Д. Горизонтова, Медицина, 1980.
8. Марри Р. и др., Биохимия человека, М., Мир, 1993, том 2, стр. 319-325.
9. Зилва Дж.Ф., Пэнелл П.Р. Клиническая химия в диагностике и лечении, М., Медицина, 1986.
10. Руководство по клинической лабораторной диагностике. том 3, Клиническая биохимия под ред. проф. М.А. Базарновой, Киев, 1991.
11. Клиническая оценка лабораторных тестов, под ред. И.У. Тица, М., Медицина, 1986.
ЗАДАЧИ:
1. Главным соединением в крови, содержащим азот небелкового происхождения является:
| а) мочевина | г) карнитин | ж) билирубин |
| б) аммиак | д) аминокислоты | з) эрготионеин |
| в) пурины | е) мочевая кислота |
2. Назовите типичные представители белков острой фазы:
| а) церулоплазмин | е) C-реактивный белок |
| б) трансферрин | ж) гемоглобин |
| в) гаптоглобин | з) альбумин |
| г) фибриноген | и) транскортин |
| д) орозомукоид | к) a-1 антитрипсин |
3. Какой из иммуноглобулинов является секреторным?
| а) Ig А | б) Ig G | в) Ig Е | г) Ig D | е) Ig M |
4. Вязкость крови зависит от содержания в крови:
| а) мочевины | д) холестерина |
| б) количества клеток | е) ЛП |
| в) фибриногена | ж) альбумина |
| г) белков “острой” фазы | з) гормонов |
5. Чем обусловлен гиперосмолярный синдром?
а) избытком глюкозы
б) увеличением уровня мочевины
в) гипернатриемией
г) повышения уровня альбумина
д) гиперкетонемией
6. Слабо щелочная реакция плазмы крови поддерживается:
а) анионами хлора
б) ионами HCO3-
в) ионами HPO42-
г) протеинат-ионами
д) катионами металлов
7. Содержание ферритина в сыворотке крови снижается при:
а) железодефицитных анемиях
б) анемиях, связанных с беременностью
в) острых воспалительных процессах
г) коллагенозах
д) онкологических заболеваниях
е) травмах
ж) послеоперационном периоде
8. Беременность сопровождается увеличением:
а) содержания сывороточного железа
б) общей железосвязывающей способности сыворотки крови
в) процента насыщения трансферрина железом
г) уровня ферритина
д) содержания свободных протопорфиринов в эритроцитах
е) уровня трансферрина
ж) уровня гемоглобина
9. Метаболический ацидоз развивается при:
а) накоплении в организме кетоновых тел
б) накоплении лактата и др. органических кислот
в) гиперпродукции кетокислот и органических кислот
г) длительном приеме кислой пищи
д) приеме мочегонных средств - ингибиторов карбангидразы (дикарб)
е) гиповентиляции
ж) гипервентиляции
з) рвоте
и) диарее
10. Основными причинами развития метаболического ацидоза являются:
а) увеличенное введение в организм H+ ионов
б) повышенное образование кетоновых тел, лактата и др.
в) повышенная потеря HCO3-
г) потеря ионов K+
д) потеря ионов Сl-
е) введение ионов Сl-
ж) введение ионов HCO3-
з) дефиците инсулина
11. Изменение pH крови при метаболическом ацидозе сопровождается:
а) усилением диссоциации HbO2
б) гиперкалиемией
в) снижением содержания K+ в клетках паренхиматозных органов
г) увеличением pCO2
д) стимуляцией симпато-адреналовой системы
е) снижением pCO2
12. Для коррекции метаболического ацидоза применяют:
а) кислородотерапию
б) введение растворов HCO3-
в) введение трис-буфера
г) переливание свежей крови
д) введение солей калия с добавлением глюкозы и инсулина
е) введение гипертонического раствора глюкозы
ж) введение физраствора (хлорида натрия)
13. В каких случаях развивается метаболический ацидоз?
| а) сахарный диабет | д) почечная недостаточность |
| б) стеноз привратника | е) острый ринит |
| в) гипокалиемия | ж) острая пневмония |
| г) отек легких | з) переломах костей |
14. В каких случаях развивается метаболический алкалоз?
