Порядок выполнения лабораторной работы №11

Кафедра химии и биотехнологии

«БИОХИМИЧЕСКИЕ И ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ ПЕРЕРАБОТКИ ПРОДОВОЛЬСТВЕННОГО СЫРЬЯ»

Лабораторная работа №11

ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОХРАНЯЕМОСТИ БИОФЛАВОНОИДОВ ПРИ

ПЕРЕРАБОТКЕ И ХРАНЕНИИ ПЛОДОВ И ОВОЩЕЙ 4 ЧАСА

Лабораторная работа №12

ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОХРАНЯЕМОСТИ ФЕНОЛЬНЫХ КИСЛОТ ПРИ

ПЕРЕРАБОТКЕ И ХРАНЕНИИ ПЛОДОВ И ОВОЩЕЙ 4 ЧАСА

Форма выполнения – работа в команде – совместная работа бакалавра в группе при выполнении лабораторных работ, направленная на решение общей задачи путем творческого сложения результатов индивидуальной работы членов команды с делением полномочий и ответственности. Работа выполняется фронтальным методом в группах по 3 человека.

Цель работы – определить содержание биофлавоноидов и фенольных кислот в образцах плодоовощной продукции при переработке и хранении.

Выполняются задания:

1. Подготовить лабораторные образцы плодоовощной продукции для исследований.

2. Выполнить определение содержания биофлавоноидов и фенольных кислот в образцах плодоовощной продукции.

3. Выполнить необходимые расчеты и статистическую обработку полученных результатов.

Материалы

1. Ягоды шиповника (свежие и замороженные) 300 г

Посуда

1. Пробирки стеклянные на 10 или 20 мл 9 шт.

2. Пипетки стеклянные на 2, 5 и 10 мл 3/3 шт.

3. Стаканы на 50 мл из термостойкого стекла 3 шт.

4. Колбы мерные на 50 мл с пробками 3 шт.

5. Колбы конические на 100 мл 3шт.

6. Воронки стеклянные маленького диаметра 3 шт.

Оборудование

1. Весы лабораторные точностью до 0,01 г 1 шт.

2. Ножницы 1 шт.

3. Ступки фарфоровые с пестиком 3 шт.

4. Спектрофотометр

5. Воронка Бюхнера Ǿ 10 см

6. Фильтровальная бумага

Реактивы

1. Дистиллированная вода

2. Этиловый спирт (бутылка)

3. Петролейный эфир (бутылка)

4. Реактив Фолина-Чокальтеу (бутылка)

5. 20 %-ный раствор Na₂CO₃ (карбоната натрия) (капельница)

6. 2 %-ный раствор AlCl₃ (хлорид алюминия) (капельница)

7. 8 %-ный раствор CH₃COOK (ацетат калия) или

5 %-ный раствор CH₃COONa (ацетат натрия) (бутылка)

Порядок выполнения лабораторной работы №11

Навески измельчённых плодов шиповника массой 10г растирают в фарфоровой ступке с 0,2–0,25г, заливают этанолом (из расчёта его конечной концентрации-80%), переносят в стеклянный стакан, нагревают в термостате при температуре не более 70 градусов в течение 30 минут, затем охлаждают, количественно переносят на фильтр и фильтруют через бумажный фильтр в конические колбы. Хлорофилл и каратиноидные пигменты удаляют промыванием фильтратов петролейным эфиром. Полученные экстракты переносят в мерные колбы, доводят их объём до 50 мл и используют для дальнейшего определения флавоноидов и оксикоричных кислот.

Для определения содержания биофлавоноидов отбирают 2 мл исходного раствора экстракта, помещают в пробирку с притертой пробкой, добавляют 2 мл 2 %-го раствора хлорида алюминия и 6 мл 5 %-го раствора ацетата натрия (или 8 % - го раствора ацетата калия).

Одновременно с испытуемыми образцами готовят контрольный раствор. В контроль вместо 2 мл 2 %-го раствора хлорида алюминия, добавляют 2 мл дистиллированной воды. В случае помутнения растворов их отфильтровывают в чистые пробирки через бумажный фильтр.

Приготовленные образцы выдерживают в темном месте при комнатной температуре в течение 2,5 часов, после этого измеряют оптическую плотность на спектрофотометре при длине волны 420 нм в кювете шириной 10 мм. Раствором сравнения служит вода.

Содержание биофлавоноидов в экстрактах (мг/г в пересчете на рутин) определяют, пользуясь калибровочным графиком (с.17). Расчет производят по формуле:

где: Х – содержание биофлавоноидов, мг/г;

D, D_к – оптическая плотность иссследуемого и контрольного образцов, отн. ед.;

а – содержание рутина, определяемое по калибровочному графику, мг/мл;

V_о – общий объем вытяжки, мл;

Р – степень разбавления;

M – масса образца ягод, г;

Результаты исследований содержания биофлавоноидов в плодах шиповника заносят в табл. 1.

Таблица 1 – Экспериментальные данные по определению содержания биофлавоноидов в плодах шиповника

Исследуемое сырье	№ пробы	Р	D	Dк	D-Dк	а, мг/мл	Х
отн.ед.	мг/г
Плоды (ягоды) свежие
Плоды (ягоды) замороженные