Методические указания к выполнению
РАБОТЫ:
ОПЫТ 1. Разделение медпрепаратов методом бумажной хроматографии (демонстрационный)
В пробирку налейте по 1 мл Н2О, толуола и 10 капель смеси, состоящей из растворов I2 и бриллиантового зеленого. Пробирку закройте пробкой и хорошо встряхните. Смесь разделится на две окрашенные зоны. Затем на полоске фильтровальной бумаги проведите стартовую линию карандашом на расстоянии 1 см от края. Поставьте точку в центре линии стеклянной палочкой, смоченной смесью I2 и «зеленки».
В стакан (100-150 мл) налейте 5 мл смеси растворителей (Н2О + толуол), опустите в эту смесь конец бумажной полоски и оставьте на некоторое время. Когда будет ясно видно два цветных пятна на бумаге, отметьте карандашом фронт распространения растворителя. Проведите прямую через центр нанесенной капли и образовавшихся пятен, измерьте расстояние от центра нанесенной капли до центра каждого пятна и занесите в табл. 12 полученные результаты.
Таблица 12
Название компонента смеси | Длина пути компонента | Длина пути фрон- та растворителя | Величина коэффициента подвижности |
Объясните распространение цветных пятен, учитывая, что бумага отрицательно заряжена, вода полярный, а толуол неполярный растворитель.
ОПЫТ 2.
А) Разделение красителей методом бумажной
Хроматографии
В стакан (100-150 мл) налейте 0,1 М раствор NaOH. Фильтровальную бумагу вырежьте полоской 30 мм и укрепите на проволоке. Простым карандашом нанесите стартовую линию на расстоянии 3 см от нижнего края полоски и финишную линию для растворителя на расстоянии от стартовой линии 7-8 см. На стартовой линии отметьте карандашом центры для четырех капель. Хорошо отточенными спичками нанесите чистые красители в отмеченные центры в следующей последовательности от левого края бумаги: 1) тимоловосиний; 2) метилкрасный; 3) фуксин.
На предметное стекло нанесите по 1 капле фуксина и метилкрасного и 2 капли тимоловосинего красителя, а затем чистой спичкой перемешайте капли и также нанесите смесь на подготовленную бумажную полоску. Затем опустите бумажную полоску с нанесенными каплями в стакан с раствором 0,01 М NaOH таким образом, чтобы проволока лежала на краях стакана. Когда фронт растворителя достигнет финишной прямой, выньте полоску из стакана и аккуратно подсушите над электроплиткой. Проведите параллельные прямые из центра капель до финишной прямой и замерьте это расстояние до центра каждого цветного пятна. Заполните такую же таблицу, как в опыте 1. Учитывая, что формула фуксина
или: R(NH2)+3Cl-
тимолового синего
или: R/−SO3H(α1)
и метилового красного СООН
или: R//−COOH(α2),
объясните распределение цветных пятен, если бумага отрицательно заряжена.