а) задержка H2CO3
б) задержка органических кислот
в) образование кетоновых тел в организме
г) гиповентиляция легких
д) гипервентиляция легких
е) лечение кортикостероидами без препаратов калия
ж) рвота
з) диарея
15. Выделительный негазовый алкалоз вызывается:
а) задержкой в организме оснований
б) потерей натрия
в) потерей калия
г) усилением мочевой экскреции хлоридов
д) введением растворов HCO3-
ж) длительным приемом "щелочной" пищи
з) рвота
и) диарея
16. При активном ревматическом процессе возрастает уровень:
| а) альбуминов | г) b-глобулинов | ж) гаптоглобина |
| б) a1-глобулинов | д) g-глобулинов | з) С-реактивного белка |
| в) a2-глобулинов | е) церулоплазмина |
17. В состав каких белковых фракций входит трансферрин?
| а) альбуминов | г) b-глобулинов | ж) гаптоглобина |
| б) a1-глобулинов | д) g-глобулинов | з) С-реактивного белка |
| в) a2-глобулинов | е) ЛП |
18. В состав каких белковых фракций входит C-реактивный белок?
| а) альбуминов | г) b-глобулинов |
| б) a1-глобулинов | д) g-глобулинов |
| в) a2-глобулинов | е) пре-b-глобулинов |
19. В состав каких белковых фракций входят криоглобулины?
| а) альбуминов | г) b-глобулинов |
| б) a1-глобулинов | д) g-глобулинов |
| в) a2-глобулинов | е) пре-b-глобулинов |
20. a-фетопротеин обнаруживается в сыворотке крови при:
а) норме у взрослых
б) острой пневмонии
в) паренхиматозном гепатите
г) первичном раке печени
д) тератобластомах с элементами эмбрионального рака
е) метастазах в печень
ж) беременных женщин
з) новорожденных
21. Наиболее ранний белок острой фазы воспаления:
а) C-реактивный белок
б) гаптоглобин
в) альфа-кислый-гликопротеин (орозомукоид)
г) антипротеазный ингибитор (a-1 антитрипсин)
д) фибриноген
е) трансферрин
ж) транскортин
22. При каком патологическом состоянии возникает абсолютная гипопротеинемия?
а) тяжелый тиреотоксикоз
б) цирроз печени
в) неспецифический язвенный колит
г) нефротический синдром
д) плазмоцитома
е) ожоговая болезнь
ж) сахарный диабет
23. При каких состояниях снижен синтез Ig G?
а) туберкулез легких
б) бактериальный эндокардит
в) ожоговая болезнь
г) нефротический синдром
д) хронические энтероколиты
е) злокачественная опухоль
ж) сахарный диабет
24. При какой патологии повышается уровень сиаловых кислот в сыворотке крови?
| а) инфаркт миокарда | е) острая пневмония |
| б) туберкулез легких | ж) ожоговая болезнь |
| в) цирроз печени | з) нефротический синдром |
| г) острая фаза ревматизма | и) хронические энтероколиты |
| д) язвенная болезнь желудка | к) злокачественная опухоль |
Практическая часть:
Лабораторная работа № 1. Определение кальция в сыворотке крови (метод Мойдина и Зака).
ПРИНЦИП МЕТОДА: метод основан на способности органических соединений-комплексонов - взаимодействовать с ионами кальция. В качестве комплексона используется трилон Б (ЭДТА, или динатриевая соль этилендиаминтетраацетата). Трилоном Б титруют ионы кальция, предварительно связанные с индикатором-мурексидом. Момент полного связывания кальция с трилоном Б определяется по изменению цвета мурексида (в комплексе с ионами кальция мурексид красно-оранжевого цвета, свободный от кальция мурексид окрашивается в сине-фиолетовый цвет). Комплекс кальция с трилоном Б более прочен, чем комплекс с мурексидом. Зная, концентрацию и объем раствора трилона Б, пошедшего на титрование, находят содержание кальция.
Нормальное содержание кальция в сыворотке крови 2,25-2,64 ммоль/л (9-11 мг%). Состояние гипокальциемии наблюдается при авитаминозе D (рахите), у беременных, при недостаточной функции паращитовидной железы, заболевания почек, при отравлениях фторидами. Гиперкальциемия встречается реже (гиперпаратиреоз, опухоли, деструктивные процессы в костной ткани, лейкозы).
ХОД РАБОТЫ.
1. Готовят раствор мурексида для всей группы студентов. Для этого в колбу вносят 0,8 мл раствора NaOH и 100 мл воды, перемешивают. В полученный раствор добавляют мурексид до появления ярко-фиолетовой окраски. Этим раствором заполняют макробюретку.
2. Микробюретку заполняют раствором трилона Б.
3. В две широкие пробирки Хагедорна (опытная и контрольная) наливают по 5 мл раствора мурексида. В опытную пробирку вносят 0,2 мл исследуемой сыворотки крови (раствор становится розовым). Титруют (без промедления) из микробюретки раствором трилона Б до исчезновения розовой окраски и восстановления фиолетового цвета (сравнивать с окраской контроля, титрование лучше делать при дневном освещении).
РАСЧЕТ: исходя из того, что 1 мл 0,1 моль/л раствор трилона Б эквивалентен 0,12 мг Ca. Рассчитывают содержание кальция в сыворотке крови (в мг%):
X = V´0,12´100,
где: V - объем (мл) трилона Б, пошедший на титрование опытной пробы.
ВЫВОД:
Лабораторная работа № 2. Титрометрический метод определения "щелочного" запаса крови.
ПРИНЦИП МЕТОДА: количество всех оснований цельной крови составляет ее щелочной запас. Принцип метода основан на том, что к цельной крови добавляют для нейтрализации всех оснований заведомо большее количество соляной кислоты. Избыток кислоты оттитровывают щелочью до значение pH (pH = 5,0) равного изоэлектрической точки основных белков крови, которые выпадают в осадок, при этом появляется легкое белесоватое помутнение. Щелочной запас выражается в МЭКВ щелочи, соответствующих количеству связанной основаниями крови соляной кислоты, в перерасчете на 1 л крови.
ХОД РАБОТЫ. К 10 мл 0,01 н раствора соляной кислоты добавляют 0,2 мл крови, тщательно перемешивают. Прозрачный бурый раствор титруют из микробюретки 0,1 н раствором NaOH до появления легкого белесоватого помутнения.
РАСЧЕТ ПО ФОРМУЛЕ:
(1 - а)´0,1´1000
мэкв/л NaOH = ¾¾¾¾¾¾¾¾¾¾
0,2
или
(1 - а)´4´100
мг% NaOH = ¾¾¾¾¾¾¾¾¾¾
0,2
где:
1 - 1 мл 0,1 н раствора HCl, взятой для нейтрализации
а - количество мл щелочи, пошедшей на титрование
0,1 - количество МЭКВ в 1 мл щелочи
0,2 - количество мл крови
1000 - коэффициент пересчета на 1 л крови
4 - количество мг NaOH в 1 мл 0,1 н раствора
В НОРМЕ щелочной запас составляет 100-115 мэкв/л, или 400-460 мг% NaOH.
ВЫВОД:
ЗАНЯТИЕ 29
ТЕМА: Кровь 2. Обмен гемоглобина.
Цель занятия: изучить особенности метаболизма железа и основных форменных элементов крови, изучить биохимию гемоглобина в норме и при патологии. Научиться определять в крови содержание гемоглобина и билирубина.
Исходный уровень знанийи умений:
1. Строение и свойства олигомерных белков
2. Кривые диссоциации оксимиоглобина и оксигемоглобина
3. Гликолиз, пентозный цикл, ЦТК
4. Перекисные процессы, антиоксидантная защита
5. Система гемостаза.
Студент должен знать:
1. Состав крови
2. Строение и функции форменных элементов
3. Основные физико-химические константы крови
4. Строение и свойства олигомерных белков
5. Кривые диссоциации оксимиоглобина и оксигемоглобина
6. Метаболизм углеводов
7. Перекисные процессы, антиоксидантная защита
Студент должен уметь:
1. Работать на колориметре
Структура занятия:
1. Теоретическая часть.
1.1. Общая характеристика, особенности метаболизма эритроцитов (гликолиз, пентозный цикл, изоцитратдегидрогеназа, малатдегидрогеназа, трансаминазы и др.). Na/K АТФ-аза, минеральный состав эритроцитов. Глутатион. Строение, функции, ферменты обмена глутатиона. Антиоксидантная защита. Характеристика белков и фосфолипидов мембран эритроцитов.
1.2. Гемоглобин, строение, свойства, производные, виды Hb. Аномальные Hb. Сравнительная характеристика Hb и миоглобина.
1.3. Дыхательная функция крови ее регуляция. Спектры крови гемоглобина и его производных. Гипоксия, аноксия, виды. Нарушение обмена при гипоксии. Регуляция степени сродства Hb к кислороду. Роль 2,3-ДФГК.
1.4. Обмен хромопротеидов. Переваривание и всасывание. Обмен гемоглобина. Биосинтез гема до порфобилиногена (локализация, ферменты). Распад Hb в клетках РЭС (образование неконъюгированного билирубина). Механизм конъюгации билирубина в печени. Превращение билирубина в кишечнике. Диагностическое значение определения билирубина и продуктов его обмена в крови и моче при различных видах желтух (гемолитической, паренхиматозной, обтурационной).
1.5. Метаболизм железа. Механизмы всасывания, транспорта и депонирования.
1.6. Особенности метаболизма лейкоцитов. Биохимические основы фагоцитоза.
1.7. Особенности метаболизма тромбоцитов.
2. Практическая часть - выполнение лабораторных работ:
2.1. Определение содержания Hb в крови.
2.2. Определение содержания билирубина в сыворотке крови.
3. Решение задач и проведение контроля конечного уровня
Литература основная:
1. Материал лекций.
2. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия, М. Медицина, 1990, стр. 65-71, 434-436, 458-464, М. Медицина, 1998, стр. 78-85, 503-508, 585, 591-599.
3. Строев Е.А. Биологическая химия, М., Медицина, 1986.
4. Николаев А.Я. Биологическая химия, М., Высшая школа, 1989, стр. 227-228, 428-437.
дополнительная:
5. Уайт А. и др., Основы биохимии, том 3, М., Мир, 1981, стр. 1218-1301.
6. Федоров Н.А. Нормальное кроветворение, М., Медицина, 1975.
7. Марри Р. и др., Биохимия человека, М., Мир, 1993, том 1, стр. 52-62, 356-372.
8. Зилва Дж.Ф., Пэннел Д. Клиническая химия в диагностике и лечении, М., Медицина, 1986
9. Руководство по клинической лабораторной диагностике. том 3, Клиническая биохимия под ред. проф. М.А. Базарновой, Киев, 1991.
ЗАДАЧИ:
1. Какие из указанных соединений могут превращаться в желчные пигменты?
| а) холевая кислота | д) фосфолипиды |
| б) гем | е) миоглобин |
| в) триглицериды | ж) ДНК |
| г) холестерин | з) цитохромы |
2. Производными чего являются порфирины?
| а) лизина и пролина | д) глицерина и ЖК |
| б) аланина и глутамина | е) карбамоилфосфата и |
| в) янтарной кислоты и глицина | орнитина |
| г) ацетил-КоА и оксалоацетата | ж) нуклеотидов |
3. Уробилиноген не может быть производным от:
| а) гемоглобина | д) пероксидазы |
| б) каталазы | е) хлорофилла |
| в) флавопротеида | ж) ДНК |
| г) цитохрома С | з) пиридиннуклеотида |
4. Назовите белки сыворотки крови:
| а) фибриноген | д) C-реактивный белок |
| б) альбумины | е) проконвертин |
| в) криоглобулины | ж) проакселерин |
| г) глобулины | з) ЛДГ |
5. Где синтезируется альфа и бета-глобулины?
| а) костный мозг | г) лимфоузлы | ж) кишечник |
| б) селезенка | д) печень | з) мышцы |
| в) кишечник | е) почки |
6. Предшественниками гема гемоглобина являются:
| а) уропорфириноген-III | д) вердоглобин |
| б) протопорфириноген-IX | е) протопорфирин |
| в) копропорфириноген-III | ж) биливердин |
| г) копропорфириноген-I | з) уропорфириноген-I |
7. Порфирия связана с дефицитом активности:
а) фенилаланин-аминолиазы
б) гипоксантин-гуанин-фосфорибозилтрансферазы
в) гем-синтетазы
г) ДАЛК-синтетазы
д) энтерокиназы
е) АРС-азы
ж) метилтрансферазы
з) карбамоилфосфатсинтетазы
8. При биосинтезе порфирина первой стадией является реакция:
а) конденсации двух молекул порфобилиногена
б) конденсации гли и сукцинил-CoA
в) образование протопорфирина
г) конденсации двух молекул ДАЛК
д) образование уропорфириногена-III.
е) образование протопорфириногена-IX
9. Билирубин глюкуронид характеризуется тем, что, он:
а) возрастает при неонатальной гипербилирубинемии
б) обычно находится в желчных протоках
в) жирорастворим
г) водорастворим
д) светочувствителен
е) токсичен
ж) не токсичен
10. При обструкции желчных протоков отмечается:
а) значительное увеличение содержания конъюгированного билирубина в крови
б) снижение содержания конъюгированного билирубина в крови
в) увеличение содержания неконъюгированного билирубина в крови
г) снижение содержания неконъюгированного билирубина в крови
д) низкая экскреция холестерина
е) снижение уровня билирубин-глюкуронида в фекалиях
ж) увеличение уровня билирубин-глюкуронида в фекалиях
з) увеличение содержания липидов в фекалиях
и) снижение содержания липидов в фекалиях
11. Когда уменьшается содержание железа в крови?
| а) железодефицитная анемия | г) онкозаболевания |
| б) уремия | д) диарея |
| в) маточные кровотечения | е) рвота |
12. Для какой из желтух характерно повышение конъюгированного билирубина в крови?
| а) гемолитическая | д) болезнь Криглера-Найяра |
| б) болезнь Жильбера | е) болезнь Ротора |
| в) обтурационная | ж) болезнь Дубина-Джонса |
| г) паренхиматозная | з) физиологической желтухе |
13. Содержание ферритина в сыворотке крови снижается при:
| а) железодефицитных анемиях | г) коллагенозах |
| б) анемиях беременных | д) онкозаболеваниях |
| в) воспалительных процессах | е) желтухах |
14. Когда возрастает содержание железа в сыворотке крови ?
| а) гемохроматоз | д) эмфиземе легких |
| б) гемолитическая анемия | е) онкозаболевания |
| в) талассемия | ж) инфаркт миокарда |
| г) гепатит | з) гиповитаминоз В12 |
15. Патологическое действие высоких концентраций билирубина сводится к:
а) активации процесса свертывания крови
б) угнетению процесса свертывания крови
в) разобщению окисления и фосфорилирования
г) повышению проницаемости биологических мембран
д) инициации гемолиза
е) деструкции гепатоцитов
ж) инициации перекисных процессов
16. Наибольшей токсичностью обладает:
а) неконъюгированный билирубин
б) свободный билирубин связанный с альбумином
в) конъюгированный билирубин
г) билирубин конъюгированный, связанный с фосфолипидами
17. Печень здорового человека не пропускает в общий круг кровообращения поступающие из кишечника:
| а) мезобилиноген | д) холестерин и его эфиры |
| б) желчные кислоты | е) глюкозу |
| в) фосфолипиды | ж) стеркобилиноген |
| г) триацилглицерины | з) индол |
18. Водорастворимыми и обнаруживаемыми в моче фракциями билирубина и его производных являются:
а) бета, гамма и дельта изомеры свободного билирубина
б) альфа-изомер свободного билирубина
в) глюкурониды билирубина
г) стеркобилиноген
д) мезобилиноген (уробилиноген)
19. Глюкуронидированию в печени подвергаются:
| а) билирубин | г) холестерин |
| б) стероидные гормоны | д) желчные кислоты |
| в) катехоламины | е) НЭЖК |
20. Основными органами синтеза порфиринов являются:
| а) костный мозг | д) тонкий кишечник |
| б) печень | е) миокард |
| в) почки | ж) головной мозг |
| г) легкие | з) кишечник |
21. Накопление при порфириях уропорфириногена I и копропорфириногена I вызывает:
а) поражение кожи
б) гемолиз эритроцитов
в) увеличение селезенки
г) выделение мочи красного цвета
д) воспалительный процесс в почках
е) остеопороз
22. Для надпеченочной желтухи характерно повышение:
а) неконъюгированного билирубина в крови
б) конъюгированного билирубина в крови
в) уробилиногена в моче
г) стеркобилиногена в кале
д) желчных пигментов в моче
е) желчных пигментов в крови
23. Для обтурационной желтухи характерно повышение уровня:
а) общего и свободного билирубина крови
б) стеркобилиногена мочи
в) общего и связанного билирубина крови
г) мезобилиногена в моче
д) общего и связанного билирубина в крови ахоличный стул
е) свободного билирубина в крови.
24. Для паренхиматозной желтухи характерно увеличение содержания:
а) общего и свободного билирубина крови
б) стеркобилиногена в моче
в) общего и связанного билирубина в крови
г) уробилиногена в моче
д) общего, связанного билирубина крови
е) свободного билирубина крови
ж) билирубина в моче
25. При печеночной порфирии наблюдается:
а) повышение чувствительности кожи к свету
б) поражение нервной системы в виде полиневритов
в) поражение мышечной системы
г) желтушная окраска слизистых оболочек и склер
д) зуд кожных покровов
26. Всасыванию железа в кишечнике способствует:
а) воздействие HCl желудочного сока
б) гастроферрин
в) лактоферрин
г) аскорбиновая кислота
д) таннин
27. Где депонируется железо?
| а) в миоглобине | г) в ферритине |
| б) в гемоглобине | д) в протопорфиринах эритроцитов |
| в) в трансферрине |
28. При каких состояниях повышается в крови содержание IgG?
а) хронические заболевания печени
б) подострые и хронические инфекции
в) коллагенозы
г) гастроэнтеропатии
д) ожоги (начальная стадия)
е) онкозаболевания
ж) паразитарные заболевания
з) ожоги (восстановительная стадия)
29. Какой белок плазмы крови является транспортной формой железа в организме?
| а) транскортин | г) лактоферрин | ж) гаптоглобин |
| б) трансферрин | д) церулоплазмин | з) гемоглобин |
| в) ферритин | е) апоферритин |
30. Какой белок плазмы крови специфичен для злокачественных опухолей печени?
| а) гаптоглобин | д) a-2-макроглобулин |
| б) церулоплазмин | е) антитрипсин |
| в) трансферрин | ж) факторы роста |
| г) a-фетопротеин | з) проконвертин |
31. При каких заболеваниях увеличивается концентрация общих гликопротеидов в сыворотке крови?
а) туберкулез легких
б) острые неспецифические пневмонии
в) инфаркт миокарда
г) инфекционный гепатит
д) микседема
е) болезнь Иценко-Кушинга
ж) ожоговая болезнь
з) онкозаболевания
32. Какой из анионов плазмы является доминирующим по своему количественному содержанию?
| а) хлорид-ион | в) H2PO4- | д) протеинат-ион | ж) нитраты |
| б) HCO3- | г) HPO42- | е) SO42- | з) карбонаты |
33. Гипернатриемия обуславливается:
а) резким ограничением введения жидкости (водный голод)
б) увеличением введения внутрь или парэнтерально натрия
в) гиперфункцией коры надпочечников
г) синдром усталости клеток
д) длительный прием мочегонных средств
е) отравления солями тяжелых металлов
ж) гипофункцией коры надпочечников
Практическая часть:
Лабораторная работа № 1. Определение содержания гемоглобина в крови.
ПРИНЦИП МЕТОДА: Гемоглобин при взаимодействии с железосинеродистым калием (красная кровяная соль) окисляется в метгемоглобин (гемиглобин), образующий с ацетон-циангидрином окрашенный комплекс гемиглобинцианид, интенсивность окраски которого пропорциональна содержанию гемоглобина.
ХОД РАБОТЫ. Опытная проба: 0,02 мл крови приливают к 5 мл трансформирующего раствора (разведение крови в 251 раз), хорошо перемешивают, оставляют стоять 10 минут, после чего измеряют на колориметре при длине волны 500-560 нм (зеленый светофильтр) в кювете с толщиной слоя 10 мм против холостой пробы (трансформирующий раствор или вода).
Экстинкцию стандартного раствора измеряют при тех же условиях, что и опытную пробу.
Расчет содержания гемоглобина (в мг%) производят по калибровочному графику, построенному по стандартному раствору гемиглобинцианида, или по формуле:
Hb = Еоп/Ест ´ К ´ С ´ 0.01
Где:
Еоп - экстинкция опытной пробы
Ест - экстинкция стандартного раствора
С - концентрация гемиглобинцианида в стандартном растворе равная 59.75 мг%
К - коэффициент разведения крови
0,01 - коэффициент для пересчета мг% в г/л (в системе СИ).
Содержание гемоглобина в крови в норме:
у женщин 12-14 г% (120-140 г/л)
у мужчин 13-16 г% (130-160 г/л)
ВЫВОД:
Лабораторная работа № 2. Определение общего билирубина в сыворотке крови (метод Иендрашика и Клеггорна).
ПРИНЦИП МЕТОДА: метод основан на колориметрическом определении интенсивности окраски продукта взаимодействия билирубина с диазореактивом малиново-красного цвета. Неконъюгированный билирубин вступает в "непрямую" реакцию с диазосмесью - после диссоциации белкового комплекса, которая достигается прибавлением к сыворотке кофеинового реактива. При этом определяется концентрация "общего" билирубина. По разности концентраций "общего" билирубина и "прямого" билирубина определяют содержание "непрямого".
ХОД РАБОТЫ. Готовят две пробирки (контрольную и опытную). Составляют реакционную смесь по схеме:
| Проба | Сыворотка крови (мл) | Кофеиновый реактив (мл) | Дистиллир. вода (мл) | Диазосмесь (мл) |
| Опытная | 3,5 | - | 0,5 | |
| Контрольная | - | 3,5 | 0,5 |
Диазосмесь готовят (в количестве, достаточном для всей учебной группы), смешивая 10 мл диазореактива II ( 0.5% раствора нитрата натрия) с 0.3 мл диазореактивом I (готовится в лаборатории кафедры).
Содержимое опытной и контрольной проб хорошо перемешивают, ставят на 20 мин. в темноту, затем колориметрируют на ФЭКе с красным светофильтром (длина волны 500-560- нм) против контроля. Если в пробах развивается слабая окраска, то перед колориметрией содержимое обеих пробирок подщелачивают, добавляя в них по 3 капли 30% раствора NaOH. При этом цвет раствора переходит в зеленый, а при большой концентрации билирубина - в синий; часто наблюдается исчезновение мути.
Расчет производят по калибровочному графику.
При оформлении работы в протокол вносят принцип метода, результат колориметрии и расчет. Отмечают пределы колебаний концентрации билирубина в норме.
КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ
Билирубин образуется в организме в результате естественного распада в клетках ретикулоэндотелиальной системы (печень, селезенка) гемоглобина и других гемопротеидов (цитохромы, каталаза и др.). Билирубин относится к группе желчных пигментов, является токсическим веществом и обезвреживается в гепатоцитах. Транспортируется билирубин к месту обезвреживания в комплексе с белком. В печени происходит процесс обезвреживания по схеме:
УДФ-глюкуроновая кислота
Билирубин¾¾¾¾¾¾¾¾¾¾®Билирубин-глюкуронид
глюкуронилтрансфераза
Образующиеся при этом глюкурониды билирубина хорошо растворимы в воде, секретируются в просвет желчного капилляра и выводится из организма по желчевыводящим путям.
В сыворотке крови содержится две фракции билирубина, вместе составляющие "общий" билирубин:
- неконъюгированный (непрямой, токсичный, свободный, водонерастворимый) существует в виде комплекса с альбумином.
- конъюгированный (билирубин глюкуронид, прямой, нетоксичный, связанный, водорастворимый).
Содержание билирубина в крови в норме составляет 0,5-1,2 мг% (8.5-20.5 мкМ/л в системе СИ), причем 75% приходится на долю неконъюгированного. Определение его уровня в крови является важным диагностическим тестом. Так, при различных поражениях печени и желтухах часто наблюдается гипербилирубинемия - увеличение концентрации билирубина до 30-35 мг% (512.5 -600.0 мкМ/л) и более.
Дифференциальная диагностика различных видов желтух осуществляется на основании исследования содержания фракций билирубина в крови, а также особенностей клинического течения заболевания и др.
ВЫВОД:
ЗАНЯТИЕ 30
ТЕМА: Биохимия почек в норме и при патологии.
Цель занятия: изучить особенности метаболизма почек и биохимическую основу их основных функций в норме и при патологии. Научиться определять основные физико-химические параметры мочи в норме и при патологии.
Исходный уровень знаний и умений:
1. Строение и функция нефронов
2. Механизм образования мочи
3. Механизм действия гормонов - альдостерона, вазопрессина, натрийурического фактора
4. Метаболизм и механизм действия витамина D
5. Принципы и механизмы регуляции кислотно-основного состояния
6. Механизмы регуляции уровня глюкозы в крови, глюконеогенез.
Студент должен знать:
1. Строение и функции нефрона
2. Особенности кровоснабжения почки и нефрона
3. Механизмы действия гормонов
4. Метаболизм и механизм действия витамина D
5. Принципы и механизмы регуляции КОС
6. Метаболизм углеводов, липидов и аминокислот
7. Механизмы регуляции уровня глюкозы в крови
Студент должен уметь:
1. Проводить титрометрический анализ
Структура занятия:
1. Теоретическая часть.
1.1. Основные функции почек:
1.1.1. Экскреторная функция почек. Строение нефрона, особенности его кровоснабжения. Механизм образования мочи (фильтрация, реабсорбция, секреция). Механизм активного транспорта глюкозы, аминокислот. Нарушение процессов фильтрации, реабсорбции и секреции. Общие свойства мочи в норме и при патологии (суточное количество, цвет, прозрачность, плотность, pH и др.). Органические (мочевина, мочевая кислота, креатинин, креатин, пигменты, аминокислоты, пептиды, гормоны) и неорганические (натрий, калий, кальций, магний, аммиак, хлориды, фосфаты, сульфаты, бикарбонаты) компоненты мочи в норме и при патологии. Патологические компоненты мочи (кровь, белок, сахар, билирубин, аминокислоты).
1.1.2. Клиренс, его определение и диагностическое значение.
1.2. Гомеостатические (неэкскреторные) функции почек. Роль почек в регуляции:
1.2.1. Объема циркулирующей крови, внеклеточной жидкости, артериального давления. Ренин-ангиотензиновая система. Вазопрессин. Механизмы действия диуретиков.
1.2.2. Баланса электролитов. Роль альдостерона в регуляции работы Na-K-АТФазы. Механизмы транспорта H+, Na+, K+, Ca++, Cl-, HCO3-. Почки и метаболизм витамина D. Почечные камни.
1.2.3. Кислотно-основного состояния. Механизмы ацидогенеза, аммониогенеза.
1.2.4. Уровня глюкозы в крови. Особенности глюконеогенеза в почках.
1.2.5. Эритропоэза.
1.3. Метаболическая гетерогенность почечной ткани. Особенности углеводного, липидного и белкового обмена в почке. Почка как орган катаболизма биологически активных веществ.